鹽脅迫作用下甲維鹽·毒死蜱對小白菜生理生化效應研究

張鳳鳳，魏建宏，羅　琳，張嘉超，劉玉玲，唐美珍（.湖南農業大學資源環境學院，長沙4028；2.湖南農業大學生物科學技術學院，長沙4028；.曲阜師范大學南四湖濕地生態與環境保護重點實驗室，山東曲阜2765）

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鹽脅迫作用下甲維鹽·毒死蜱對小白菜生理生化效應研究

張鳳鳳1，魏建宏2*，羅琳1，張嘉超1，劉玉玲1，唐美珍3
（1.湖南農業大學資源環境學院，長沙410128；2.湖南農業大學生物科學技術學院，長沙410128；3.曲阜師范大學南四湖濕地生態與環境保護重點實驗室，山東曲阜273165）

摘要：采用實驗室盆栽方法模擬小白菜田間施藥，設置正交實驗探究鹽脅迫與復配農藥甲維鹽·毒死蜱的復合污染對小白菜生理生化效應的影響，包括小白菜的生長狀況，葉綠素、還原性糖、可溶性蛋白和纖維素含量的變化。研究結果表明：在鹽脅迫和甲維鹽·毒死蜱交互作用下，小白菜的生長受到明顯抑制，且鹽分和甲維鹽·毒死蜱濃度越高，抑制程度越大；小白菜葉片中葉綠素、還原性糖、可溶性蛋白質、纖維素的含量隨土壤鹽分和甲維鹽·毒死蜱濃度的增加均有不同程度的變化，與對照組相比，其生理指標均有所降低。運用Duncan′s新復極差法對鹽脅迫和甲維鹽·毒死蜱作用進行主效應分析，結果表明農藥甲維鹽·毒死蜱對小白菜各項生理指標有顯著影響，鹽脅迫對小白菜各項生理指標有極顯著影響。

關鍵詞：鹽脅迫；甲維鹽·毒死蜱；小白菜；生理指標；正交試驗

張鳳鳳，魏建宏，羅琳,等.鹽脅迫作用下甲維鹽·毒死蜱對小白菜生理生化效應研究［J］.農業環境科學學報, 2016, 35（5）：850-857.

ZHANG Feng-feng, WEI Jian-hong, LUO Lin, et al. characteristics of non-heading Chinese cabbage under salt stresses［J］. Journal of Agro-Environment Science, 2016, 35（5）: 850-857.

土壤污染生態修復研究。E-mail：zhangff93@163.com

鹽漬土和土壤次生鹽漬化問題出現在世界各地的干旱、半干旱以及半濕潤地區，已成為制約土壤生態環境及農業健康發展的一個世界性資源與環境問題［1］，引起國內外環境及土壤相關領域學者的廣泛關注。Marcum［2］認為，土壤鹽分會在耕層大量積聚，高濃度的鹽分對植物根系正常的養分吸收及物質交換產生負面影響，因而農作物生長受到嚴重的抑制，從而造成大面積減產和歉收。鹽脅迫下，細胞膜系統的完整性受到破壞，因而抑制植物生長，進而影響其生理健康狀況［3］。

在土壤生態系統中，污染源往往多樣且復雜，除了鹽堿，還有農藥等制約因子對作物生長產生脅迫。毒死蜱（Chlorpyrifos，O，O-二乙基-O-3、5、6-三氯-2-吡啶基硫代磷酸酯）作為一種低毒、高效的廣譜性有機磷殺蟲劑，其復配農藥40%甲維鹽·毒死蜱不僅能夠替代大部分高毒殺蟲劑，而且降低生產成本，被大量使用［4］。毒死蜱施入農田后可有效控制作物蟲害的發生，同時也易被土壤吸附，消解作用緩慢［5］。正常量農藥的使用對病蟲害有防治作用，表面上對農作物沒有傷害，但其生理指標卻發生了明顯的變化［6-7］。已有研究表明，毒死蜱脅迫可顯著影響植物的生長及其生理生化過程，如毒死蜱可降低干旱條件下小麥的相對含水量、葉綠素含量［8］、丙二醛含量［9］和青菜植株中可溶性糖含量［10］，以及番木瓜幼苗的根系活力等［11］。甲維鹽和毒死蜱按不同配比復配后，雖有研究表明其藥效增強，可以減少害蟲對單一藥劑的抗藥性風險［12］，具有較大的社會效益和經濟效益，但其代謝產物3，5，6-三氯吡啶-2-酚（3，5，6-trichloro-2-pyridinol，TCP）具有較強的極性和水溶性，不僅會對環境產生潛在的威脅，也會對植物內部生理代謝產生復合作用。雖然不少學者研究了有關毒死蜱對作物的生理危害，但其復配后對作物的生理影響尚未進行過多探索，尤其缺少在北方鹽堿地條件下的研究。在有大面積鹽堿地的北方，研究鹽脅迫下復配農藥甲維鹽·毒死蜱對小白菜生理的影響，通過其生理指標（如葉綠素、還原性糖等）的含量來反映鹽脅迫與復合農藥對作物生長的影響，對鹽堿地區域蔬菜種植中農藥的合理使用具有重要的指導意義。

1　材料與方法

1.1供試農藥與小白菜

40%甲維鹽·毒死蜱由成都新朝陽生物化學有限公司生產；小白菜（Brassica campestris L. ssp. chinensis Makino）種子選用永安蔬菜良種繁育中心培育的原種“上海青”，購于蘇州寒山種業有限公司。

1.2供試土壤

供試土壤為棕壤，采自曲阜師范大學農場菜地，取0～20 cm表層土，自然風干并剔除石塊和植物殘體后，磨碎過篩（孔徑=1 mm）備用。土樣的理化性質［4］見表1。

1.3實驗設計

鹽（NaCl，分析純）濃度設3個處理水平（干土重）：0.3%、0.6%、1.2%，分別表示為A1、A2、A3。土壤中鹽濃度設定的依據為：根據我國土壤鹽漬化標準，土壤含鹽總量（干土重）＜0.3%，為非鹽漬土；土壤含鹽總量（干土重）=0.5%～1.0%，為中鹽漬土；土壤含鹽總量（干土重）=1.0%～2.2%，為強鹽漬土［4］。

40%甲維鹽·毒死蜱水乳劑是甲維鹽與毒死蜱按一定比例的混配農藥，其有效成分為甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽0.5%、毒死蜱39.5%［4］。土壤中甲維鹽·毒死蜱的有效濃度設3個處理水平：2.5、5.0、10.0 mg·kg-1，分別表示為B1、B2、B3。土壤中甲維鹽·毒死蜱濃度設定的依據為：甲維鹽·毒死蜱的農藥殘留田間施藥量分為低劑量450 g·hm-2、高劑量675 g·hm-2，農藥施用農田后初始浸潤土壤深度為0.3～0.4 cm［13］，甲維鹽·毒死蜱低劑量施用時在土壤中的降解半衰期為5.3 d［14］。

鹽和甲維鹽·毒死蜱復合污染土樣處理采用有交互作用的正交表L9（34）設計安排實驗［14-15］，正交實驗表及實驗結果記錄見表2。同時設空白對照。每個處理做三個平行，分別將風干土3 kg置于5 L塑料盆中，每盆播種20粒左右小白菜種子，在日光溫室中培養，控制其含水量為田間持水量的75%±5%，小白菜的萌發率在85%～90%之間，每盆有17～18株小白菜，待小白菜長至三葉后噴灑農藥及進行鹽脅迫。甲維鹽·毒死蜱一次性噴灑，噴灑量為50 mL；鹽溶液（約500 mL）均勻澆入盆中，并在花盆下面放置一個塑料小盤，使下滲的溶液得以保留，對照組則澆入自來水（加鹽溶液前幾天噴水少許，有利于鹽分在干燥土壤中迅速擴散）。培養期間進行適當的管護，防病蟲害，保證土壤水分充足，使之不會成為植物生長的限制因子。于處理后第5、10、15、25、35 d分別取不同處理下小白菜的葉片，依次用自來水、超純水沖洗干凈后測定小白菜中葉綠素、還原性糖、可溶性蛋白及纖維素的含量。

1.4測定方法

葉綠素用80%的丙酮提取后分光光度計法測定［16］；還原性糖用斐林試劑比色法測定；可溶性蛋白用紫外吸收分光光度法測定；纖維素用處理前后差值法計算［16］。

表1　供試土壤的主要理化性質Table 1 Basic physic-chemical characteristics of tested soil

1.5數據分析

實驗數據為3次平行處理的平均值，采用Excel 和SPSS 17.0進行統計處理，采用Duncan′s新復極差測驗法進行方差分析并繪制殘差圖。

2　結果與討論

2.1甲維鹽·毒死蜱對鹽脅迫下小白菜幼苗生長的影響

40%的甲維鹽·毒死蜱和NaCl分別作用及其復合污染對小白菜生長的影響如表2所示。在鹽脅迫下，施加的農藥濃度越高對幼苗生長的毒害作用越大。處理后第5 d，小白菜生長狀況開始發生變化，逐漸有發黃葉片產生；隨著處理時間的延長，其生長狀況變化更為顯著，發黃葉片增多、葉片脫落、植株矮小等；到第35 d時，其多數葉片已脫落，部分植株已枯死，表明鹽脅迫和甲維鹽·毒死蜱的共同作用嚴重影響了小白菜的生長。將小白菜的生長狀況劃分為好、較好、一般、較差和差五個等級，不同時間下各處理小白菜的生長狀況等級見表2。

2.2鹽脅迫下甲維鹽·毒死蜱對小白菜葉片生理生化指標的影響

2.2.1對葉綠素和還原性糖含量的影響

葉綠素含量的多少在一定程度上反映了植物光合作用強度的高低，從而影響植物的生長，葉綠素含量的降低將直接導致生物量下降［17］。從圖1a中可以看出：在鹽和農藥處理下，隨脅迫作用的增大，小白菜葉片的葉綠素含量呈下降趨勢。在低濃度鹽（0.3%）處理后第5 d，葉綠素含量下降比較平穩，隨農藥濃度的升高變化不明顯，葉綠素含量在短期低鹽刺激下略有上升，之后隨著鹽脅迫強度的增大和脅迫時間的延長而不斷下降，最高下降了近64%；隨著鹽濃度的升高，葉綠素含量降低，至實驗結束葉綠素含量基本穩定。總體來看，處理后第5 d葉綠素含量較高，處理后第25 d葉綠素含量變化幅度較大，且隨時間的延長和脅迫強度的增大，葉綠素含量逐漸降低。在第25 d，土壤含鹽量為1.2%和農藥量為0.09 g·m-2時，小白菜葉片葉綠素含量最低；到35 d時葉片已較少，尤其是高濃度鹽和高濃度農藥的實驗組已基本無葉片可取，整體來說葉綠素含量較低，但較第25 d時略有上升，可能是部分農藥揮發導致。以上結果表明，在鹽和農藥交互脅迫下，小白菜中葉綠素含量降低，鹽脅迫對葉綠素具有極顯著的破壞作用，且鹽和農藥共同作用對小白菜中葉綠素的破壞作用更大，均導致葉綠素的合成受到嚴重破壞，引起植株光合能力減弱［18］，說明復合污染加速了小白菜的衰老。

還原性糖是很多非鹽生植物的主要滲透調節劑［19］，也是合成其他有機溶質的碳架保護和能量來源，對細胞膜和原生質膠體也有穩定作用，在細胞內無機離子濃度高時起保護酶類的作用［20］。由圖1b可以看出：鹽和農藥組合為A1B3時，小白菜葉片中還原性糖含量最低，隨著鹽濃度的不斷增大，還原性糖含量呈緩慢上升趨勢，隨著農藥濃度的不斷增大，還原性糖含量呈下降趨勢；鹽和農藥組合為A3B2時，小白菜葉片中還原性糖含量達最大值，較最低值增加了34%。這與高鹽脅迫下生長率降低是由葉片中糖濃度增高產生反饋抑制［21-22］和毒死蜱降低了青菜植株中糖含量的觀點一致，說明在高鹽漬條件下還原性糖的積累具有重要意義。但隨著鹽和農藥脅迫時間的延長，還原性糖含量不斷降低，可能是呼吸作用的增強和光合作用的衰竭所致［23-24］。

表2　農藥對鹽脅迫下小白菜幼苗生長的影響Table 2 Growth of non-heading Chinese cabbage in soil treated with salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture

2.2.2對可溶性蛋白和纖維素含量的影響

植物體內的可溶性蛋白質大多數是參與各種代謝的酶類，其含量是植物體總代謝情況的一個重要指標，也是間接測定植物體內代謝強度的一個指標［25］。由圖2a可以看出：處理后第5 d時，在鹽濃度一定的情況下，隨著農藥濃度的升高，小白菜中的蛋白質含量升高；處理后第10 d，鹽濃度為0.3%時，隨著農藥濃度的升高，小白菜中的蛋白質含量降低，鹽濃度為0.6%和1.2%時，隨著農藥濃度的升高，小白菜中的蛋白質含量升高；處理后第15 d和第10 d的變化趨勢基本一致，隨著處理時間的延長，小白菜中的蛋白質含量均高于對照組，但總體呈下降趨勢。在農藥濃度一定的情況下，隨著鹽濃度的升高，蛋白質含量先下降后升高，表明農藥對小白菜的蛋白質合成或吸收有所影響。總體來看，在鹽和農藥脅迫下，小白菜的可溶性蛋白質含量與對照組基本持平，并隨脅迫時間的延長而有所降低，表明有機磷農藥對小白菜中蛋白質積累有一定的促進作用［26］，且鹽脅迫后可能產生較多的有害物質，小白菜在逆境條件下需要合成較多的酶類物質以清除這些有害物質。到第25 d后蛋白質含量變化幅度減小，說明農藥的殘留作用已經較小，只受鹽脅迫的影響。

由圖2b可以看出：在鹽濃度一定的情況下，隨著農藥濃度的升高，小白菜葉片中粗纖維含量有所降低，但影響不大。在農藥濃度一定的情況下，隨著鹽濃度的升高，小白菜葉片中纖維含量隨之降低。在鹽濃度和農藥濃度最高（A3B3處理）時，小白菜中的纖維素含量降至最低。總體來說，隨著脅迫天數的延長，葉片中纖維素的含量有所上升，但仍然低于對照組，說明農藥脅迫對葉片中纖維素的含量影響不顯著；而隨鹽脅迫的增強葉片中纖維素含量逐漸降低，則是由鹽濃度過高造成植物體內滲透壓變化引起的。

圖1　小白菜葉綠素和還原性糖含量Figure 1 Content of chlorophyll and reducing sugar in non-heading Chinese cabbage treated with salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture

圖2　小白菜可溶性蛋白及纖維素含量Figure 2 Concentrations of soluble protein and cellulose in non-heading Chinese cabbage treated with salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture

2.3鹽脅迫和甲維鹽·毒死蜱對小白菜葉片生理生化指標影響的主效應分析

2.3.1對葉綠素和還原性糖含量的方差分析

由表3可以看出，在單一農藥作用下，施藥初期，隨鹽分水平增加，小白菜中葉綠素含量顯著降低，表明鹽脅迫對葉綠素具有顯著的破壞作用；小白菜葉片中還原性糖的含量隨農藥濃度的升高受影響程度不明顯，但仍低于對照組。這說明，鹽脅迫對小白菜葉片中還原性糖含量雖有一定的促進作用，但農藥脅迫的影響大于鹽脅迫。

表4中F檢驗結果表明，農藥濃度對葉綠素含量有極顯著影響，農藥與鹽交互作用對葉綠素含量影響不顯著；鹽濃度對還原性糖含量有顯著的影響，農藥濃度和農藥與鹽交互作用對還原性糖含量的影響不顯著。

2.3.2對可溶性蛋白和纖維素含量的方差分析

由表5可以看出，在單一農藥作用下，隨著鹽濃度的升高，蛋白質含量先下降后上升，表明農藥對小白菜的蛋白質合成或吸收有一定影響。在鹽和農藥脅迫下，小白菜的可溶性蛋白質含量與對照組基本持平；而隨著鹽濃度的升高，小白菜葉片中粗纖維含量隨之降低，隨著脅迫天數的延長，葉片中粗纖維的含量有所上升，但仍然低于對照組。總體來看，農藥脅迫對葉片中可溶性蛋白和纖維素的含量沒有顯著影響。

表6中F檢驗結果表明，鹽濃度和農藥與鹽交互作用均對可溶性蛋白含量有極顯著影響，農藥濃度對可溶性蛋白含量影響不顯著；鹽濃度對纖維素含量有顯著影響，農藥濃度和農藥與鹽交互作用后對纖維素含量的影響不顯著。

表3　葉綠素和還原性糖含量測定結果Table 3 Content of chlorophyll and reducing sugar in soil treated with salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture

表4　葉綠素和還原性糖含量的方差分析結果Table 4 Variance of analysis of chlorophyll and reducing sugar quantity in non-heading Chinese cabbage

2.3.3對小白菜生理生化指標影響主效應分析的殘差結果

由圖3可以看出，鹽度對小白菜葉片中還原性糖含量和纖維素含量具有顯著影響，并且呈負相關，誤差限較小。模型模擬結果與上述結論一致，表明數據準確性與周期性良好；而農藥濃度與小白菜葉片中各生理生化指標含量并不呈線性關系，說明隨著時間的推移，噴灑的農藥有一定的降解，對小白菜的脅迫效應也有所減弱。模型模擬結果亦與上述結論一致。

在鹽和農藥脅迫下，小白菜葉片葉綠素含量、還原性糖含量、蛋白質含量、纖維素含量均有不同程度的變化。小白菜可以耐受一定范圍內的鹽和農藥脅迫，低濃度的鹽和農藥脅迫對小白菜的生長反而具有促進作用，但超過一定濃度時會抑制小白菜幼苗的生長。這種隨脅迫濃度加大而生物量積累減少的現象在其他植物中也有相似的報道［27-28］。小白菜細胞的滲透調節作用是有一定限度的，當鹽和農藥濃度過高時，細胞極度失水，細胞膜受到損傷，細胞產生膜泄露現象，離子和可溶性有機物質失去平衡，葉綠素分解，因此葉綠素含量明顯降低，此時滲透調節能力不能阻擋生理上的惡化過程［29］。對于鹽脅迫，小白菜可通過增加還原性糖含量進行滲透調節，但農藥濃度的升高會使葉片中還原性糖的含量下降，并且農藥脅迫對還原性糖含量的影響大于鹽脅迫，最終導致還原性糖含量下降。在鹽和農藥脅迫條件下，小白菜本身會產生抗逆機制，增加體內蛋白質含量以抵制不良環境的危害，所以小白菜葉片中的蛋白質含量在鹽和農藥脅迫下有所升高。對于小白菜葉片中的纖維素來說，鹽和農藥對其影響主要表現在對小白菜幼苗的影響上，低濃度的鹽和農藥脅迫對小白菜的生長具有促進作用，超過一定濃度時會抑制小白菜幼苗的生長，導致纖維素含量降低。隨著農藥在土壤中的降解，纖維素的含量有所回升，但當鹽和農藥超過一定濃度時會對小白菜造成不可逆影響，纖維素含量很少甚至沒有。

表5　可溶性蛋白和纖維素含量測定結果Table 5 Content of soluble protein and cellulose in soil treated with salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture

表6　可溶性蛋白和纖維素含量的方差分析結果Table 6 Variance of analysis of soluble protein and cellulose quantity in non-heading Chinese cabbage

3　結論

（1）鹽和農藥均對小白菜生理指標產生了一定的影響。在脅迫初期負面效應較大，但在脅迫后期其含量上升并基本恢復到對照水平，表明作物體在受到農藥脅迫后需要有一個較長的時間才能修復因農藥對作物植株本身造成的傷害。

（2）在高鹽和不同濃度的甲維鹽·毒死蜱分別脅迫及其復合脅迫作用下，小白菜能夠抵抗一定程度的鹽和農藥脅迫，并且小白菜對農藥的耐受程度更強一些。

今后應重點研究小白菜對鹽和農藥的抗性機制，探索小白菜或其他植物體內發揮耐受作用的大分子，以及脅迫因子如何在代謝層面影響植物生長，這對引導植物規避污染及調控植物生長有重要意義。

圖3　鹽脅迫和甲維鹽·毒死蜱對小白菜生理生化指標影響主效應分析的殘差圖Figure 3 General partial residual plot of analysis of characteristics of non-heading Chinese cabbage in vegetable soil

參考文獻：

［1］房朋,任麗麗,張立濤,等.鹽脅迫對雜交酸模葉片光合活性的抑制作用［J］.應用生態學報, 2008, 19（10）：2137-2142. FANG Peng, REN Li-li, ZHANG Li-tao, et al. Inhibition effects of salt stress on photosynthetic activity of Rumex K-1［J］. Chinese Journal of Applied Ecology, 2008, 19（10）：2137-2142.

［2］Marcum K B. Salinity tolerance mechanisms of grasses in the subfamily Chloridoideae［J］. Crop Science, 1999, 39（4）：1153-1160.

［3］Cramer G R, Lauchli A. Polito V S. Displacement of Ca2+by Na+from the plasmalemma of root ceels：A primary response to salt stress?［J］. Plant Physiol, 1985, 79（1）：207-211.

［4］袁敏,唐美珍,羅彥鶴,等.鹽脅迫下甲維鹽·毒死蜱對菜田土壤微生物生態效應研究［J］.農業環境科學學報, 2015, 34（10）：1936-1942. YUAN Min, TANG Mei-zhen, LUO Yan-he, et al. Effects of salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mix on ecological characteristics of microorganisms in vegetable soil［J］. Journal of Agro-Environment Science, 2015, 34（10）：1936-1942.

［5］吳慧明,朱國念.毒死蜱在滅菌和未滅菌土壤中的降解研究［J］.農藥學學報, 2003, 5（4）：65-69. WU Hui-ming, ZHU Guo-nian. Study on the degradation of chlorpyrifos in sterilized and nonsterilized soil［J］. Chinese Journal of Pesticide Science, 2003, 5（4）：65-69.

［6］劉井蘭,于建飛,印建莉,等.化學農藥對植物生理生化影響的研究進展［J］.農藥, 2006, 45（8）：511-514. LIU Jing-lan, YU Jian-fei, YIN Jian-li, et al. Research progress on the effect of chemical pesticides on plant physiology and biochemistry［J］. Agrochemicals, 2006, 45（8）：511-514.

［7］潘攀,楊俊誠,鄧仕槐,等.土壤-植物體系中農藥和重金屬污染研究現狀及展望［J］.農業環境科學學報, 2011, 30（12）：2389-2398. PAN Pan, YANG Jun-cheng, DENG Shi-huai, et al. Proceedings and prospects of pesticides and heavy metals contamination in soil-plant system［J］. Journal of Agro-Environment Science, 2011, 30（12）：2389-2398.

［8］張守棟,張同作,韓曉弟,等.褐藻膠寡糖對毒死蜱脅迫下小麥幼苗生理生化指標的影響［J］.生態學雜志, 2015, 34（5）：1277-1281. ZHANG Shuo-dong, ZHANG Tong-zuo, HAN Xiao-di, et al. Alleviation effects of spraying alginate-derived oligosaccharide on physiological indexes of wheat seedlings under chloryrifos stress［J］. Chinese Jour-nal of Ecology, 2015, 34（5）：1277-1281.

［9］Gechev T. Willekens H, Montagu M, et al. Different responses of tobacco antioxidant enzymes to light and chilling stress［J］. Journal of Plant Physiology, 2003, 160（5）：509-515.

［10］蔣新宇,馬愛軍,何任紅.毒死蜱脅迫對青菜幼苗生長和抗氧化系統的影響［J］.安徽農業科學, 2010, 38（33）：18918-18919. JIANG Xin-yu, MA Ai-jun, HE Ren-hong. Effect of chlorpyrifos stress on seedling growth and activities in antioxidant enzymes of green grocery［J］. Journal of Anhui Agricultural Science, 2010, 38（33）：18918-18919.

［11］謝志南,林麗仙,鐘贊華.毒死蜱對番木瓜生理生化及植株生長的影響［J］.熱帶作物學報, 2009, 30（4）：478-484. XIE Zhi-nan, LIN Li-xian, ZHONG Zan-hua. Effects of chlorpyrifos on physio-biochemical characteristics and plant growth of papaya［J］. Chinese Journal of Tropical Crops, 2009, 30（4）：478-484.

［12］張戰泓,劉建宇,戴建平,等.甲維鹽與毒死蜱復配對水稻稻縱卷葉螟防治效果研究［J］.湖南農業科學, 2010（9）：63-65, 68. ZHANG Zhan-hong, LIU Jian-yu, DAI Jian-ping, et al. Control effect of combination of emamectin-benzoate and chlorpyrifos against Cnaphalocrocis medinalis Guenee［J］. Hunan Agriculture Science, 2010（9）：63-65, 68.

［13］勞家檉.土壤農化分析手冊［M］.北京：農業出版社, 1988. LAO Jia-cheng. Soil agricultural chemistry analysis manual［M］. Beijing：Agricultural Press, 1988.

［14］南京農業大學.田間試驗和統計方法［M］.北京：農業出版社, 1979：163-781. Nanjing Agricultural University. Field trail and statistical method［M］. Beijing：Agricultural Press, 1979：163-781.

［15］杜榮騫.生物統計學［M］.北京：高等教育出版社, 2003. DU Rong-qian. Biostatistics［M］. Beijing：Higher Education Press, 2003.

［16］張志良,瞿偉箐.植物生理學實驗指導［M］.三版.北京：高等教育出版社, 2003. ZHANG Zhi-liang, QU Wei-jing. Plant physiology experiments［M］. Third edition. Beijing：Higher Education Press, 2003.

［17］汪貴斌,曹福亮.鹽脅迫對落羽杉生理及生長的影響［J］.南京林業大學學報（自然科學版）, 2003, 27（3）：11-14. WANG Gui-bin, CAO Fu-liang. Effects of salinity on growth and physiology of bald cypress seedlings［J］. Journal of Nanjing Forestry University（Natural Sciences Edition）, 2003, 27（3）：11-14.

［18］王偉.中山杉無性系幼苗耐鹽特性及機理研究［D］.南京：南京林業大學, 2010：6. WANG Wei. Study on salt-resistant characteristics and mechanism of clone seedlings of Taxodium hybrid［D］. Nanjing：Nanjing Forestry U-niversity, 2010：6.

［19］王敏,曲存民,劉曉蘭,等.溫度脅迫下甘藍型油菜苗期生理生化指標的研究［J］.作為雜志, 2013（2）：53-59. WANG Min, QU Cun-min, LIU Xiao-lan, et al. Studies on physiological and biochemical indexes by temperature stress at seedling stage in Brassicanapus L.［J］. Crops, 2013（2）：53-59.

［20］Nicolosi R J, Woolfrey B, Wilson T A, et al. Decreased aortic early atherosclerosis and associated risk factors in hypercholesterolemic hamsters fed a high- or mid-oleic acid oil compared to a high-linoleic acid oil［J］. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2004, 15（9）：540-547.

［21］Munns R. Physiological processes limiting growth in saline soils：Some dogmas and hypothesis［J］. Plant, Cell & Environment, 1993, 16：15-24.

［22］肖克脆,吳普特,雷金銀,等.不同類型耐鹽植物對鹽堿土生物改良研究［J］.農業環境科學學報, 2012, 31（12）：2433-2440. XIAO Ke-cui, WU Pu-te, LEI Jin-yin, et al. Bio-reclamation of different halophytes on saline-alkali soil［J］. Journal of Agro-Environment Science, 2012, 31（12）：2433-2440.

［23］馮立田,趙可夫.葉綠體對鹽脅迫的某些生理適應機制［J］.植物學通報, 1998, 15（增刊）：62-67. FENG Li-tian, ZHAO Ke-fu. Some physiological adaptive mechanisms of chloroplasts to salt stress［J］. Chinese Bulletin of Botany, 1998, 15 （Suppl）：62-67.

［24］Thakur M, Sharma A D. Salt-stress-induced proline accumulation in germinating embryos：Evidence suggesting a role of proline in seed germination［J］.Journal of Arid Environments, 2005, 62（3）：517-523.

［25］Heyser J W, Nabors M W. Growth, water content and solute accumulation of two tobacco cell lines cultured on sodium chloride, dextran and polyethylene glycol［J］. Plant Physiology, 1981, 68（6）：1454-1459.

［26］王麗燕,趙可夫.玉米幼苗對鹽脅迫的生理響應［J］.作物學報, 2005, 31（2）：264-266. WANG Li-yan, ZHAO Ke-fu. Some physiological response of zea mays under salt-stress［J］. Acta Agronomica Sinica, 2005, 31（2）：264-266.

［27］王麗萍,崔美香,孟艷玲. NaCl脅迫對黃瓜幼苗生長及抗氧化系統的影響［J］.西北農業學報, 2007, 16（4）：170-173. WANG Li-ping, CUI Mei-xiang, MENG Yan-ling. Effects of NaCl strew on growth and antioxidant systems of cucumber seedlings［J］. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2007, 16（4）：170-173.

［28］代莉慧,蔡祿,張魯剛,等. NaCl和Na2CO3脅迫對鹽爪爪種子萌發過程中生理生化變化的研究［J］.種子, 2011, 30（11）：53-55. DAI Li-hui, CAI Lu, ZHANG Lu-gang, et al. Study on the effect of NaCl and Na2CO3stress on the physiological and biochemical changes of seed Kalidium foliatum during germination［J］. Seed, 2011, 30（11）：53-55.

［29］唐紅楓,生秀梅,熊麗,等.有機磷農藥對小白菜中可溶性蛋白質及SOD、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase和CAT的影響［J］.華中師范大學學報（自然科學版）, 2006, 40（1）：82-85. TANG Hong-feng, SHENG Xiu-mei, XIONG Li, et al. The impact of organophosphates pesticide to soluble proteins and several oxidant enzymes in vegetable［J］. Journal of Central China Normal University （Natural Science）, 2006, 40（1）：82-85.

中圖分類號：X503.231

文獻標志碼：A

文章編號：1672-2043（2016）05-0850-08

doi:10.11654/jaes.2016.05.005

收稿日期：2015-11-08

基金項目：銦提取過程污染控制與管理方案研究（201309051）；國家國際科技合作專項（2013DFG91190）

作者簡介：張鳳鳳（1992—），女，漢族，山東臨沂人，碩士生，主要從事

*通信作者：魏建宏E-mail：weijianhong111666@163.com

Effects of combined emamectin benzoate-chlorpyrifos on physiological and biochemical characteristics of nonheading Chinese cabbage under salt stresses

ZHANG Feng-feng1, WEI Jian-hong2*, LUO Lin1, ZHANG Jia-chao1, LIU Yu-ling1, TANG Mei-zhen3
（1.College of Resources & Environment, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2.College of Bioscience & Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 3.Key Laboratory of Nansihu Lake Wetland Ecosystem & Environment Protection, Qufu Normal University, Qufu 273165, China）

Abstract：The impacts of salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture on physiochemical characteristics of non-heading Chinese cabbage were investigated using orthogonal experimental design and pot culture. Parameters such as chlorophyll, reducing sugar, soluble protein and cellulose of non-heading Chinese cabbage were chosen. Results showed that the physiochemical parameters were inhibited in varying degrees by salt and emamectin benzoate-chlorpyrifos mixture in a dose-effect mode. The values for these parameters decreased with increasing levels of contaminants. The main effect by using Duncan′s new multiple range method analysis indicated that the pesticide had a significant effect while the salt had an extremely significant effect on physiochemical characteristics of non-heading Chinese cabbage.

Keywords：salt stress; emamectin benzoate-chlorpyrifos; non-heading Chinese cabbage; physiochemical characteristics; orthogonal experiment