人前列腺癌組織中ALKBH3及VEGF-C蛋白的表達(dá)>*

黃泓瑋，孫永得，李建華，武玉東

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科 鄭州 450052

人前列腺癌組織中ALKBH3及VEGF-C蛋白的表達(dá)>*

黃泓瑋，孫永得，李建華，武玉東#

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科 鄭州 450052

關(guān)鍵詞前列腺腫瘤；ALKBH3；血管內(nèi)皮生長因子-C

摘要目的：探討前列腺癌組織中ALKBH3蛋白的表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長因子-C(VEGF-C)關(guān)系。方法：采用免疫組化SP法檢測136例前列腺癌組織和129例前列腺增生組織中ALKBH3和VEGF-C蛋白的表達(dá)，分析前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白表達(dá)的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果：前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的陽性表達(dá)率高于前列腺增生組織(P<0.001)。ALKBH3和VEGF-C蛋白的表達(dá)與前列腺癌的組織分化、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的表達(dá)呈正關(guān)聯(lián)(rP =0.684，P=0.565)。結(jié)論：ALKBH-3可能與VEGF-C協(xié)同作用，促進(jìn)了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。

前列腺癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，目前對于前列腺癌的治療采取以根治性切除手術(shù)為主，以內(nèi)分泌治療及放療等綜合治療為輔的治療手段。早期的前列腺癌癥狀不明顯，因而錯過了手術(shù)治療的最好時機。目前臨床上對于前列腺癌的篩查主要依靠對前列腺特異性抗原(PSA)的檢測，但是在前列腺增生及前列腺炎組織中PSA也可以有異常表達(dá)。因此尋找一個敏感性強且具有特異性的前列腺癌腫瘤標(biāo)記物十分重要。近期的研究[1]表明ALKBH3與多種腫瘤有關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-C又稱淋巴管生成因子，可誘導(dǎo)多種惡性腫瘤細(xì)胞瘤內(nèi)或者瘤周的淋巴管生成或擴(kuò)張，與淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[2]。作者采用免疫組織化學(xué)法SP法檢測前列腺癌與前列腺增生組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的表達(dá)，探討ALKBH3和VEGF-C蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)及其與淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1對象與方法

1.1研究對象收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科2005年1月至2014年12月收治的前列腺癌患者的病理組織標(biāo)本136例，患者年齡53～85歲，中位年齡71歲。依照Gleason評分標(biāo)準(zhǔn)，高、中分化癌74例，低分化癌62例；按WHO的TNM標(biāo)準(zhǔn)，T1、T2和T3、T4期分別為69與67例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移89例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移47例。患者術(shù)前均未接受化療和內(nèi)分泌治療。選擇同期良性前列腺增生組織標(biāo)本129例，患者年齡50～81歲，中位年齡68歲。所有組織標(biāo)本均經(jīng)病理組織學(xué)確診。

1.2ALKBH3與VEGF-C的檢測采用免疫組織化學(xué)SP方法檢測ALKBH3和VEGF-C蛋白在前列腺癌及前列腺增生組織標(biāo)本中的表達(dá)。ALKBH3和VEGF-C一抗及二抗(SP-9002通用試劑盒)和DAB顯色試劑盒購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。所有標(biāo)本均4 μm厚切片，一抗稀釋100倍使用，DAB染色，蘇木素復(fù)染，常規(guī)脫水、透明、封片。以PBS代替一抗為陰性對照。ALKBH3與VEGF-C均以細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆?；螯S色顆粒為陽性細(xì)胞。在染色最密集處連續(xù)觀察5個高倍鏡視野，每個視野計數(shù)100個細(xì)胞，計算陽性細(xì)胞百分比：0為0分， ～20%為1分，～50%為2分，>50%為3分。染色強度記分：淡黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。以上兩者的乘積大于3為陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行分析。前列腺癌與前列腺增生組織中，不同病理分期、不同組織分化的前列腺癌組織中兩種蛋白的陽性表達(dá)率比較采用χ2檢驗。以列聯(lián)系數(shù)評估前列腺癌組織中兩種蛋白的表達(dá)關(guān)系。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.12種組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的表達(dá)

見圖1和表1。

2.2前列腺癌組織中ALKBH3和VEGF-C蛋白的表達(dá)和臨床病理特征的關(guān)系見表2。

2.3前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白表達(dá)的關(guān)聯(lián)性分析見表3。

A:前列腺增生組織;B:前列腺癌組織。圖1　前列腺增生與前列腺癌組織中VEGF-C(1)與ALKBH3(2)的表達(dá)(SP，×400)

例(%)

表2　前列腺癌組織中ALKBH3和

*:為校正χ2檢驗。

表3　ALKBH3與VEGF-C

χ2=55.768，rP=0.565。

3討論

ALKBH3是一個由286個氨基酸構(gòu)成的蛋白，是α-酮戊二酸加雙氧酶家族的成員之一。研究[3]認(rèn)為ALKBH3與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。研究[4]發(fā)現(xiàn)具有三螺旋結(jié)構(gòu)的ALKBH3可通過激活受體絡(luò)氨酸酶發(fā)揮調(diào)節(jié)細(xì)胞生長發(fā)育作用。作者的研究結(jié)果表明，ALKBH3蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)高于前列腺增生組織，提示ALKBH3與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。前列腺癌組織中ALKBH3蛋白的表達(dá)與不同病理分期、組織分化以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，病理分期高和組織分化差以及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者ALKBH3蛋白的表達(dá)水平高，說明ALKBH3蛋白與前列腺癌的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和浸潤過程有關(guān)。

VEGF是近年來第一個被發(fā)現(xiàn)的具有調(diào)節(jié)淋巴管生成作用的VEGF家族成員，又稱淋巴管生成因子，可誘導(dǎo)多種惡性腫瘤細(xì)胞瘤內(nèi)或者瘤周的淋巴管生成或擴(kuò)張，與淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)密切[5]。VEGF-C是目前比較公認(rèn)與熟知的用來評價腫瘤轉(zhuǎn)移的一個重要指標(biāo)。VEGF-C經(jīng)蛋白酶水解后，以前肽的形式存在，VEGF-C的受體有VEGFR-3和VEGFR-2，兩者均屬于絡(luò)氨酸激酶受體的家族成員，VEGFR-C能夠提高血管的通透性，能夠結(jié)合并激活VEGFR-3，刺激淋巴細(xì)胞有絲分裂并增生，從而促進(jìn)淋巴管的生成與淋巴管的轉(zhuǎn)移[6-8]。作者的研究結(jié)果表明，VEGF-C蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)高于前列腺增生組織，提示VEGF-C與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。前列腺癌組織中VEGF-C蛋白的表達(dá)與不同病理分期、組織分化以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，病理分期高和組織分化差以及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者VEGF-C蛋白的表達(dá)水平高，說明VEGF-C蛋白與前列腺癌的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和浸潤過程有關(guān)。

該研究中作者分析了前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白表達(dá)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)兩者呈正關(guān)聯(lián)，進(jìn)而推斷ALKBH3與VEGF-C可能具有協(xié)同作用，進(jìn)而促進(jìn)前列腺癌的分化與淋巴轉(zhuǎn)移。

綜上所述，ALKBH-3可能與VEGF-C具有協(xié)同作用，促進(jìn)前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

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Expressions of ALKBH3 and VEGF-C protein in human prostate cancer tissue

HUANGHongwei，SUNYongde，LIJianhua，WUYudong

DepartmentofUrology，theFirstAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

Key wordsprostate neoplasm;ALKBH3;VEGF-C

AbstractAim: To explore the expressions of ALKBH3 and VEGF-C in prostate cancer tissue.Methods: Immunohistochemical SP method was used to detect the expressions of ALKBH3 and VEGF-C in 136 cases of prostate cancer and 129 cases of prostate hyperplasia.Results: The positive expression rates of ALKBH3 and VEGF-C in prostate cancer tissue were higher than those in prostate hyperplasia tissue(P<0.001).The expressions of ALKBH3 and VEGF-C were related to the differentiation and TNM staging of prostate cancer(P<0.05). The expressions of ALKBH3 and VEGF-C were positively correlated in prostate cancer(rP=0.684，P=0.565).Conclusion: ALKBH-3 may have a synergistic effect with VEGF-C to promote the differentiation and lymph node metastasis of prostate cancer.

doi：10.13705/j.issn.1671-6825.2016.03.018

#通信作者，男，1966年8月生，博士，教授，研究方向：泌尿外科腫瘤與臨床，E-mail:wydkw@163.com

中圖分類號R737.25

*國家自然科學(xué)基金資助項目30801151