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化學發光免疫分析技術檢測孕婦TORCH感染的結果分析

2016-06-02 11:17:32代小英熊瑋平
國際檢驗醫學雜志 2016年9期

代小英,熊瑋平,姜 楠

(深圳華僑城醫院檢驗科,廣東深圳 518053)

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·臨床研究·

化學發光免疫分析技術檢測孕婦TORCH感染的結果分析

代小英,熊瑋平,姜楠

(深圳華僑城醫院檢驗科,廣東深圳 518053)

摘要:目的了解化學發光法檢測孕婦產前TORCH感染的情況。方法采用西門子IMMULITE2000全自動化學發光法對1 759例孕婦的血清進行TORCH 7項,包括弓形蟲IgM、IgG,風疹病毒IgM、IgG,巨細胞病毒IgM、IgG,單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ-IgG檢測。結果1 759例孕婦中弓形蟲IgM、IgG,風疹病毒IgM、IgG,巨細胞病毒IgM、IgG,單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgG的陽性率分別為0.17%、1.65%、3.35%、89.9%、0.51%、96.99%和92.67%。結論CMV-IgG感染率最高,其次為HSVⅠ+Ⅱ-IgG,TOX-IgM感染率最低,且化學發光法可對孕婦血清抗體量進行動態定量的監測。

關鍵詞:化學發光;孕婦;感染

TORCH是一組病原微生物英文名稱的字頭組合,TO指弓形蟲(TOX)、R指風疹病毒(RV)、C指巨細胞病毒(CMV)、H指皰疹病毒(HSV)。這組病原體感染孕婦后常致胎兒宮內感染,導致流產、早產、死胎、畸胎[1],或經產道和母乳感染新生兒引起多器官損害,但孕婦感染后常無癥狀或癥狀輕微,以致忽略或漏診。目前臨床檢測TORCH感染最常用的方法仍為ELISA定性試驗,但該法操作復雜,耗時耗力,結果影響因素較多且假陽性率高[2]。故本文采用化學發光免疫分析檢測TORCH 7項,現將結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料2014年8月至2015年8月來本院產前檢查的孕婦1 759例,年齡20~42歲。所有研究對象均上午空腹抽取靜脈血2~3 mL,4 000 r/min離心10 min,取血清2 h內進行檢測。

1.2儀器與試劑西門子IMMULITE2000全自動化學發光免疫分析儀及配套試劑盒,包括TOX-IgG、IgM,風疹病毒IgG、IgM,CMV-IgG、IgM,單純HSV-IgG、IgM試劑及試劑盒自帶的定標液和質控品。

1.3方法采用化學發光免疫分析(CLIA)檢測TORCH 7項,包括TOX-IgM、IgG,RV-IgM、IgG,CMV-IgM、IgG和HSVⅠ+Ⅱ-IgG。以聚苯乙烯珠子為固相載體包被單克隆小鼠抗IgM抗體或病原體抗原,堿性磷酸酶為發光標記物,通過IgM抗體捕獲或抗抗體法2步反應,光度計測定的光子輸出量與樣本中的病原體抗體量呈正比。

1.4結果判定TOX-IgG濃度大于8 IU/mL為陽性,RV-IgG濃度大于10 IU/mL為陽性,其余5項皆以大于1.1Index為陽性。

1.5統計學處理采用SPSS17.0軟件進行,檢驗方法采用描述性分析和χ2檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.11 759例孕婦TORCH 7項感染情況由表1可知,TOX、RV、CMV 3種病原體IgM抗體的總陽性率為4.03%,其中風疹病毒IgM最高,為3.36%,與其他2種比較差異有統計學意義(P<0.05),TOX-IgM感染率最低,僅有3例(0.17%),2周后復查,其中1例TOX-IgM轉陰、IgG 4倍升高,診斷為復發感染,1例TOX-IgM、IgG無明顯變化,為既往感染伴IgM長期存在,另外1例IgM轉陰,IgG一直陰性,為假陽性。IgG抗體共檢測了4項,見表2,其中CMV-IgG陽性率最高,達96.99%,其次為單純HSV-IgG,為92.67%,陽性率最低的是TOX-IgG,僅為1.65%。4種病原體IgG的陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 1 759例孕婦TORCH IgM抗體檢測結果

表2 1 759例孕婦TORCH IgG抗體檢測結果

2.2本地區與其他省市孕婦TORCH感染陽性率比較由表3可以看出,各地區TORCH感染陽性率差異較大,其中北京市和本地區均采用的化學發光法(CLIA)檢測,其他地區采用的酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測。本地區與深圳其他地區比較,化學發光法和酶聯免疫法檢測RV-IgG和 CMV-IgG的陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05),其他病原體抗體陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05),且ELISA 法檢測IgM的陽性率普遍偏高。無論何種方法檢測TORCH,各地區中均表現出TOX的感染率相對較低,而其他幾種病原體的感染率較高。

表3 本地區與其他地區TORCH感染陽性率比較(%)

*:表示檢測方法為化學發光法;-:表示缺少該項目的檢測數據。

3討論

本研究結果顯示,在孕婦的TORCH 7項檢查中,CMV的既往感染率最高(96.99%),因為人類是其天然宿主,在人群中的感染非常廣泛,達95%以上,這也與以往的調查研究結果一致[3],這一點從表3也可看出,本地區與其他省市的IgG結果無甚差別[4-8],沈陽地區除外,這可能與該地區人口結構有關。本地區CMV-IgM感染有9例(0.51%),最終有6例至今正常,2例早產,1例胚胎發育停止終止妊娠。在這些非正常的孕婦中,雖然CMV-IgM感染可能不是唯一絕對的原因,但應該是導致不利因素的重要原因之一。這也說明在平時的孕檢中醫生和患者應高度重視CMV-IgM的感染,CMV-IgM陽性的患者最好2~4周后再用化學發光法復查其IgM和IgG。若IgG有4倍及以上增高,而IgM升高、不變或降低,則應高度懷疑為現癥感染。而與深圳其他地區比較,ELISA 法檢測CMV-IgM的陽性率明顯過高,可能其中假陽性率較高。

另外,本地區風疹病毒的現癥感染率較CMV和TOX為高,也比深圳其他地區ELISA 法的檢出率為高。59例RV-IgM陽性(3.35%)的孕婦中,有45例2~4周后復查其IgG明顯上升,說明為現癥感染,有6例IgM、IgG無明顯變化為既往感染,3例在臨界左右的轉陰為假陽性,另外5例病例丟失。如此RV-IgM的實際感染率約在2.5%左右,從表3的比較來看,該項目在地區和方法間的差異不大。

TOX-IgM僅3例陽性(0.17%),其中只有1例診斷為復發感染,電話隨訪其胎兒正常,這說明近年來養寵物的家庭雖日益增多,但本地區人口對寵物或者TOX的認知率普遍較高,孕婦自我保護意識較強,故其感染率極低。

本文單純HSV檢測的是Ⅰ+Ⅱ型,并未分開。因為無論HSV-Ⅰ型還是HSV-Ⅱ型都可產生生殖器部位的皰疹,都可造成新生兒產道感染,且臨床治療策略也不會因為分型而有所不同[4]。同時本文并未對HSV-IgM進行檢測,因為HSV-IgM不能準確分辨新發感染和長期感染,它在復發感染時可以出現陽性,在初次感染時可能出現陰性,它是非病毒型特異抗體,因此HSV-IgM抗體檢測在常規臨床診斷中可用性有限,不被推薦在臨床常規使用[9]。本次HSVⅠ+Ⅱ-IgG的感染率高達92.67%,僅次于CMV-IgG,且1 759例孕婦基本都是在孕早中期做的檢測,孕早、中期發生初次感染造成胎兒感染的概率極低,但它可以為孕晚期確定初次感染還是復發感染提供治療和干預的依據[10],故對于孕婦而言,不需進行HSV-IgM的檢測,而是在孕早期或孕前檢測一次HSVⅠ+Ⅱ-IgG,孕晚期再復檢一次IgG,觀察兩次抗體量的變化最佳。

綜上所述,TORCH感染的血清學篩查對減少病殘兒的出生率及提高出生人口素質,優生優育具有重要現實意義,現在大多數單位采用的ELISA法均為定性檢測,不能動態觀察其抗體量的變化,很多時候不能區分既往感染和現癥感染,且該法費時費力,檢測TORCH中TOX-IgM和CMV-IgM兩項的假陽性率較高,而CLIA技術可直接對TORCH特異IgM抗體和IgG抗體進行動態定量檢測,具有特異性強、可信度高、省時省力等優點,是一種比較可靠的篩查孕齡婦女TORCH感染狀況的檢測方法。

參考文獻

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[10]Patel R,ALderson S,Geretti A.European guideline for the management of genital herpes,2010[J].Int J STD AIDS,2011,22(1):1-10.

(收稿日期:2016-02-03)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.057

文獻標識碼:A

文章編號:1673-4130(2016)09-1278-02

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