圍手術(shù)期輸血對(duì)膀胱癌患者免疫功能的影響

王維維 熊亞南 于丹軍 劉波周 明璐 林翠 張穎

圍手術(shù)期輸血對(duì)膀胱癌患者免疫功能的影響

王維維 熊亞南 于丹軍 劉波周 明璐 林翠 張穎

目的通過(guò)對(duì)圍術(shù)期膀胱癌患者輸血前后T淋巴細(xì)胞群及NK細(xì)胞活性的變化的觀察，探討輸血對(duì)膀胱癌患者免疫功能的影響。方法隨機(jī)選擇70例膀胱癌手術(shù)病例，分成輸血組(BT)47例與非輸血組(NBT)23例，分別采集手術(shù)前1周之內(nèi)，以及術(shù)后第1天、第3天、第7天的外周靜脈血，用流式細(xì)胞儀測(cè)定T淋巴細(xì)胞亞群CD3＋、CD4＋、CD8＋及NK細(xì)胞活性，并計(jì)算CD4＋/CD8＋比值，分析其變化規(guī)律。結(jié)果BT組與NBT組術(shù)前各項(xiàng)指標(biāo)相比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；術(shù)后第1天，BT組和NBT組各項(xiàng)指標(biāo)相比較于術(shù)前均有顯著性差異(P＜0.05)，但BT組與NBT組各項(xiàng)指標(biāo)相比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；術(shù)后第3天、第7天，BT組各項(xiàng)指標(biāo)相比較于術(shù)前有顯著性差異(P＜0.05)；NBT組各項(xiàng)指標(biāo)相比較于術(shù)前無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；BT組各項(xiàng)指標(biāo)與NBT組相比較均有顯著性差異(P＜0.05)。結(jié)論輸血對(duì)膀胱癌患者的細(xì)胞免疫功能有較強(qiáng)的抑制作用。

輸血；膀胱癌；T細(xì)胞亞群；NK細(xì)胞；圍手術(shù)期

1 材料與方法

1.1 一般資料收集2015-01—11秦皇島市第一醫(yī)院和唐山市工人醫(yī)院膀胱癌患者70例，其中男性48例，女性22例；年齡為40～69歲。上述患者均經(jīng)病理確診。根據(jù)術(shù)前3 d到術(shù)后10 d內(nèi)有無(wú)輸血史分為兩組。其中輸血組(BT組)男性為30例，女性為17例。未輸血組(NBT組)男性18例，女性5例。輸血組圍手術(shù)期輸血量(2～4)單位，均為庫(kù)存懸浮紅細(xì)胞。術(shù)前3個(gè)月內(nèi)無(wú)輸血史，術(shù)前及圍手術(shù)期內(nèi)未進(jìn)行放療、化療及免疫治療。

1.2 檢測(cè)方法分別采集手術(shù)前1周之內(nèi)，以及術(shù)后第1天、3天、7天的外周靜脈血2～3 mL。以流式細(xì)胞儀測(cè)定T淋巴細(xì)胞亞群CD3＋、CD4＋、CD8＋及NK細(xì)胞，并計(jì)算CD4＋/CD8＋比值。

2 結(jié)果

圍術(shù)期T活性細(xì)胞亞群與NK細(xì)胞活性的變化百分比(表1～2)。結(jié)果顯示：①BT組術(shù)后第1天與術(shù)前各項(xiàng)指標(biāo)相比較，CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均顯著性減少(P＜0.05)，但CD8＋T細(xì)胞無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；BT組術(shù)后第3天、第7天與術(shù)后第1天相比較，CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均無(wú)顯著變化(P＞0.05)，但與術(shù)前相比較，均有顯著性減少(P＜0.05)。②NBT組術(shù)后第1天與術(shù)前各項(xiàng)指標(biāo)相比較，CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均顯著性減少(P＜0.05)，但CD8＋T細(xì)胞無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；NBT組術(shù)后第3天、第7天與術(shù)后第1天相比較，CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均有顯著變化(P＜0.05)，但各項(xiàng)指標(biāo)與術(shù)前相比較，均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，基本恢復(fù)至術(shù)前水平。③BT組與NBT組相比較：術(shù)前的CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD8＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，CD8＋T細(xì)胞無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；術(shù)后第1天，BT組與NBT組的CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，但明顯低于術(shù)前水平，CD8＋T細(xì)胞無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；術(shù)后第3天、第7天，BT組CD3＋T細(xì)胞、CD4＋T細(xì)胞、CD4＋/CD8＋比值、NK細(xì)胞均明顯低于NBT組(P＜0.05)，CD8＋T細(xì)胞無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

表1 圍手術(shù)期CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞及CD4+/CD8+比值的變化百分比(±s)

表1 圍手術(shù)期CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞及CD4+/CD8+比值的變化百分比(±s)

?

表2 圍術(shù)期NK細(xì)胞活性的變化百分比(±s)

表2 圍術(shù)期NK細(xì)胞活性的變化百分比(±s)

?

3 討論

2010年全球腫瘤學(xué)統(tǒng)計(jì)資料顯示，隨著環(huán)境污染的加重和生活水平的不斷提高，腫瘤發(fā)病率正逐步上升[1]。惡性腫瘤就是人們所說(shuō)的癌癥，它是100多種相關(guān)疾病的統(tǒng)稱(chēng)。當(dāng)身體內(nèi)細(xì)胞發(fā)生突變后，它會(huì)不斷地分裂，不受身體控制，最后形成癌癥。膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，發(fā)病率居泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤的首位。輸血是指從靜脈輸入血液，是臨床上一項(xiàng)重要的搶救和治療措施。輸血的治療作用除了用以補(bǔ)給血量，維持血容量，提高血壓以抗休克和防止出血性休克的措施外，還可供給具有帶氧能力的紅細(xì)胞以糾正因紅細(xì)胞減少或其帶氧能力降低所導(dǎo)致的急性缺氧癥；補(bǔ)充各種凝血因子以糾正某些患者血液凝固障礙。但輸血不僅可以傳播傳染病、引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，甚至可以引起輸血相關(guān)移植物抗宿主病和輸血相關(guān)的免疫抑制(TRIM)[2]。TRIM的機(jī)制尚不是很清楚，可能的機(jī)制包括非特異性免疫抑制、封閉性抗體、血漿抑制因子、克隆缺失、抗獨(dú)特型抗體、抑制淋巴細(xì)胞、抑制NK細(xì)胞的活性、供受者微嵌合體白細(xì)胞的形成[3]。但它的發(fā)生主要與輸注同種異體白細(xì)胞或白細(xì)胞產(chǎn)物有關(guān)，其中包括通過(guò)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)使受者機(jī)體免疫反應(yīng)趨向Ⅱ型免疫應(yīng)答[4]。

T細(xì)胞在細(xì)胞免疫中發(fā)揮著重要的作用[5]。其中，CD3＋代表細(xì)胞免疫的總體水平；CD4＋輔助其他細(xì)胞參與免疫應(yīng)答；CD8＋抑制其他免疫細(xì)胞的功能。CD4＋/CD8＋比值也是重要的免疫指標(biāo)，比值顯著降低說(shuō)明機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能低下，常被作為癌癥預(yù)后不良的標(biāo)志。NK細(xì)胞也是重要的免疫細(xì)胞，它對(duì)T細(xì)胞、B細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞等均有調(diào)節(jié)作用，并通過(guò)釋放淋巴因子對(duì)機(jī)體免疫功能進(jìn)行調(diào)節(jié)。NK細(xì)胞能直接或分泌細(xì)胞毒因子而殺傷腫瘤細(xì)胞。它的活性降低，代表著腫瘤發(fā)展和發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[6]。手術(shù)對(duì)機(jī)體也會(huì)產(chǎn)生免疫抑制[7]。本實(shí)驗(yàn)研究也驗(yàn)證了此說(shuō)法。結(jié)果顯示膀胱癌患者術(shù)后第1天和第3天時(shí)，CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值和NK細(xì)胞均較術(shù)前顯著性減少，CD8＋顯著性增加(P＜0.05)。

對(duì)于膀胱癌患者，無(wú)論是術(shù)前患者血尿?qū)е碌膰?yán)重貧血，還是術(shù)中患者出血，輸血都是治療膀胱癌患者的一種有效的輔助手段。但輸血與腫瘤的復(fù)發(fā)有關(guān)。輸血可以增加腫瘤復(fù)發(fā)率是1981年Gantt提出的。到目前為止，不少文獻(xiàn)報(bào)道了如食管癌、肺癌、胃癌等患者圍手術(shù)期輸血可能使患者機(jī)體免疫功能低下、增加了癌癥復(fù)發(fā)率[8-11]。同時(shí)通過(guò)實(shí)驗(yàn)也觀察到了輸血可導(dǎo)致癌癥患者手術(shù)后感染率增高。Silliman對(duì)直腸癌患者進(jìn)行觀察與研究，得出結(jié)論輸血增加術(shù)后感染率[12]。Blajchman總結(jié)了最近幾年前瞻性的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤患者圍手術(shù)期輸血，術(shù)后細(xì)菌感染率明顯增加[13]。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示：術(shù)前的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值和NK細(xì)胞無(wú)顯著性變化。CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值和NK細(xì)胞在術(shù)后第1天均明顯下降，達(dá)到最低點(diǎn)。提示術(shù)后機(jī)體免疫狀況下降。在術(shù)后第3天左右，NBT組逐漸恢復(fù)，然而B(niǎo)T組持續(xù)處于較低水平，恢復(fù)緩慢，兩組間進(jìn)行比對(duì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CD8＋在膀胱癌BT組術(shù)后水平高，與NBT組術(shù)后3 d比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示圍手術(shù)期輸血患者較非輸血患者機(jī)體免疫功能有明顯下降。

為了減少輸血后腫瘤的復(fù)發(fā)與感染，我們采取以下措施[14]。第一應(yīng)避免不必要的輸血，提高臨床輸血水平，避免不必要的血液輸注是保證血液輸注安全的一項(xiàng)重要措施[15]。第二應(yīng)該用去除白細(xì)胞的血液或血液制品。劉杰等人[16]對(duì)100例惡性腫瘤化療患者分別輸注全血和成分血液(去除白細(xì)胞)，然后對(duì)輸血前后T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞活性、紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率等細(xì)胞免疫功能進(jìn)行檢測(cè)。得出結(jié)論對(duì)惡性腫瘤患者輸去除白細(xì)胞的血液能提高機(jī)體的細(xì)胞免疫功能。還有很多實(shí)驗(yàn)也證明了應(yīng)使用白細(xì)胞過(guò)濾器去除血液中的白細(xì)胞，可以減少腫瘤的復(fù)發(fā)和術(shù)后感染[17-18]。第三應(yīng)該盡量做到自體輸血。王世端等人[19]選擇了直腸癌、結(jié)腸癌和胃癌患者30例，將其隨機(jī)分成兩組，一組輸全血，另一組是術(shù)中自體血回輸給患者。用流式細(xì)胞儀測(cè)定T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞的數(shù)量。然后進(jìn)行分析，得出結(jié)論圍術(shù)期輸異體血抑制患者免疫功能，自體輸血免疫抑制輕微，且術(shù)后免疫功能很快恢復(fù)。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究證明輸血對(duì)圍手術(shù)期膀胱癌患者免疫功能具有抑制作用，且免疫抑制作用在短期內(nèi)不易清除，可能促進(jìn)膀胱癌患者的復(fù)發(fā)、增加術(shù)后感染和降低術(shù)后遠(yuǎn)期生存率。所以在對(duì)膀胱癌患者進(jìn)行治療和手術(shù)時(shí)，能不輸血就盡量不要輸血，在不得不輸血的情況下，盡量輸去除白細(xì)胞的血液。在醫(yī)療設(shè)備齊全及條件允許的情況下，最好自體輸血。我們要做到合理科學(xué)的輸注血液。

[1]Jemal A，Bray F，Center MM，et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin，2011，61(1)：69-90.

[2]Hendrickson JE，Hillyer CD.Noninfectious serious hazards of transfusion[J].Anesth Analg，2009，108(3)：759-769.

[3]BlajchmanMA.Immunomodulationandbloodtransfusion[J].Ann J Ther，2002，9(5)：389.

[4]Vamvakas EC.Possible mechanisms of allogoncic blood transfusionassociatedpostoperativeinfection[J].TransfusionMed Rev，2002，16(2)：144.

[5]Boileau S，Hoffmann S，Janot C，et al.Comparative study of immunologicconsequencesof autotransfusionandhomologous transfusion in lung cancer surgery[J].Ann Fr Anesth Reanim，1993(12)：251-259.

[6]Lechin F，van der Dijs B，Lechin AE，et al.Natural killer cells activity and neuroimmunological treatment of cancer[J].Clin Cancer Res，2004，10(23)：120.

[7]Romano F，Cesana G，Berselli M，et al.Biological，histological，andclinicalimpactofpreoperativeIL-2administration inradically operablegastriccancerpatients[J].Journalof Surgical Oncology，2004，88(4)：240-247.

[8]陳健，王偉，李興慧，等.異體輸血對(duì)食管癌患者術(shù)后免疫功能的影響[J].中國(guó)綜合臨床，2006，22(5)：445-447.

[9]魏秀琴，趙福元，張連祥，等.肺癌患者手術(shù)前后細(xì)胞免疫功能的動(dòng)態(tài)研究[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，19(1)：2766-2768.

[10]劉新君.圍術(shù)期輸血對(duì)惡性腫瘤患者的影響[J].中國(guó)實(shí)用期刊，2015，42(24)：52-53.

[11]高波.圍術(shù)期輸血對(duì)胃癌根治術(shù)患者預(yù)后及免疫的影響[J].實(shí)用癌癥雜志，2015，30(8)：1224-1226.

[12]Silliman CC.The epidemiology and clinical manifestations of TRALL[J].Transfusion Alternatives in Transfusion Medicine，2004，6(1)：46-47.

[13]BlajchmanMA.Allogeneicbloodtransfusion，immunomodulation，andpostoperativebacterialinfection：do wehavethe answers yet[J].Transfusion，1997，37(2)：121.

[14]張穎.探討如何合理調(diào)控成分血液資源，避免血液浪費(fèi)[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2015，53(9)：119-121.

[15]劉緒華，高愛(ài)蘭，李波.合理用血避免不必要的血液輸注[J].社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志，2009，7(1)：69-70.

[16]劉杰，鄒旭紅，梁天孚.去白細(xì)胞輸血對(duì)惡性腫瘤患者細(xì)胞免疫功能的影響[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2006，16(3)：353-354.

[17]Kao KJ，del Rosario ML.Role of class-Ⅱmajor histocompatibility complex(MHC)-antigen-positive donor leukocytes intransfusion-in-ducedalloimmunizationto donorclass-ⅠMHC antigens[J].Blood，1998，92(2)：690.

[18]Blajchman MA.Transfusion-associatedimmunomodulationand universal white cell reduction：are we putting the cart before the horse[J].Transfusion，1999，39(7)：665.

[19]王世端，王士雷，江巖，等.等容血液稀釋自體輸血對(duì)腫瘤病人圍術(shù)期T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞影響的比較[J].中華麻醉學(xué)雜志，2001，21(9)：525-527.

ObjectiveTo study the influence of perioperative blood transfusion on immunologic function of bladder cancer sufferers through the observation on the changes of T lymphocyte mass and NK cell activity before and after blood transfusion.Methods70 cases of bladder cancer surgery were selected randomly and divided into blood transfusion group(BT)of 47 cases and non-blood transfusion group(NBT)of 23 cases.Peripheral venous blood of the samples was obtained one week before the surgery，and on the 1st，3rd and 7th day after surgery.CD3＋，CD4＋，CD8＋of T lymphocyte subsets and the cell activities of NK were tested by flow cytometry(FCM)，and the ratio of CD4＋/CD8＋was calculated，then the change regularities were analyzed.ResultsThere was no significant difference in the indicators between BT group and NBT group before surgery(P＞0.05)；the indicators in both BT group and NBT group showed clear changes on the 1st day after surgery compared with those before surgery(P＜0.05)，but the difference in indicators between BT group and NBT group was not obvious(P＞0.05)；the indicators of BT group on the 3rd and 7th day after surgery had significant differences compared with the preoperative results(P＜0.05)，while the indicators of NBT group changed little compared with the preoperative results(P＞0.05).The indicators between BT group and NBT group showed significant differences(P＜0.05).ConclusionPerioperative blood transfusion shows strong inhibitory effect on immunologic function of bladder cancer sufferers.

Blood transfusion；Bladder cancer；T cell subset；NK cell；Perioperative period

2016-02-26)

1005-619X(2016)06-0628-03

10.13517/j.cnki.ccm.2016.06.029

063000華北理工大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院(王維維，熊亞南)；

066000秦皇島市第一醫(yī)院(于丹軍，劉波，周明璐，林翠)；

110000遼寧中醫(yī)藥大學(xué)杏林學(xué)院(張穎)

熊亞南