多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR變化的臨床意義

麻鴻飛 季生吉

多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR變化的臨床意義

麻鴻飛 季生吉

目的 探討多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR水平檢測的臨床意義。方法 選擇遼寧撫順礦務局總醫(yī)院2012-01—2015-01收治的50例多發(fā)性骨髓瘤患者，設為實驗組，另選取50例健康體檢者作為對照組。采用ELISA檢測法對兩組血漿suPAR水平進行分析。結(jié)果 實驗組患者血漿suPAR水平明顯高于對照組，其中進展期多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR水平高于穩(wěn)定期患者，均P＜0.01。但穩(wěn)定期患者與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義。31例進展期患者化療前后血漿suPAR水平明顯下降，與化療前比較，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。結(jié)論對多發(fā)性骨髓瘤患者動態(tài)觀察血漿suPAR水平變化有助于對化療療效的判斷以及對預后的評價。

多發(fā)性；骨髓瘤；尿激酶型纖溶酶原激活劑

多發(fā)性骨髓瘤是漿細胞惡性克隆增殖性疾病，多因惡變克隆漿細胞無節(jié)制增殖、浸潤以及分泌大量單克隆免疫球蛋白所致[1]。可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體 (suPAR)是尿激酶受體(uPAR)的可溶形式。研究表明[2]，惡性漿細胞表面有uPAR表達，uPAR與配體尿激酶(uPA)結(jié)合對纖溶酶原的活化、信號傳遞及細胞黏附和轉(zhuǎn)移等具有重要的生理和病理意義。本研究選取50例多發(fā)性骨髓瘤患者行suPAR檢測，探討血漿suPAR水平對多發(fā)性骨髓瘤患者診斷及預后的重要作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2012-01—2015-01收治的50例多發(fā)性骨髓瘤患者設為實驗組，均符合《血液病診斷及療效標準》中的相關診斷標準[3]，經(jīng)骨髓形態(tài)學及免疫球蛋白血癥鑒定確診。其中男33例，女17例，年齡40～69歲，平均(59.1±3.3)歲；IgA型19例，IgG型18例，IgM型9例，不分泌型4例；穩(wěn)定期19例，進展期31例。31例進展期患者均給予VAD方案化療，同時給予沙利度胺，400～800 mg/d。另選取50例健康體檢者作為對照組。兩組患者均排除其他心腦血管疾病，肝腎疾病以及感染性疾病，兩組性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性，P＞0.05。

1.2 suPAR檢測方法

1.2.1 標本采集 所有患者均于清晨空腹抽取靜脈血3 mL，EDTA抗凝，離心時間：30 min，轉(zhuǎn)速：1 000 r/min，分離血漿，-70℃凍存待測。

1.2.2 測定方法 采用ELISA法，uPAR試劑盒對suPAR值進行檢測。試劑盒由美國R&D公司生產(chǎn)，深圳晶美公司提供，敏感度為33 pg/mL。每份待檢樣本取出25 μL加入100 μL RD6P標準品稀釋液稀釋5倍，密封后置4℃過夜；次日，每孔加入100 μL RD1W分析稀釋液，密封后室溫1 h；將不同濃度的標準液、標本對照和樣本加入相應孔中，每孔50 μL，封住板孔，室溫2 h，緩沖液洗板4次，每孔加200 μL新配置底物，密封后室溫30 min，每孔加50 μL終止液，30 min內(nèi)測定OD450nm值，每孔測兩次。suPAR濃度(ng/mL)＝(酶標儀輸出數(shù)值×5)/1 000。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 18.0軟件包對本次研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用(±s)表示，采用配對t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血漿suPAR水平比較(表1) 實驗組患者血漿suPAR水平明顯高于對照組，其中進展期多發(fā)性骨髓瘤患者血漿suPAR水平高于穩(wěn)定期患者，均P＜0.01。但穩(wěn)定期患者與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義。

表1 兩組血漿suPAR水平比較(±s)

表1 兩組血漿suPAR水平比較(±s)

注：與對照組比較，*P＜0.01；與穩(wěn)定期患者比較，#P＜0.01

項目 n suPAR(ng/mL)實驗組 50 1.51±0.66*穩(wěn)定期 19 1.10±0.46進展期 31 1.85±0.77*#對照組 50 0.74±0.22

2.2 31例進展期患者化療前后血漿suPAR水平比較(表2) 31例進展期患者化療前后血漿suPAR水平明顯下降，與化療前比較，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。

表2 31例進展期患者化療前后血漿suPAR水平比較(±s)

表2 31例進展期患者化療前后血漿suPAR水平比較(±s)

注：與化療前比較，*P＜0.05

項目 n suPAR(ng/mL)化療前 31 1.85±0.77化療后 31 1.36±0.45*

3 討論

uPAR主要表達于單核細胞、中性粒細胞以及活化的T淋巴細胞表面，在血管內(nèi)皮細胞、肌細胞和肝細胞等表面也有表達[4]。最新的研究表明[5]，腫瘤細胞表面亦有大量的uPAR表達，uPAR水平與腫瘤細胞的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移及預后密切相關。腫瘤患者、白血病患者外周血suPAR水平明顯升高，提示預后不良[6]。suPAR是失去糖基化磷脂酰基醇錨的uPAR變異體，它在體液及腫瘤提取物中以可溶性的形式存在。由于腫瘤細胞表面有大量的uPAR表達，推測這些細胞的衰老與死亡以及骨髓中巨核細胞的分化和血小板的形成可能是血液中suPAR的來源[7]。因此，可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體(suPAR)因取材及檢測方法簡便，逐漸成為腫瘤研究的新方向。

Rigolin GM等報道[8]，suPAR是影響多發(fā)性骨髓瘤患者生存的獨立因素。但目前，對于suPAR的作用尚不清楚，分析其主要是通過以下兩種途徑來抑制漿細胞與骨髓基質(zhì)的黏附作用。一是大量uPAR被分裂形成suPAR，而細胞表面的uPAR減少。二是suPAR與uPAR競爭結(jié)合玻璃黏蛋白和β整合素。因此，當suPAR水平較高時，說明骨髓細胞與骨髓基質(zhì)的結(jié)合能力下降，容易發(fā)生髓外浸潤，這也就導致了患者疾病進展快、生存時間短。

本研究中，實驗組患者suPAR指標與對照組比較明顯升高，其中進展期患者血漿suPAR水平與穩(wěn)定期患者比較也明顯升高，均P＜0.01。但穩(wěn)定期患者與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義。31例進展期患者化療前后血漿suPAR水平明顯下降，與化療前比較，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。這表明血漿suPAR水平與多發(fā)性骨髓瘤患者體內(nèi)瘤細胞負荷有關，隨著病情的進展而不斷升高，間接提示我們uPAR系統(tǒng)與多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關。本組31例化療患者化療后suPAR水平明顯下降，可能與本內(nèi)瘤細胞負荷數(shù)減少導致異常分泌減少相關。可見，對多發(fā)性骨髓瘤患者動態(tài)觀察血漿suPAR水平變化有助于對化療療效的判斷以及對預后的評價。

針對多發(fā)性骨髓瘤臨床較多的應用骨髓涂片、C反應蛋白以及影像學檢查等評價患者的預后，但各有利弊，而血漿suPAR水平不僅與患者生存期密切相關，且能反映治療效果，有望成為另一種評價疾病療效及預后的指標。

[1]翟洪順，林麗淑，鄒德學，等.多發(fā)性骨髓瘤的實驗室診斷指標對臨床治療和預后的意義[J].中國實驗診斷學，2011，15(4)：675-677.

[2]沈杰，王娟，王瑞環(huán)，等.監(jiān)測可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體在預測多發(fā)性骨髓瘤患者髓外浸潤及預后中的作用[J].白血病·淋巴瘤，2011，20(11)：663-645.

[3]張之南.血液病診斷及療效標準[M].北京：科學出版社，1998：168.

[4]呂濤，郭淑利，徐曉燕.多發(fā)性骨髓瘤血漿suPAR水平的臨床探討[J].中國實用醫(yī)藥，2013，8(15)：102-103.

[6]王娟，沈杰，李增杰，等.血清可溶性尿激酶受體(suPAR)在急性髓細胞白血病中的表達及臨床意義[J].臨床血液學雜志，2008(21)：603-604.

[7]Kjellman A，Akre O，Gustafsson O，et al.Soluble urokinase plasminogen activator receptor as a prognostic marker in men participating in prostate Cancer screening[J].J Intern Med，2011，269(3)：299-305．

[8]Rigolin GM，Tieghi A，Ciccone M，et al.Soluble urokinase-type plasminogen activeator recaptor(suPAR)as an independent factor predicting worse prognosis and extra-bone marrow involvement in multiple myeloma patients[J].Br Haematol，2003，120(6)：953-959.

2016-03-02)

1005-619X(2016)07-0736-02

10.13517/j.cnki.ccm.2016.07.029

113008 遼寧撫順礦務局總醫(yī)院