蔣道智(甘肅省卓尼縣畜牧工作站,甘肅 卓尼 747600)
奶牛乳房炎的實驗室診斷技術探討
蔣道智
(甘肅省卓尼縣畜牧工作站,甘肅 卓尼 747600)
摘要:奶牛乳房炎是威脅奶牛產奶率及奶品質的重要原因之一。通過對奶牛乳房炎的實驗室診斷技術進行實踐,掌握診斷牛隱性乳房炎的一些常用實驗室診斷方法,比較各種方法的準確性及各自的優缺點,為臨床診斷打好基礎。
關鍵詞:奶牛乳房炎;診斷技術;討論
目前較為常用的奶牛乳房炎診斷技術是檢測乳汁中的乳細胞,根據乳細胞的含量對奶牛乳房炎進行診斷,加利福尼亞乳房炎檢測法、H2O2玻片法和苛性鈉乳檢驗法是公認的乳細胞檢測方法。
1.1CMT(加利福尼亞乳房炎檢測法)
此法簡易,效果準確,可以定量。基本原理是用一種陰離子表面活性物質——烷基或羥基硫酸鹽破壞乳中體細胞,釋放其中的蛋白質,蛋白質與試劑結合沉淀或凝膠。細胞中聚合的脫氧核糖核酸(DNA)是CMT產生陽性反應的主要成分。乳中體細胞數越多,釋放的DNA越多,產生的凝膠就越多,凝膠越緊密。
診斷方法:先將2 ml的被檢乳置于塑料乳房炎檢驗盤中,再加入2 ml試劑,緩慢做同心圓狀攪拌10 s,觀察判定,標準如表1。
1.2 H2O2玻片法(過氧化氫酶法)
此法為間接測定乳中白細胞的方法,即測定乳中白細胞的過氧化氫酶,以推斷白細胞的含量。
診斷方法:將載玻片置于白色襯墊物上,滴被檢乳1滴,再加H2O21滴,混合均勻后,靜置2 min后觀察。判定標準見表2。

表2 H2O2診斷乳房炎的判斷標準

表1CMT法判斷標準
1.3苛性鈉乳檢驗法
這種方法操作比較簡單,但不適用于檢驗泌乳初期幾接近干乳期的牛乳。
將載玻片置于黑色襯墊物上,加入被檢乳5滴,再加入4%苛性鈉溶液2滴(冷藏2 d以內的乳樣加一滴
即可),用細玻棒或火柴梗迅速攪拌,使其擴展成直徑2.5 cm的圓形,并繼續攪拌20~25 s,觀察判定如表3。

表3苛性鈉凝乳判斷檢驗標準
1.4乳汁pH檢驗法——溴香草酚藍(BTB)檢驗法
將載玻片置于白色襯墊物上,滴被檢乳1滴,再加BTB試劑1滴,混合觀察。判定標準如表4。

表4 BTB試驗判定標準
用CMT法,除右前乳房是強陽性外,其余都是隱性型。而H2O2玻片法檢查乳汁時,四個乳房均呈陰性,NaOH法檢測結果是弱陽性和可疑,BTB法檢測結果都為陰性。不同檢測方法對同一乳房的檢測結果不同,可能是因為每種檢測方法的判斷標準不同。綜合分析,右前乳房乳房炎判為強陽性,其余都判為可疑。
在實驗過程中一定要把握好用量,檢測量的多少及試劑的用量均能影響檢測的結果。在檢測過程中,要注意在規定時間內觀察乳液變化,不同時間乳液的變化程度不一樣,影響判斷。攪拌時間要遵守實驗要求,時間過長或過短均會影響判斷分析。最后要根據判斷標準表及時判斷乳液情況并做好記錄,記錄時要有條不紊。注意不要把不同乳房的檢測結果混亂。
(編輯:高真貞)
中圖分類號:S283
文獻標識碼:A
文章編號:1006-799X(2016)04-0075-01
作者簡介:蔣道智(1983-),男,甘肅卓尼人,助理畜牧師,主要從事畜牧獸醫方面工作。