滑世軒 孫長義 張福明
【摘要】 目的 探討AendB亞型的血清學特點, 并分析此類患者如何應用血制品進行輸血治療并觀察療效。方法 通過血清學檢測、吸收放散試驗、唾液試驗等血清學實驗方法鑒定1例ABO正反定型不符患者并進行家系調查。結果 該患者體內可能產生不規則抗-A1抗體, 通過該流程可以從血清學角度鑒定AendB亞型, 家系分析可以從遺傳學角度進一步支持AendB亞型。結論 對于AendB亞型患者輸血治療, 為避免出現輸血反應可以考慮給患者輸注非親的O型洗滌紅細胞。
【關鍵詞】 AendB亞型;家系調查;輸血治療
DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.012
【Abstract】 Objective To investigate serologic characteristics of AendB subtype, and to analyze blood transfusion therapy and observe its curative effect. Methods There was 1 ABO typing discrepancy patient who received serological test, absorption-elution test, and saliva test, along with family survey. Results There might be irregular anti-A1 antibody in this patients, and AendB subtype was identified by serological test. Family survey provided further confirmation of AendB subtype genetically. Conclusion In order to avoid blood transfusion reaction, unrelated O-washed red blood cells can be taken in blood transfusion therapy for AendB subtype patient.
【Key words】 AendB subtype; Family survey; Blood transfusion therapy
ABO血型系統是人類最早發現也是最為重要的血型系統, 與人類輸血時發生的溶血反應密切相關, 具有重要的臨床意義。ABO血型表現具有多形性, 變異的表現型中多數是由于ABO位點稀有等位基因的遺傳造成[1]。因此, 正確鑒定ABO血型對臨床輸血至關重要。作者對在臨床遇到的表型為AendB的亞型進行鑒定思路總結、家系調查及對其輸血治療進行探討, 現報告如下。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 先證者, 男, 41歲, 于2014年6月23日收住本院, 無輸血史, 在血型初篩時, 正定型B型, 反定型AB型;為確定其血型, 進一步做血清學鑒定, 同時采集其家族其他成員的血液標本進行家系調查。
1. 2 試劑 抗-A、抗-B(河北醫科大學生物工程中心), 抗-AB, 抗-H、A2細胞(上海血液生物制品公司), 抗-A1(中國醫學科學院輸血研究所), ABO標準細胞(北京金豪), 微柱凝膠卡(長春博訊生物), 凝聚胺試劑(中山生科)。
1. 3 方法 ABO血型鑒定、吸收放散試驗、唾液中血型物質鑒定參考文獻[2] ;不規則抗-A1抗體檢測采用2份新鮮的獻血員的A1和O型紅細胞加患者血清進行檢測。
1. 4 輸血治療 采用凝聚胺法和卡式法進行交叉配血實驗, 按試劑操作說明書進行, 將患者血樣分別與AB型懸浮紅細胞和O型洗滌紅細胞進行配血實驗。
2 結果
2. 1 ABO血型鑒定及H物質檢測 該患者體內可能產生不規則抗-A1抗體。見表1?;颊逪抗原強度比對照O細胞弱, 比A1B細胞凝集稍強, 說明該患者紅細胞上的H物質活性增強, 符合亞型紅細胞H物質分布特點(O>A2>B>A2B>A1>A1B)[3], 不規則抗-A1抗體鑒定實驗顯示該先證者所產生的不規則抗體確為抗-A1抗體。
2. 2 吸收放散試驗 取洗滌后的患者壓積紅細胞和對照的O型、A1B型壓積紅細胞各1 ml, 分別與等量的抗-A標準血清混合, 置4℃冰箱2 h, 用冷鹽水洗滌, 直至末次洗脫液抗體效價為0, 立刻56℃熱放散, 用放散液與A和O型紅細胞進行檢測, 發現其與2份A型紅細胞凝集, 與O型紅細胞無凝集, 表明先證者紅細胞上存在A抗原。先證者吸收前后抗-A標準血清效價分別為64和32, 對照A1B細胞吸收前后抗-A標準血清效價為64和8;放散液抗-A效價測定:先證者抗-A效價為16, 對照O細胞放散液抗-A效價為0, 對照A1B細胞放散液抗-A效價為4, 表現出吸收能力弱、放散能力強、符合A亞型的特點。
2. 3 唾液中物質鑒定 取患者唾液2 ml, 離心后煮沸10 min, 1000 g離心10 min取上清, 分別與經標化成最適稀釋度(凝集強度3+)的單克隆抗-A、抗-B、抗-H進行凝集抑制試驗, 以生理鹽水作對照, 結果顯示該患者唾液中不含A物質, 含有B和H物質, 表明該患者為分泌型。
2. 4 家系調查 該患者家系顯示, 先證者其父及其大妹和其女兒的血型的血清學實驗結果與Aend亞型相符, 其母與小妹的血型為正常的B 型。見圖1。
2. 5 輸血治療 采用凝聚胺法和卡式法進行交叉配血, 首先用正常AB型進行交叉配血, 發現兩種方法均是主側凝集1+, 次側不凝集, 配血不相合;與O型洗滌紅細胞交叉配血, 主側、次側均無凝集, 交叉配血相合。該患者輸注4 U O型洗滌紅細胞, 輸注24 h后患者的血紅蛋白由76 g/L提高到109 g/L, 輸注有效且輸注過程無不良輸血反應。
3 討論
血型正反定型不符的原因可以是亞型引起, 也可以是由IgM性質的不規則抗體(如抗-M, -N, -P)等引起或是冷抗體引起, 因此, 當工作中遇到正反定型不符時, 考慮亞型還是考慮不規則抗體引起, 可根據反定型中O細胞和Pc的反應格局做出初步判斷, 當O細胞和Pc無凝集時考慮是亞型, 反之則考慮不規則抗體。該患者紅細胞與抗-A試劑經多次離心呈混合視野, 約為10%, 唾液中檢測到H物質和B物質未測出A物質, 吸收放散試驗符合亞型吸收弱放散強的特點。實驗結果符合AendB亞型反應特點。家系調查顯示有遺傳學規律, 家系調查結果和血清學實驗結果支持AendB亞型的結論, 但需分子生物學進一步證實。
在輸血治療時, 考慮到患者體內存在不規則抗-A1抗體, 輸血時避開相應的抗原。有兩種方案可供選擇:①理論上可以輸注非親AendB亞型供者血液, 但在實際工作中AendB亞型很難找到同型的供者。所以, 需要輸注紅細胞, 可以選擇O型洗滌紅細胞, 該患者輸注4 U O型洗滌紅細胞, 輸注有效且輸血過程無不良反應。②輸入家族中其他AendB亞型者的血液, 但親屬供者的血液需要輻照后輸注, 以免發生排斥反應[4]。對于沒有產生不規則抗-A1的病例, 血液制品的選擇相對靈活, 可以給予正常的A型或O型洗滌紅細胞, 同樣會達到治療目的[5, 6]。
參考文獻
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[2] 李勇, 馬學嚴.實用血液免疫學血型理論與實驗技術.北京:科學出版社, 2006:356-358, 628-645.
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[4] 陳劍, 朱凱, 鳳婧, 等. Am亞型患者的血型檢測與家系調查及輸血治療.中國輸血雜志, 2011, 24(11):956-957.
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[收稿日期:2016-03-03]