抗磷脂抗體檢測在系統性紅斑狼瘡中的臨床應用

魏　萍，王艷俠，石書梅，張愛平，馬　健

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抗磷脂抗體檢測在系統性紅斑狼瘡中的臨床應用

魏萍，王艷俠，石書梅，張愛平，馬健

[摘要]目的評估抗磷脂抗體包括抗心磷脂抗體（Acl）和抗β2糖蛋白Ⅰ抗體（anti-β2GPⅠ）在系統性紅斑狼瘡（SLE）中的臨床應用價值。方法采用酶聯免疫吸附法（ELISA）對確診的120例SLE和100例健康體檢者血清Acl（IgG、IgM、IgA）和anti-β2GPⅠ（IgA/G/M）水平表達進行測定，并分析其對SLE的敏感度和特異度，及血清Acl和anti-β2GPⅠ水平間的相關性。統計學分析采用Χ2檢驗。結果SLE組血清Acl-IgG、Acl-IgM、Acl-IgA、Acl-IgG/IgM、anti-β2GPⅠ陽性率分別為6.7％、4.2％、1.7％、5％、18.3％，均高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論anti-β2GPⅠ抗體對SLE的敏感度高于Acl，建議兩種抗體聯合檢測，有助于提高檢出率。

[關鍵詞]抗磷脂抗體；系統性紅斑狼瘡；抗心磷脂抗體；抗β2糖蛋白Ⅰ抗體；抗磷脂綜合征

抗磷脂抗體（antiphospholipid antibodies，APLs）是一組作用于磷脂和（或）磷脂結合蛋白的異質性抗體。由APLs介導的，以動靜脈血栓形成、血小板減少和病態妊娠為特點的一組自身免疫性疾病則稱為抗磷脂綜合征（antiphospholipid syndrome，APS）。2006年悉尼國際分類標準[1]已將IgG型和/ 或IgM型的抗心磷脂抗體（anticardiolipin，Acl）和抗β2糖蛋白Ⅰ抗體（anti-β2GPⅠ），以及狼瘡抗凝物作為實驗室指標納入APS的診斷標準。抗磷脂抗體是抗磷脂綜合征患者血清中重要的標志性抗體。繼發性抗磷脂綜合征常繼發于自身免疫性疾病，尤其是系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）[2]。系統性紅斑狼瘡是一種可表達多種自身抗體的自身免疫性疾病，也一定程度地表達Acl和 anti-β2GPⅠ。

1　資料與方法

1.1一般資料收集2012年3月—2014年12月筆者所在醫院腎內科、皮膚科、血液科、血液凈化科等門診及住院患者血清標本220例，其中120例確診為系統性紅斑狼瘡。男20例，女100例；年齡15～70歲，平均33歲。其余100例為健康對照組，來自院體檢中心進行健康查體的健康人群。

1.2儀器與試劑檢測用酶標儀為DNM-9606，選用的Acl試劑盒由德國ORGENTEC提供，antiβ2GPⅠ抗體試劑盒由EUROMMUN提供。

1.3方法用普通真空采血管采集受試者空腹靜脈血3 ml，室溫靜置30min，1200 r/min離心5min收集血清，保存于-20℃冰箱待用。采用酶聯免疫吸附法，同時檢測SLE組和健康對照組血清中的不同亞型（IgG、IgM、IgA型）抗心磷脂抗體（Acl）和antiβ2GPⅠ抗體水平，其中IgG型Acl＞10 U/ml為陽性，IgM型Acl＞7 U/ml為陽性，IgA型Acl＞10 U/ml為陽性，anti-β2GPⅠ抗體＞20 RU/ml為陽性，操作按說明書。

1.4統計學分析應用SPSS13.0統計學軟件。采用Χ2檢驗（理論頻數＜1時采用Fisher精確檢驗）比較SLE組、健康對照組中抗磷脂抗體的陽性率。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

見表1、2。

表1　兩組抗磷脂抗體的檢測結果

表2　SLE組不同抗磷脂抗體的敏感度、特異度（％）

3　討論

隨著檢測技術的發展，Acl和抗β2GPⅠ抗體逐步被臨床廣泛應用?？沽字贵w可能是導致系統性紅斑狼瘡患者腎小球微血栓的主要原因，其可導致腎的血管性損害，即腎的非炎癥性血栓性血管病，在狼瘡性腎炎患者中抗磷脂綜合征腎病是另一個損害腎的重要因素，嚴重者可危及生命。抗磷脂抗體和狼瘡性腎炎關系密切，對于狼瘡性腎炎患者，應注意檢測抗磷脂抗體及抗磷脂綜合征腎病，給予合理的治療?？沽字C合征是動靜脈及小血管血栓形成的重要原因，也是90％的復發性流產的主要原因。由于抗磷脂綜合征的臨床表現缺乏特異性，因此其診斷和鑒別診斷非常依賴抗磷脂抗體實驗室檢測的結果。由于文獻報道IgM型APLs與IgG型相比與抗磷脂綜合征的相關性較弱，因此國內部分實驗室僅開展了IgG型Acl的檢測，但是Salobir等[3]和Ota[4]的研究小組均發現部分血栓和復發性流產患者中僅存在IgM型APLs。IgA型APLs的臨床價值仍然存在爭議，但有文獻報道IgA型抗β2GPⅠ抗體常常伴隨抗磷脂綜合征臨床癥狀出現，并且22％的惡性APS患者中僅IgA型抗β2GPⅠ抗體陽性[5]。第13屆抗磷脂抗體國際大會建議在高度懷疑APS，IgG型和IgM型抗體均陰性的患者中應該檢測IgA型抗體。

該研究中，Acl-IgG、Acl-IgM、Acl-IgA、Acl-IgG/IgM和抗β2GPⅠ抗體在SLE中的陽性率分別為6.7％、4.2％、1.7％、5.0％和18.3％，IgG型Acl是陽性率最高的Acl亞型。IgG型Acl、IgG/IgM型ACl和抗β2GPⅠ抗體的陽性率在不同組中的差異有統計學意義，其余指標的陽性率無明顯差異。SLE患者組中，Acl陽性的患者中6.7％僅IgG亞型陽性，5％IgG/IgM亞型陽性，該組120例SLE中，臨床上僅15例被診斷伴有APS，所以抗體的檢出率總體較低。

在SLE患者組中，抗β2GPⅠ抗體的敏感度高于IgG/M/A型Acl，因此IgG/M/A型Acl不適合作為Acl的初篩試劑，建議同時檢測IgG、IgM和IgA型抗心磷脂抗體和抗β2GPⅠ抗體，有助于提高檢出率，有助于減少漏診和臨床患者的及早診斷和治療。當然，在有條件的實驗室，如果患者血清中antiβ2GPⅠ抗體陽性，可對其anti-β2GPⅠ抗體進一步分型，確定anti-β2GPⅠ的亞型（IgG/IgM/IgA）。據相關文獻報道，如果3種抗體亞型均陽性，提示患者發生血栓或病態妊娠的風險更高，并且患者復發的概率也更高[6]。有研究報道，Acl和抗β2GPⅠ抗體在單純的SLE組中的陽性率及水平顯著低于SLE伴APS組，提示此兩種抗體的檢測對預測SLE繼發APS有重要的評估價值，對鑒別SLE是否伴有APS有重要的參考價值[7]?？功?GPⅠ抗體比Acl檢出率高，所以抗β2GPⅠ抗體可作為抗磷脂綜合征的篩查。

綜上所述，該研究評估了檢測這兩種抗體的價值，探討如何選擇正確的檢測項目，提高檢測的敏感度和特異度。臨床實驗室應當重視IgM、IgA型抗磷脂抗體的臨床價值，建議有條件的實驗室均應開

展Acl 3種亞型抗體和anti-β2GPⅠ抗體的聯合檢測，提高APS診斷的敏感性和特異度，并且重視該兩種抗體均陽性的高風險預測價值。

參考文獻

[1]Miyakis S，Lockshin MD，Atsumi T，et al. International consensus statement on an update of the classification creteria for definite antiphospholipid syndrome（APS）[J]. J Thromb Haemost，2006，4（3）：295-306.

[2]Biggioggero M，Meroni PL. The geoepidemiology of the ntiphospholipid antibody syndrome[J].Autoimmun Rev，2010，9：A299-A304.

[3]Salobir B，Sabovic M，Hojnik M，et al. Anti-beta 2-glycoprotein Ⅰantibodies of IgM class are linked to thrombotic disorders in yong women without autoimmune disease[J]. Immunobiology，2007，212（2）：193-199.

[4]Ota K，Dambaeva S，Lee J，et al. Persistent high levels of IgM antiphospholipid antibodies in a patient with recurrent pregnancy losses and rheumatoid arthritis[J].Am J Reprod Immunol，2014，71（3）：286-292.

[5]Ruiz-García R，Serrano M，Martínez-Flores JA，et al. Isolated IgA anti-β2 glycoproteinⅠantibodies in patients with clinical criteria for antiphospholipid syndrome[J].J Immunol Res，2014：70（4）：395.

[6]Pengo V，Ruffatti A，Legnani C，et al.Clinical course of highrisk patients diagnosed with antiphospholipid syndrome[J].J Thromb Haemost，2010，8（3）：237-242.

[7]韓曉蓓，孫桂榮，劉明軍，等.抗磷脂綜合征相關自身抗體臨床應用價值評估[J].中華檢驗醫學雜志，2014，37（8）：851-854.

[2015-11-12收稿，2015-12-10修回]

[本文編輯：董冰媛]

The clinical application of antiphospholipid antibodies detection in systemic lupus erythematosus

WEI Ping，WANG Yan-xia，ZHANG Ai-ping，et al. Nephrosis Laboratory Center，the General Hospital of Jinan Military Region，Jinan，Shandong 250031，China

[Abstract]Objective To investigate the prevalence and clinical significance of different subtypes（IgG，IgM，IgA）of anticardiolipin antibodies（Acl）and anti-β2-glycoproteinⅠantibodies（anti-β2GPⅠ）in systemic lupus erythematosus（SLE）. MethodsIgG，IgM，IgA Acl and anti -β2GPⅠwere tested by enzyme -linked immunosorbent assay（ELISA）in the 120 patients with SLE and 100 healthy controls. The sensitivity and specificity of Acl and anti-β2GPⅠfor the diagnosis of SLE and the correlation of serum Acl and anti-β2GPⅠlevels were analyzed with Χ2test. Results The positivity rates of Acl-IgG，Acl-IgM，Acl-IgA，Acl-IgG/IgM，antiβ2GPⅠwere 6.7％，4.2％，1.7％，5％，18.3％respectively，which were significantly higher in the SLE group than those in the healthy controls（P＜0.05）. ConclusionThe sensitivity of anti-β2GPⅠfor SLE is higher than that of Acl.The Acl and anti-β2GPⅠare advised to co-test to improve the detection rate.

[Key words]Antiphospholipid antibodies；Systemic lupus erythematosus；Anticardiolipin antibodies；Beta 2-GlycoproteinⅠ；Antiphospholipid syndrome

[中圖分類號]R593.24

[文獻標志碼]A

DOI：10.14172/j.issn1671-4008.2016.05.005

[作者單位]250031山東濟南，濟南軍區總醫院腎內科腎病實驗中心（魏萍，王艷俠，石書梅，張愛平，馬健）