三種不同免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)HIV結(jié)果可靠性的對(duì)比研究

朱 瀾

（撫順市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 撫順 113006）

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三種不同免疫檢驗(yàn)方法檢測(cè)HIV結(jié)果可靠性的對(duì)比研究

朱 瀾

（撫順市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 撫順 113006）

【摘要】目的 對(duì)免疫層析試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和明膠顆粒凝集試驗(yàn)檢測(cè)HIV結(jié)果的可靠性進(jìn)行對(duì)比分析。方法 運(yùn)用ELISA、PA、ICA三種檢測(cè)方法檢測(cè)人體血清中含有的HIV1+2抗體。結(jié)果 ELISA法1∶16382陽(yáng)性，PA法1∶2046陽(yáng)性，ICA法1∶4092陽(yáng)性。結(jié)論 ELISA有很高的靈敏度和特異性，操作簡(jiǎn)單，僅需要實(shí)驗(yàn)室配備酶標(biāo)儀和洗板機(jī)即可應(yīng)用，特別適合于試驗(yàn)室大規(guī)模篩檢使用。

【關(guān)鍵詞】HIV抗體檢測(cè)；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；明膠顆粒凝集試驗(yàn)；免疫層析法

HIV病毒，會(huì)對(duì)人體免疫力造成威脅。構(gòu)成人體免疫系統(tǒng)最重要的因素，就是T淋巴細(xì)胞，而HIV尤其會(huì)破壞該細(xì)胞，使人體免疫功能下降，從而感染各種疾病，甚者會(huì)導(dǎo)致惡性腫瘤，病死率較高，會(huì)導(dǎo)致危害性極大的傳染病艾滋病。這嚴(yán)重影響了人們的生活，威脅人類身體健康。隨著艾滋病患者的不斷增加，人們?cè)絹碓街匾晫?duì)HIV的檢查。目前，醫(yī)院、疾病預(yù)防控制中心等HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室普遍采用ELISA、PA、ICA對(duì)可疑高危人群進(jìn)行篩查。不同的檢測(cè)方法都有不同的優(yōu)點(diǎn)和缺陷，這對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性，會(huì)造成一定的影響。本次研究分別對(duì)患有HIV病毒的患者進(jìn)行 ELISA、PA、ICA試劑試驗(yàn)分析。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源：本次接受試驗(yàn)的146例HIV患者，均經(jīng)過國(guó)家疾病預(yù)防控制中心用免疫印跡法（WB）檢測(cè)確認(rèn)。其中，HIV抗體陽(yáng)性患者96例，HIV抗體陰性患者50例。國(guó)家衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心，提供了本次試驗(yàn)的質(zhì)控品，抗-HIV1+2抗體高值（500 NCU/mL）和低值（1 NCU/mL）。

1.2檢測(cè)試劑：ELISA試劑由上海川翔生物科技有限公司提供；PA試劑由浙江愛康生物專業(yè)供應(yīng)；ICA試劑則使用美國(guó)雅培公司產(chǎn)品。

1.3儀器：RT-6100酶標(biāo)儀。

1.4檢測(cè)方法。ELISA法：主要原理是根據(jù)抗體和抗原間的特殊反應(yīng)，進(jìn)行檢測(cè)。該反應(yīng)的主要呈現(xiàn)形式，就是通過催化水解試驗(yàn)和氧化還原反應(yīng)，看二者結(jié)合后，是否會(huì)有顏色變化，如果結(jié)合后，呈現(xiàn)出顏色，那么樣本患有HIV1+2；PA法：對(duì)HIV-1抗體和HIV-2抗原進(jìn)行重組，然后將他們包被在人工載體明膠顆粒上，觀察明膠顆粒和HIV-1或HIV-2抗體的反應(yīng)，如果其發(fā)生凝集現(xiàn)象，可以檢出血清和血漿中的HIV-1/2抗體；ICA法：主要操作原理，就是在免疫層析基礎(chǔ)上，檢驗(yàn)樣本中是否含有HIV1+2抗體，如果存有此抗體，那么它會(huì)和硒膠體結(jié)合，檢測(cè)儀器上會(huì)出現(xiàn)明顯標(biāo)識(shí)，一條紅線。

2 結(jié) 果

2.1三種方法檢測(cè)HIV抗體高值、低值質(zhì)控血清結(jié)果：分別用ELISA、PA和ICA檢驗(yàn)HIV高、低值質(zhì)控血清。檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1　三種方法檢測(cè)HIV抗體高、低值質(zhì)控血清結(jié)果

2.2三種方法檢測(cè)的符合率：96例患有HIV抗體的陽(yáng)性標(biāo)本，ELISA法、PA法和ICA法的檢出符合率分別是100%、99.1%、97.9%，通過三種方法進(jìn)行對(duì)比，符合率差距不大。

2.3三種方法結(jié)果比較：用ELISA法、PA法和ICA法對(duì)96例HIV抗體陽(yáng)性患者樣本，50例HIV抗體陰性患者樣本進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，進(jìn)行分析對(duì)比，結(jié)果見表2。

表2　三種方法HIV抗體檢測(cè)結(jié)果比較

ELISA法檢測(cè)的敏感度為96.0%（96/100）、特異度為92.0% （46/50）、準(zhǔn)確度為97（142/146）；PA法檢測(cè)的敏感度為97.9% （95/97）、特異度為94.0%（47/50）、準(zhǔn)確度為97.3%（142/146）；ICA法檢測(cè)的敏感度為92.1%（94/102）、特異度為84.0%（42/50）、準(zhǔn)確度為90.4%（132/146）。

2.4HIV抗體檢測(cè)陽(yáng)性血清結(jié)果：研究表明 ELISA法1∶16382陽(yáng)性，PA法1∶2046陽(yáng)性，ICA法1∶4092陽(yáng)性。

3 討 論

本次研究對(duì)HIV樣本分別進(jìn)行ELISA法、PA法和ICA法檢測(cè)，ELISA有很高的靈敏度和特異性［1-2］，操作簡(jiǎn)單，僅需要實(shí)驗(yàn)室配備酶標(biāo)儀和洗板機(jī)即可應(yīng)用。顆粒凝集實(shí)驗(yàn)是另一種操作簡(jiǎn)單方便，成本低廉的檢測(cè)方法，該方法結(jié)果可通過肉眼判定，靈敏度很高，特別適合發(fā)展中國(guó)家或大量篩選供血員時(shí)使用，缺點(diǎn)是必須使用新鮮樣品，特異性較差。人類免疫缺陷病毒抗體口腔黏膜滲出液檢測(cè)試劑盒（膠體金法）就屬于側(cè)向免疫層析法（金免疫）類別［3-4］，基于免疫層析技術(shù)通過手工操作、肉眼讀取結(jié)果、20 min即可定性得出檢測(cè)結(jié)果的快速診斷試劑，用于檢測(cè)口腔黏膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體。可用于自愿咨詢檢測(cè)、不愿采血、暈針患者的初篩。該方法適用于初篩檢測(cè)，凡由該試劑測(cè)定為陽(yáng)性者，需進(jìn)行進(jìn)一步篩查確認(rèn)。綜上所述，ELISA適合于試驗(yàn)室大規(guī)模篩檢使用。

參考文獻(xiàn)

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中圖分類號(hào)：R512.91；446

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-8194（2016）04-0144-01