2種豬瘟疫苗對豬群的免疫效果評價

朱方磊，周芳芳，李進，李國攀，榮俊，熊濤

長江大學生物醫藥研究所，湖北 荊州 434025；長江大學生命科學學院，湖北 荊州 434025

2種豬瘟疫苗對豬群的免疫效果評價

朱方磊，周芳芳，李進，李國攀，榮俊，熊濤

長江大學生物醫藥研究所，湖北 荊州 434025；長江大學生命科學學院，湖北 荊州 434025

[摘要]采用阻斷ELISA檢測血清抗體的方法對2種豬瘟疫苗的免疫效果進行了評價，結果顯示：(1)豬瘟活疫苗A(脾淋源)的免疫效果與免疫劑量和次數沒有明顯關系；(2)豬瘟活疫苗B(細胞源)在加強免疫后2倍劑量的抗體保護率比單倍劑量更高；(3)隨著免疫時間(80d內)的增加，2種試驗疫苗的抗體保護率都在提高，但在一次免疫后20d內均不能達到較好的免疫保護效果。

[關鍵詞]豬瘟疫苗；免疫效果；抗體保護率

豬瘟(Classical Swine Fever, CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus)引起豬的一種以高熱和出血為特征的高度接觸性和致死性傳染病[1]。該病是危害我國養豬業發展的一種重要疫病，我國自1954年開始推廣使用豬瘟兔化弱毒疫苗以來，豬瘟疫情得到了有效控制，但該病不時仍有發生[2～4]。為了解2015年政府招標的豬瘟活疫苗的免疫效果，筆者于2月20日在湖北省內的3個豬場對豬場指定的2個廠家生產的豬瘟活疫苗(脾淋源和細胞源)進行了免疫效果評價試驗，同時與豬場自購的豬瘟細胞源疫苗的免疫效果進行了比較，現將試驗結果報告如下。

1材料與方法

1.1材料

試驗動物為湖北省3個豬場內的未免疫豬瘟疫苗的斷奶仔豬。

受試疫苗為豬場指定2個廠家生產的豬瘟疫苗A(脾淋源)和B(細胞源)，以及豬場自購疫苗C(細胞源)。

試劑豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(阻斷ELISA)，由北京愛德士元亨生物科技有限公司生產。

1.2方法1.2.1A疫苗在豬場1豬群中的免疫試驗

在豬場1中選擇未免疫豬瘟疫苗30日齡左右的仔豬180頭作為試驗樣本。試驗豬群隨機分為7組(1～7組)，1～3組使用豬瘟疫苗A分別按免疫推薦劑量1、2、4倍進行1次免疫，每組16頭；4～6組使用豬瘟疫苗A分別按免疫推薦劑量1、2、4倍進行2次免疫，每組33頭；第7組(對照組)分別使用豬場自購豬瘟活疫苗C按豬場免疫程序進行2次免疫，樣本33頭；分欄飼養。初選豬群采血后開展母體抗原檢測并進行第一輪免疫(簡稱一免)注射；30d后，對4～7組進行加強免疫。對1～3組，分別于一免后20、50、80d于前腔靜脈采血測抗；對4～7組，分別于一免后30、50、80d于前腔靜脈采血測抗。

表1　A疫苗在豬場1豬群中的免疫試驗分組及注射和采血方法

1.2.2A疫苗在豬場2豬群中的免疫試驗

在豬場2中選擇未免疫豬瘟疫苗30日齡左右的仔豬180頭作為試驗樣本，隨機分為6組(1～6組)，使用豬瘟活疫苗A免疫。1～3組分別按照疫苗使用正常劑量1、2、4倍作一免；4～6組分別按照疫苗使用正常劑量1、2、4倍作加強免疫。各組做好標記，分欄飼養，所有樣本仔豬于前腔靜脈采血測抗。1～3組分別于一免后20、50d于前腔靜脈采血測抗；4～6組，分別于一免后20d、二免后20、50d于前腔靜脈采血測抗。

表2　A疫苗在豬場2豬群中的免疫試驗分組及注射和采血方法

1.2.3B疫苗在豬場3豬群中的免疫試驗

在豬場3中選擇未免疫豬瘟35日齡左右的仔豬150頭作為試驗樣本，隨機分為5組(1～5組)，使用豬瘟活疫苗B免疫。1～3組分別按照豬瘟疫苗正常劑量1、2、4倍免疫一次；分別于免疫前、免疫后21d和51d，前腔靜脈采血。4～5兩組分別按照豬瘟疫苗正常劑量1、2倍間隔30d作加強免疫；分別于免疫前、二免后21d和51d，前腔靜脈采血。

表3　B疫苗免疫采血試驗

1.3檢測方法及結果判定

分離血清后，使用北京愛德士元亨生物科技有限公司的豬瘟病毒抗體檢測試劑盒，按照說明書步驟，采用阻斷ELISA方法檢測血清抗體。檢測樣本光密度值阻斷率≥40%判定為抗體水平合格。

2結果與分析

2.1不同豬瘟疫苗對豬群的一免效果

如圖1～3所示，2種試驗疫苗一免在20d內都不能達到較好的免疫保護效果，但隨著時間(80d內)的增加，免疫保護率逐漸提高。豬瘟活疫苗A(脾淋源)在2個豬場免疫保護率存在差異，豬場1的免疫保護率明顯偏低，可能是檢測環境和豬群群體差異等因素導致，但免疫保護率隨時間逐漸提高的趨勢相同。

圖1　A疫苗免疫后檢測合格率統計(豬場1)

圖2　A疫苗免疫后檢測合格率統計(豬場2)

圖3　B疫苗免疫后檢測合格率統計(豬場3)

2.2不同豬瘟疫苗對豬群的加強免疫效果

如圖4～6所示，在對豬群進行加強免疫后，在二免后20d內2種疫苗的免疫保護率都能得到不同程度的增加，值得注意的是，豬瘟活疫苗A(脾淋源)在1倍劑量二免后50d免疫保護率卻會下降，綜合2次免疫結果來看，豬瘟活疫苗(脾淋源)免疫效果與免疫劑量和次數沒有明顯關系。豬瘟活疫苗B(細胞源)1、2倍劑量加強免疫后，免疫保護率60%、80.8%與一免同期保護率25.0%、30.8%相比，2倍劑量加強免疫在21d后抗體保護率差異明顯。一免效果不好，但加強免疫后，免疫保護率顯著提高。

圖4　A疫苗加強免疫檢測合格率統計(豬場1)

圖5　A疫苗加強免疫檢測合格率統計(豬場2)

3討論

自20世紀50年代中國首創了豬瘟兔化弱毒疫苗(即C株)以來，隨后又發展了不同的疫苗制造工藝，如細胞培養苗、乳兔組織苗和牛體反應組織苗等[5,6]。CSF脾淋源活疫苗是用異源活體動物組織細胞生產，代次低、免疫效果好、安全性高，并且在脾淋源活疫苗中富含有免疫增強作用的細胞因子，非特異性免疫應答反應優于細胞源活疫苗和乳兔組織苗,緊急預防接種效果好，但存在生產流程復雜、質量不易控制等問題[7,8]。

本研究所用CSF細胞源活疫苗B一次免疫效果不明顯，在二次免疫豬群后，抗體的保護率明顯上升，而CSF脾淋源活疫苗A在二次免疫豬群后，抗體保護率也有一定程度的提高，這與在其他省市報道的豬瘟活疫苗免疫效果類似[9，10]。CSF脾淋源活疫苗A在不同的豬場的免疫保護效果不一樣，這可能與豬瘟疫苗質量及豬場檢測環境有關，廠家不同批次的疫苗以及保管運輸環節等都直接影響豬瘟的免疫效果。因此，應加強對豬瘟疫苗的質量監控和豬場環境的管理，以便正確綜合評價豬瘟疫苗的免疫效果。

[參考文獻]

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[9]孫彥偉，查云峰，田云，等.三個廠家豬瘟活疫苗免疫效果比較試驗[J].廣東畜牧獸醫科技，2012,37(2)：29～32.

[10]修金生，吳順意，周倫江，等.不同規模豬場種豬豬瘟抗體檢測與豬瘟凈化[J].福建農業學報，2010,25(2):235～238.

[收稿日期]2016-02-24

[基金項目]中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所獸醫生物技術國家重點實驗室開發基金項目(2014H19001)。

[作者簡介]朱方磊(1987-)，男，碩士生，研究方向為基因工程疫苗。通信作者：熊濤，xiongtaohotmail.com。

[中圖分類號]S852.65+1

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-1409(2016)15-0033-05

[引著格式]朱方磊，周芳芳，李進，等.2種豬瘟疫苗對豬群的免疫效果評價[J].長江大學學報(自科版) ，2016，13(15)：33～37.