痰Xpert MTB/RIF檢查對涂陰肺結核的診斷價值

陜西省結核病防治院(西安710100)　石海萍　高　華

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痰Xpert MTB/RIF檢查對涂陰肺結核的診斷價值

陜西省結核病防治院(西安710100)石海萍高華

摘要目的：探討痰Xpert MTB/RIF檢查對涂陰肺結核快速診斷中的應用價值。方法：研究組選取在我院確診的涂陰肺結核90例，對照組選取我院同一時期住院期間診斷為肺部其他疾病患者40例，對兩組患者均行痰Xpert MTB/RIF、痰結核菌快速培養(BACTEC960)及血結核抗體檢查，比較不同方法在涂陰肺結核患者中的陽性率及痰Xpert MTB/RIF在涂陰肺結核與對照組的敏感性。結果：涂陰肺結核組痰Xpert MTB/RIF、痰結核菌快速培養、血結核抗體的敏感性分別為80%，45.6%， 25.6%；痰Xpert MTB/RIF與其他二者相比有明顯差異(P<0.01)；特異性分別為45%、97.5%、95%。結論:痰Xpert MTB/RIF檢查在涂陰肺結核診斷中具有快速、敏感性及特異性高的優點。

主題詞結核，肺/診斷分子生物學@痰Xpert MTB/RIF@ 痰結核菌快速培養

據統計2012年全球有結核病新發患者860萬例[1]，根據全國第五次結核病流行病學抽樣調查報告估算，我國15歲以上人群的活動性結核病患者人數499萬例[2]， 全球約三分之一的人群感染過結核分枝桿菌，其中十分之一可發展為活動性結核病[3]，控制結核病的主要環節為控制傳染源，治愈現癥肺結核患者，所以快速準確診斷是控制結核病的關鍵所在，但是菌涂陰肺結核往往因痰涂片陰性，而痰結核菌培養方法敏感性較低、檢測周期長等問題，給臨床上診斷帶來巨大的困難，往往造成延遲診斷、誤診及漏診。使涂陰肺結核得不到及時診斷及治療。痰Xpert MTB/RIF檢測技術是一種新型的分子生物學快速診斷技術，具有快速、敏感、準確等優點，本研究旨在通過研究探討痰Xpert MTB/RIF檢查技術在涂陰結核病中的快速診斷中的價值。

資料與方法

1研究對象選擇2013年5月至2014年10月在本院確診的涂陰肺結核患者90例，其他肺部疾病組(肺炎、肺癌、肺間質纖維化、矽肺)40例，其中男63例，女67例；年齡19～76歲，平均42.3歲。診斷均符合：涂陰肺結核病例指不同時間(晨痰，夜間痰，即時痰)痰涂片抗酸染色3次為陰性，并通過臨床癥狀、影像學、免疫學檢查 及診斷性抗結核治療療效觀察、最終臨床確診為涂陰結核。

2檢查方法對所有入選的所有患者行痰Xpert MTB/RIF、痰結核菌快速培養、血結核抗體檢查，分別計算痰Xpert MTB/RIF、痰結核菌快速培養、血結核抗體在涂陰肺結核診斷中的敏感性、特異性、判斷各自在涂陰肺結核中的診斷價值。

3檢測方法入選病例痰結核菌快速培養均按照國家標準進行檢測(Bacth960培養基)；痰Expert MTB/RIF檢測：將清晨深部痰標本(按5ml)與含有氫氧化鈉及異丙醇的處理液安常規比例2∶1進行混合，(如痰液中混有膿球，則按照3∶1的比例)震蕩，室溫靜置15min后將混合液轉移至一次性多室塑料反應盒中，置于Gene Xpert儀器中檢查，120min自動報告陽性、陰性及利福平耐藥情況。

4統計學方法本研究采用SPSS13.0 分析軟件進行分析，組間比較采用卡方檢驗，以P<0.05為有顯著性差異，P<0.01為有極顯著性差異。

結果

1痰Expert MTB/RIF在不同組別的檢測情況見表1。痰Xpert MTB/RIF在涂陰肺結核組陽性率為80.0%，在肺部其他疾病的陽性率為2.5%，兩者相比具有極顯著性差異(χ2=28.9，P<0.01)。

表1　痰Expert MTB/RIF在不同組別的檢測情況

2血結核抗體、痰Expert MTB/RIF、痰結核菌快速培養在涂陰肺結核診斷中比較見表2。涂陰肺結核組痰Expert MTB/RIF陽性率明顯高于血結核抗體及痰結核菌快速培養(χ2=24.8，P<0.05)。痰Expert MTB/RIF與血結核抗體特異性分別為97.5%、75%，兩者有顯著性差異(P<0.05)，痰Expert MTB/RIF與痰結核菌快速培養特異性無顯著性差異(P>0.05)。

表2　不同檢查在涂陰肺結核檢測情況比較

討論

涂陰肺結核是指經痰涂片抗酸染色至少3次為陰性的肺結核患者[4]。一直以來,結核病的診斷主要依靠痰涂片抗酸染色,但由于痰涂片對標本的含菌量要求高,據相關報道，痰涂片的陽性率僅為19.9%～35%[5]，導致其診斷結核病的敏感度較低,在肺結核中約有50%～70%的患者屬于涂陰結核菌(MTB)。由于缺乏細菌學診斷依據，菌陰肺結核的診斷遠比菌陽肺結核困難，臨床上不可避免地存在著誤診，本研究中入選病例130例、診斷為肺部其他疾病40例、另90例病例通過臨床癥狀、影像學、免疫學檢查 診斷性抗結核治療療效觀察、最終臨床確診為涂陰結核。

MTB/RIF檢測技術是一種新型的分子生物學快速診斷技術，MTB/RIF檢測診斷系統運用半槽式(Hemi-nested)RT-PCR及熒光探針報告(Beacontechnology),特異性擴增并檢測結核分枝桿菌特有并與利福平耐藥密切相關的rpoB基因片段。以PCR循環閾值反映標本中的結核分枝桿菌載量,進行半定量分析[6]，可以在120min內報告結果，操作簡便易行。通過本研究發現：將肺部其他疾病作為對照，痰MTB/RIF對涂陰肺結核診斷的敏感性和特異性分別為80.0%、特異性97.5%；痰結核菌快速培養對涂陰肺結核診斷的敏感性和特異性分別25.6%、95.0%，痰MTB/RIF與痰結核菌快速培養二者敏感性方面比較具有明顯差異；血結核抗體對涂陰肺結核診斷的敏感性和特異性分別為45.6%、25%，痰MTB/RIF與血結核抗體在敏感性方面比較具有顯著性差異，痰MTB/RIF對涂陰肺結核診斷在敏感性和特異性方面明顯優于血結核抗體和痰結核菌快速培養，可以使得大部分涂陰肺結核患者治療開始時間提前到檢測當天，部分培養肺結核患者的治療時間也大大提前。對肺結核的早期治療提供了良好的依據，也對控制傳染源，降低發病率開辟了新的途徑。

綜上所述，痰Expert MTB/RIF檢查在涂陰肺結核診斷中具有同時快速、敏感性和特異性較高的優點，在臨床中極大地縮短了涂菌陰肺結核的診斷時間，提前了肺結核的開始治療時間。

參考文獻

[1] World Health Organization.Global tuberculosis report 2013 [M].Geneva:WHO,2013:47.

[2] 全國結核病流行病學抽調技術指導組，全國結核病流行病學抽調辦公室. 2010全國肺結核患病率現況調查[J].中華結核呼吸雜志，2012，35(9):665-668.

[3] Jin J,Sun L,Jiao W,et al.SLCllAl(Formerly NRAMPl) geng polymorphisms associated with pediatric tuberculosis in China[J].Clin Infect Dis,2009,48(6):733-738.

[4] 中華醫學會.臨床醫學指南(結核分冊)[M].北京：人民衛生出版社，2005：64-86.

[5] 邢國勝，馬忠慧.耐藥肺結核166例耐藥性分析[J].陜西醫學雜志，2009，38(6)：757-758.

[6] 蔡闖.分枝桿菌及多重耐藥性的快速檢測:MTB/RIF實驗及檢測診斷系統[J]. 解放軍醫學雜志，2012，37(10)：23-25.

(收稿：2015-04-10)

【中圖分類號】R521

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.01.007