兩種不同方法對乙型肝炎病毒感染血清指標檢測結果的比較

韋志鵑

(中國人民解放軍第一八四醫(yī)院，江西鷹潭 335000)

·臨床研究·

兩種不同方法對乙型肝炎病毒感染血清指標檢測結果的比較

韋志鵑

(中國人民解放軍第一八四醫(yī)院，江西鷹潭 335000)

摘要:目的探究時間分辨熒光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附試驗在乙型肝炎病毒感染血清學標志物靈敏度和準確度的比較。方法將該院門診及住院部2015年10～12月收治的300例乙型肝炎患者作為研究對象，分別使用時間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗對乙型肝炎病毒感染血清學標志物進行檢測，確定時間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測的效率。結果時間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗對于乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測的準確度及敏感度差異顯著，時間分辨熒光免疫法具有更高的檢測準確度及敏感度。時間分辨熒光免疫法診斷符合率為98.00%，酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷符合率為78.33%，時間分辨熒光免疫法對于乙型肝炎病毒的診斷有效率顯著高于酶聯(lián)免疫吸附試驗。結論時間分辨熒光免疫法對于乙型肝炎病毒感染血清學標志物的檢測效率高于酶聯(lián)免疫吸附試驗，時間分辨熒光免疫法具有更高的推廣價值。

關鍵詞:時間分辨熒光免疫法；乙肝病毒血清標志物；酶聯(lián)免疫法

乙型肝炎(以下簡稱乙肝)病毒又稱為丹氏顆粒，其為嗜肝DNA病毒科的一種微生物，可以引發(fā)多種急、慢性肝炎病，我國有1億左右的乙肝病毒攜帶者，其中有3 000萬的乙肝患者，尋找一種經濟、快速、簡便的乙肝病毒篩查方法十分必要，其在乙肝病毒篩查過程中具有重要的意義[1]。時間分辨熒光分析法、微粒子酶免疫試驗以及酶聯(lián)免疫吸附試驗都是檢測乙肝病毒感染血清學標志物的重要方法，筆者研究了時間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗對于乙肝病毒感染血清學標志物的實際檢測效果，現將研究結果報道如下。

1資料和方法

1.1一般資料選取本院門診及住院部2015年10～12月收治的300例乙肝患者，所有患者診斷標準均嚴格按照我國相關檢測要求，排除了其他肝炎類型患者。300例乙肝患者包括男172例，女128例，年齡19～46歲，平均(38.5±5.7)歲。入院后的患者次日清晨空腹靜脈取血5 mL，及時分離血清后備用。

1.2檢測方法使用廣州豐華Auto TRFIA-4 全自動熒光免疫分析儀和試劑，對比檢測使用濰坊三維生物的酶聯(lián)免疫試劑，科華生物的ST-96W洗板機以及ST360酶標儀。時間分辨熒光分析法：將試劑復溫，添加樣本后再加入標記物工作液，恒溫振蕩反應后洗滌反應板，再使用增強液后檢測結果。酶聯(lián)免疫吸附試驗：準備好洗滌液和去離子水，試劑溫度恢復至室溫，使用加樣器加取樣品，加入酶標液后震蕩混勻恒溫孵育，最后加A、B顯色液，待加完終止液后上機檢測。

1.3評價標準時間分辨熒光免疫法:使用計算機對血液樣本進行標準曲線繪制，依據標準曲線對被測定物含量進行陰陽性鑒別。酶聯(lián)免疫吸附試驗：樣本核心抗體以及乙肝病毒e抗體檢測光密度低于臨界值為陽性；樣本表面抗體、乙肝病毒表面抗原以及e抗原的檢測密度高于或者等于臨界值為陽性。

1.4統(tǒng)計學處理實驗觀察結束后將數據結果錄入數據庫進行分析，數據使用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計、分析，計數資料采用χ2檢驗；P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2結果

2.1乙肝病毒感染血清學標志物檢測結果比較時間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗對于乙肝病毒感染血清學標志物陽性率進行比較，發(fā)現時間分辨熒光免疫法在乙肝病毒感染血清學標志物陽性檢出率上均高于酶聯(lián)免疫吸附試驗，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1　　乙肝病毒感染血清學標志物陽性檢出率比較[n(%)]

2.22種方法診斷準確率比較時間分辨熒光免疫試驗診斷符合率為98.00%，酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷符合率為78.33%。時間分辨熒光免疫法對于乙肝病毒的診斷有效率顯著高于酶聯(lián)免疫吸附試驗，見表2。

表2　　2種方法診斷結果準確率比較[n(%)]

3結論

作為全球范圍內最為廣泛的肝臟病癥，乙肝患者會出現明顯的肝臟炎性病變。如果沒有得到及時、有效的治療，乙肝患者很大概率上轉變?yōu)楦斡不瑖乐貢r甚至轉變?yōu)楦伟虼藭颊咴斐蓢乐氐暮蠊鸞2]。特異性血清病原學檢查是現如今診斷乙肝的主流方法，該方法通過對患者血清樣品中乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量進行檢測來確定患者的患病情況[3]。

我國具有龐大的乙肝病毒攜帶人群以及乙肝患者，乙肝病毒攜帶者篩查以及診斷是非常繁重的工作，尋找經濟合適的診斷、篩查方法對于提高乙肝診斷敏感度以及有效率非常重要，因而需要經過多重試驗，反復證明來確定合適的乙肝病毒血清標志物檢測方法[4]。

乙肝血清表面標志物是用于檢測受檢人員是否攜帶有乙肝病毒最為可靠的方式，本研究比較了時間分辨熒光分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗對于乙肝血清標志物的檢測效果。其中的酶聯(lián)免疫吸附試驗是一種傳統(tǒng)的檢測乙肝病毒血清標志物的方法，早在20世紀60年代已經用于臨床檢測乙肝病毒血清標志物，該種方法通過將制作的抗體與某些固定載體相結合從而有效保證其結合活性，再將其與酶連接成酶標的抗體，將含有底物的樣品與其混合后通過酶的催化反應使底物發(fā)生顏色變化而得到檢驗結果[5]。該種方法操作簡單，花費低，易于廣泛推廣，其已經成為我國基層醫(yī)院廣泛使用的一種乙肝病毒檢測方法。可該種方法有比較明顯的缺點，需操作者嚴格按照要求進行操作，不然很容易受到外界的污染，且存在前滯現象，故存在比較高的假陽性率，患者出現誤診以及漏診的概率也比較高[6]。此外，酶聯(lián)免疫吸附試驗只能對乙肝進行定性的分析，無法對患者體內的標志物濃度進行實時的監(jiān)測，無法有效檢測乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量較低的患者，具有比較低的準確度以及敏感度。時間分辨熒光分析法作為一種非同位素免疫分析技術，其結合了同位素標記以及酶標記，該種方法具有比較高的靈敏度，其對于乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體的檢測效率是酶聯(lián)免疫吸附法的數倍，該種方法可靠、有效，具有較高的靈敏度，且具有比較寬的線性范圍，試劑的使用周期也比較長，可以制作出比較穩(wěn)定的標準曲線，也可以對檢測底物進行定量的分析，可以逐步取代酶聯(lián)免疫吸附試驗成為檢測乙肝病毒的首選方法。此外，時間分辨熒光分析法同樣適用于大批量樣本的檢測，可以在較短的時間內獲得檢測的結果，也方便臨床根據檢測出的乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量制定相應的治療方法[7-8]。

本研究結果顯示，時間分辨熒光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附試驗對于乙肝病毒感染血清學標志物檢測的準確度以及敏感度差異顯著，時間分辨熒光免疫法具有更高的檢測準確度以及敏感度。時間分辨熒光免疫法診斷準確率為98.00%，酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷準確率為78.33%，時間分辨熒光免疫法對于乙肝病毒的診斷有效率顯著高于酶聯(lián)免疫吸附試驗。可以認為，作為一種檢測乙肝血清學標志物新型的非放射免疫定量檢測方法，時間分辨熒光免疫法具有更高的檢測靈敏度，可以有效減少乙肝檢測的誤診率以及漏診率，亦可以通過對患者體內的乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗體、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗體、乙肝病毒核心抗體含量進行定量分析，總結出患者的病情程度，便于準確評估患者的病情發(fā)展情況以及其傳染性，確定相應的治療方案，為臨床診斷以及治療提供可靠地依據。

參考文獻

[1]王麗萍．時間分辨熒光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志物的對照探究[J]．國際檢驗醫(yī)學雜志，2015，36(7)：994-995．

[2]吳阿陽，陳忠進．酶聯(lián)免疫吸附法和時間分辨熒光免疫法在檢測乙型病毒性肝炎中的效果比較[J]．中國現代藥物應用，2012，6(13)：34-35．

[3]羅惟，張杰．時間分辨熒光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒血清標志物的比較[J]．現代醫(yī)藥衛(wèi)生，2015，12(12)：1855-1856．

[4]馬春靜，鄒薇，王麗．時間分辨熒光免疫法定量檢測乙肝病毒血清標志物的臨床意義[J]．中外醫(yī)療，2015，36(17)：188-189．

[5]馬興璇，劉春明，王林春．時間分辨熒光免疫分析法定量檢測845例乙型肝炎標志物結果分析[J]．檢驗醫(yī)學與臨床，2013，10(4)：441-442．

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[7]譚業(yè)克．時間分辨熒光免疫法在乙肝標志物檢測中的應用價值[J]．基層醫(yī)學論壇，2012，16(16)：2071-2072．

[8]樊少勇．時間分辨熒光免疫法在新生兒先天性甲狀腺功能減退中的檢測分析[J]．臨床合理用藥雜志，2013，6(6)：106．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.059

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)10-1429-03

(收稿日期：2016-01-07)