修正液對小鼠肝細胞的影響研究

胡師華,侯萌,鄭英平,江艷湖南省長沙市長沙醫學院

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修正液對小鼠肝細胞的影響研究

胡師華,侯萌,鄭英平,江艷
湖南省長沙市長沙醫學院

摘要：目的：觀察修正液對小鼠肝細胞的影響。方法：建立修正液對小鼠肝臟損害的模型，分為對照組和修正液組，檢測小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶，并于實驗結束取肝標本觀察肝組織病理學變化。結果：實驗顯示出修正液組小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶活力升高，可引起小鼠肝細胞形態學上的改變。結論：修正液對小鼠有一定肝臟毒性。

關鍵詞：修正液；肝細胞；谷丙轉氨酶；呼吸吸入

修正液作為一種廉價的實用文具，被廣泛應用于學生學習和文職工作中。根據調查顯示，在部分大中城市的中小學生中，使用修正類產品人數比例平均達到50％以上，有些學校甚至達85％以上。由于市面上修正液多含有有毒有機溶劑，主要集中體現在有機溶劑中有害物質——苯和氯代烴含量嚴重超標，氯代烴具有很強致癌性,特別對人體的肝臟損害很大，苯揮發性強[1]，損害消化系統，對于直接或者間接接觸者都會產生影響[1-2]。本研究制作了小鼠吸入修正液揮發性氣體的模型，探討了效應－劑量的關系，觀察肝細胞的形態學變化及損傷的特征，探討修正液對肝細胞的影響，可以為更好的防治因長期使用修正液導致損害機體的影響提供防治依據。

1、材料和方法

1.1、實驗材料實驗用品：為網絡渠道銷售的修正液。

1.2、動物和分組

1.2.1、動物：昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重25～30g，由長沙醫學院實驗動物中心提供。

1.2.2、分組小鼠置于自然通風有穩定的人工照明,溫度維持在（20±2）℃室內。自由進食和飲水,按性別隨機分為30min/d雄組、30min/d雌組、15min/d雄組、15min/d雌組、空白對照組共五組，每組8只。

1.3、動物模型制作模擬修正液環境取一40m×20cm×30cm的無蓋塑料盒，2/3盒頂覆蓋扎洞塑料膜，在距盒頂5cm處設置一鐵絲隔欄，隔欄上放置一玻璃皿，總共倒入10ml修正液，循環使用，每五天更換一次新修正液。在盒子側壁各開四個直徑1cm的小孔，使空氣對流，造成一個具有修正液氣味的環境。空白對照組：給予正常的條件飼養。30min/d雄組、30min/d雌組：放入5ml的等量修正液，讓其自然揮發。每天放入環境中30min。15min/d雄組、15min/d雌組：放入5ml的等量修正液，讓其自然揮發。每天放入環境中15min。每天一次，連續40天。

1.4、測定血清丙氨酸氨基轉移酶活力造模完成后，停止修正液吸入30天。12小時內不喂食，空腹小鼠尾靜脈采血，3000rpm離心10min，用改良的賴氏法測定血清中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)。

1.5組織形態學觀察對所取的肝臟組織進行常規石蠟包埋、切片、HE染色，用光學顯微鏡在10×10和10×40下進行觀察。

2、結果

2.1、各組吸入修正液小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶活力(表1)由表1可見，修正液吸入組小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶活力高于空白對照組，30min/d兩組小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶活力高于15min/d兩組。

表1　各組吸入修正液小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶活力(±s,n= 3)

表1　各組吸入修正液小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶活力(±s,n= 3)

組別　n　ALT（U/L）對照組　3　34.67±2.52 15min/d雄組　3　68.66±4.51 15min/d雌組　3　69.00±12.29 30min/d雄組　3　137.33±4.73 30min/d雌組　3　114.67±9.50

2.2、肝組織形態學變化光鏡結果顯示：空白對照組肝臟未見明顯病變。15min/d兩組部分肝小葉周邊的肝細胞胞漿疏松化，30min/d兩組結構被破壞較15min/d兩組嚴重，肝細胞輪廓均可見。15min/d雄、30min/d雄組正常肝小葉結構被破壞，但無明顯差異(圖2)。15min/d雌組肝細胞索結構尚存，30min/d雌組肝索結構消失，肝竇間隙狹窄，肝細胞排列紊亂，有變性、壞死的肝細胞(圖3)。

圖2.光鏡觀察小鼠肝組織病理形態學（HE×100）

圖3.光鏡觀察小鼠肝組織病理形態學（HE×400）

3、討論

本實驗表明，修正液對小鼠的肝細胞具有損害作用,小鼠與修正液接觸時間越長，肝細胞損傷越嚴重，說明與接觸時間成正相關性。。中國消協對市場上常見的修正液的成分檢驗結果顯示：19

種市場上常見的修正液都不同程度地含有苯、甲苯、二甲苯和幾種氣態鹵代烴[3]。對市場上的樣品分析，傷害將來源于修正液中超量的甲苯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯和鄰二甲苯，而且由于目前對于修正液中二甲苯化合物未加以控制，對于長期使用的青少年的傷害尤為嚴重。劉峻等檢測結果表明修正液中甲苯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯和鄰二甲苯風險指數大于1，會對青少年的健康風險產生影響[4]。帶香文具是小學生的最愛，它是加芳香烴一類具有揮發性的有機化合物，不僅影響人體的消化系統還會危害神經系統，嚴重時可損傷神經系統和消化系統，出現變態反應等[5]。由于作為修正液消費主力的青少年處于發育階段，長期使用修正液不當使得接觸和吸入量過多問題應引起重視。

修正液產品的質量、合格率和產業發展存在問題，修正液產品的成分檢測和發展優化需要靠廣大企業和相關部門共同努力[2]。使用者仍需注意規范修正液等香味文具的使用。

參考文獻：

[1]徐東群，韓克勤，張愛軍，等.揮發性有機化合物的檢測方法研究[J].中國環境衛生，2003，6(1-3):60-67.

[2]孫建強，周海安.修正液產品的發展與現狀分析[J].文體用品與科技，2008，(10)

[3]張偉亞，王成云，李英.涂改液中鹵代烴和苯系物的頂空氣質聯用測定法[J].環境與健康雜志，2003。20(1)：44～47.

[4]劉峻,韓陳,江艷,童永琪.修正液中苯系物風險評估及暴露評價[J].環境化學,2016,35(1):218-221

[5]龔永啟，胡芳，王福群.小學生衛生情況初步調查與分析[J].實用全科醫學，2007，(5)：10.

基金項目:長沙醫學院2015年大學生研究性學習和創新性實驗計劃項目長醫教[2015]15號-76。

作者簡介：胡師華（1995-），女，廣西柳州人，2013級臨床醫學本科在校生。

通訊作者：江艷（1989-），女，湖南益陽人，長沙醫學院教師。