血小板形態和功能在體外循環中的變化研究

黃 麗(四川省珙縣人民醫院檢驗科，四川 珙縣 644501)

血小板形態和功能在體外循環中的變化研究

黃 麗
(四川省珙縣人民醫院檢驗科，四川 珙縣 644501)

目的 探討體外循環對患者血小板形態和功能的影響。方法 選擇76例體外循環患者，分別在術前和術后第1、3、5、7天檢測患者血小板的計數、平均體積、體積分布寬度、聚集率、血漿顆粒膜蛋白。結果 與術前比較，血小板計數在第1～3天明顯下降(P< 0.05)，第5～7天恢復正常(P> 0.05)；血小板平均體積和體積分布寬度等指標在術后第1、3、5、7天均無明顯變化(P> 0.05)；術后第1、3天時血小板聚集率顯著下降，血漿顆粒膜蛋白表達明顯增高(P< 0.05)，術后第5、7天時兩者逐漸恢復正常(P> 0.05)。結論 體外循環對血小板的形態無明顯損傷，但在術后3天之內明顯損傷了血小板的功能，3天之后逐漸恢復正常。

血小板；體外循環；形態；功能；

體外循環(cardiopulmonary bypass，CPB)是利用一系列特殊人工裝置將人體靜脈血引流到體外，經人工方法進行氣體交換，調節溫度和過濾后，輸回體內動脈系統的生命支持技術。在體外循環過程中，由于人工裝置取代了人體功能，因此也稱心肺轉流，體外循環機也稱為人工心肺機[1]。進行CPB是為了在實施心中直視手術時，維持全身組織器官的血液供應。隨著臨床醫學的發展，CPB的應用范圍不斷擴展，不僅在心臟、肝、腎、肺等大血管手術中獲得應用，在腫瘤治療、心肺功能衰竭患者的生命支持方面也取得令人矚目的成績，成為臨床醫學的一門重要技術[2]。由于血液在CPB中的停留時間較長，各種有形成分均受到一定影響，凝血功能受到損傷[3]。血小板作為血液有形成分之一，其主要功能為止血和凝血，目前尚無任何一種藥物能夠代替其功能[4]。本研究對血小板體外循環前后的形態和功能進行檢測，探討體外循環對血小板的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年12月至2016年3月在我院心臟外科住院，擬在CPB下行心臟直視手術的患者76例，其中男47例，女29例，年齡(55±16.52)歲，體重(59±13.52) kg，心功能Ⅱ～Ⅳ級，ASAⅢ～Ⅳ級。排除標準:術前凝血異常的患者；肝腎功能不全的患者。退出標準:CPB時間小于100 min的患者；術中或術后24小時內死亡的患者。

1.2 方法 分別在術前、術后第1、3、5、7天抽取患者標本，檢測:①血小板計數(PLT)、血小板平均體積(MPV)、體積分布寬度(PDW):按常規法用XT-2000型血細胞計數儀測定。②血小板聚集率(PAgT):采用全血電阻抗法測定血小板最大聚集率，嚴格按照標準操作規程進行操作。③血漿顆粒膜蛋白(GMP-140):應用GMP-140 ELISA檢測試劑盒(上海雙贏生物科技有限公司)進行檢測，嚴格按照說明書進行操作。

1.3 統計學方法 采用SPSS 15.0統計學軟件進行數據處理。計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用重復測量資料的方差分析。P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 PLT計數及形態指標的變化 與術前比較，術后第1～7天的MPV和PDW無明顯變化(P> 0.05)，PLT計數在術后第1～3天明顯下降(P< 0.05)，第5～7天恢復正常(P> 0.05)，見表1。

表1 PLT、MPV及PDW檢測結果

*與術前比較，P< 0.05

2.2 血小板功能的變化 與術前比較，PAgT在術后第1～3天明顯降低(P< 0.05)，GMP-140的表達明顯升高(P< 0.05)。但是在術后第5～7天，兩者均恢復正常(P> 0.05)，見表2。

表2 PAgT和GMP-140的檢測結果

*與術前比較，P< 0.05

3 討論

心血管類手術基本上要在CPB的支持下才能進行，由于CPB機器管道介面的異物性、血流切應力、血氣接觸、低溫、魚精蛋白和肝素的應用等原因，血小板的數量、形態和功能均發生改變，釋放生物活性物質，造成凝血功能障礙及微血管栓塞[5]。目前認為，血小板數量和功能的改變是導致CPB下心內直視手術后非外科出血的主要原因[6]。本研究所示，CPB結束之后的第1～3天，PLT顯著降低，第5～7天逐漸恢復正常。不過，雖然PLT在前3天顯著下降，但是PLT仍然處于正常范圍之內(PLT>100×109)。需要引起我們注意的是，PLT計數處于正常范圍之內，并不代表血小板功能正常，因為血細胞計數儀檢測血小板時，血小板主要以顆粒的方式呈現，此時的計數只與血小板的大小和形狀有關，而與血小板功能沒有直接關系[7]。

血小板依靠黏附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮這五大作用來維持血管內皮完整性，修復血管，發揮止血和凝血的功能，其中血小板的聚集是血小板發揮止血功能和形成血栓的主要環節[8，9]。本研究顯示血小板聚集率在CPB術后第1～3天明顯下降，說明CPB嚴重損傷了血小板的聚集功能。血小板富含大量的α顆粒，當其受到外界刺激和活化時，GMP-140就會表達在血小板表面，因此，GMP-140是判斷血小板活化的特異性指標[10]。因此，測定GMP-140的表達，可特異性地反映血小板活化和破壞程度。本研究顯示GMP-140的表達在CPB術后第1～3天明顯增強，說明血小板活化程度顯著增高，破壞增多。研究發現，CPB導致血小板釋放ADP減少，并且激活脫粒血小板，此時GMP-140表達的改變最具特異性和敏感性[11，12]。因此，監測GMP-140可以判斷血小板功能的變化。

研究發現，CPB導致血小板激活釋放的可溶性CD40配體(Scd40L)，能夠促進炎癥反應和血栓形成。另外，由于血小板表面α2腎上腺素能受體的明顯減少，血小板的聚集功能顯著下降。這些因素綜合作用，導致或者加重術后出血及并發癥的發生[13，14]。在CPB術前，利用血小板分離技術從患者自身抽取并分離富血小板血漿(PRP)的辦法能夠改善術后出血[15]。血小板分離技術可以將患者的血液分離為PRP、貧血小板血漿(PPP)和濃縮紅細胞三部分。濃縮紅細胞及PPP可以在適當時候回輸給患者；PRP既可以減少CPB對血小板造成的破壞，還可把PRP與鈣離子及凝血酶混合，制備自體血小板膠(APG)。APG可用于術中止血、封閉傷口、促進傷口和胸骨的愈合。

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Changes of morphology and function of platelet in cardiopulmonary bypass

HUANGLi
(DepartmentofClinicalLaboratory，GongxianPeople'sHospital，Gongxian644501，China)

Objective To investigate the effects of cardio-pulmonary bypass on the morphology and function of platelets.Methods Platelet count，average volume，volume distribution width，aggregation rate (PAgT%) and GMP-140 were determined in 76 patients with cardiopulmonary bypass at pre-operation and on 1，3，5 and 7 days after operation.Results Compared with the preoperative，platelet count was significantly decreased on postoperative day1 to day3 (P< 0.05).The decrease was restored on postoperative day 5 to day7 (P> 0.05).Average volume and volume distribution width of platelet had no significant changes on postoperative day1，3，5 and 7(P> 0.05).PAgT% was decreased significantly and GMP-140 was increased significantly on postoperative day1 and 3 (P< 0.05).PAgT% and GMP-140 had no significant changes in the postoperative day 5 and 7 (P> 0.05).Conclusion There was no significant damage to the platelet morphology in the extracorporeal circulation.However，the function of platelets was obviously damaged within 3 days after operation and returned to normal after 3 days of operation.

Platelet； Cardiopulmonary bypass； Morphology； Function

R446.11+1

A

1672-6170(2016)05-0094-03

2016-05-09；

2016-06-24)