降鈣素基因相關肽對心肌肥厚影響機制的研究

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降鈣素基因相關肽對心肌肥厚影響機制的研究

張欣,范曉梅,納仁高娃,薛明明

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生理學教研室, 內(nèi)蒙古 呼和浩特010110)

Study on influence mechanism of calcitonin gene related protein on cardiac hypertrophy

ZHANG Xin, FAN Xiao-mei, NA REN Gao-wa, XUE Ming-ming

(PhysiologyTeachingandResearchSectionofBasicMedicalSciences,InnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot010110,China)

中國圖書分類號：R-332；R322.11；R331.31；R341.6；R542.202.2

關鍵詞：降鈣素基因相關肽；壓力超負荷；心肌肥厚； 內(nèi)皮素； 腫瘤壞死因子;左心系數(shù)

Key words:calcitonin gene related protein; pressur overload; cardiac hypertrophy; endothelin; tumor necrosis factor; left ventricular mess index

降鈣素基因相關肽(calcitonin gene related protein, CGRP)是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強的一種內(nèi)源性舒血管物質(zhì)[1], 對心血管系統(tǒng)具有重要的生理調(diào)節(jié)作用, 但對肥厚心肌有無逆轉作用目前尚未闡明。本研究采用外源性CGRP干預心肌肥厚大鼠，觀察干預后心肌肥厚程度的變化和心肌組織中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、內(nèi)皮素(endothelin, ET) 含量的變化，進一步探討CGRP對心肌肥厚的影響及可能機制。

1材料

1.1動物與分組60只♂健康Wistar大鼠,3月齡，體質(zhì)量200~250 g，由內(nèi)蒙古大學實驗動物中心提供。隨機分為3組：對照組、縮窄組、CGRP干預組。

1.2藥物和試劑戊巴比妥鈉(華北制藥廠)；CGRP(批號：RP11095，金思特科技有限公司)；TNF-α、ET放射免疫分析試劑盒(北京東雅生物技術研究所)。

1.3儀器BP-6動物無創(chuàng)血壓測試儀(成都泰盟)；GC-911-γ全自動放免分析儀(中國科技大學開發(fā)研究中心)；Olympus光學顯微鏡(日本)。

2方法

2.1模型制備采用Anderson方法制作壓力超負荷心肌肥厚大鼠模型[2]。術前禁食禁水12 h，稱重后，用戊巴比妥鈉(0.06 mg·g-1)腹腔注射麻醉[3]，左肋緣沿腰大肌外緣做長約2 cm的一斜行切口，于腎動脈上方分離一小段腹主動脈，用4號手術線連同8號針頭共同結扎，然后抽去針頭，往腹腔滴約1 mL的青、鏈霉素溶液，關腹。對照組實行假手術，只穿線不結扎。

2.2給藥方法術后1周給藥，CGRP干預組腹壁皮下注射CGRP 8 μg·kg-1·d-1[4]，對照組與縮窄組腹壁皮下注射與體重相匹配的生理鹽水，每天1次。

2.3動脈收縮壓(SBP)的測定術后1周開始，每天同一時間用BP-6動物無創(chuàng)血壓測試儀檢測大鼠尾動脈動脈血壓，重復測量3次, 取平均值,以kPa(1 mm Hg=0.133 kPa)為單位。

2.4心肌組織標本處理給藥4周后，處死大鼠，取出心臟，去除心房及右心室組織，保留左心室及室間隔，去除左室壁脂肪和結締組織，生理鹽水清洗，濾紙吸干，稱重，計算左心系數(shù)(左室重/體重比,LVW/ BW, mg·g-1) 。由左心室游離壁中部，分別縱行切取部分心肌組織，制作常規(guī)HE染色切片，Olympus光學顯微鏡下觀察左心室肌組織結構的變化，并進行顯微照相。其余的左心室組織用于檢測心肌中TNF-α、ET的含量，操作步驟嚴格按放免試劑盒說明書進行。

3結果

與對照組相比, 縮窄組大鼠 SBP、LVW/BW 及心肌中 TNF-α與 ET水平明顯升高(P<0.05), 心肌中 TNF-α、ET水平與左心系數(shù)呈正相關。CGRP干預組與縮窄組相比, SBP、LVW/BW 及心肌中TNF-α、 ET 水平均明顯降低(P<0.05)。左心室心肌組織病理學改變也發(fā)現(xiàn)CGRP組心肌纖維橫徑及細胞核較縮窄組縮小，間質(zhì)增生程度較縮窄組明顯減輕。

4討論

CGRP是迄今發(fā)現(xiàn)的舒血管作用最強的內(nèi)源性物質(zhì),我們的實驗通過外源性補充CGRP，來觀察CGRP對高血壓心肌肥厚形成過程的影響。結果表明，用CGRP干預后，心肌肥厚大鼠SBP、左心系數(shù)、心肌中TNF-α、ET的含量明顯降低，提示CGRP通過其降低血壓、拮抗心肌中TNF-α、ET的生成，從而逆轉心肌肥厚，這就表明通過外源性及時補充因壓力超負荷引起的CGRP不足，可以預防和逆轉高血壓心肌肥厚。其機制可能一方面通過減輕心臟后負荷, 從而改善血流動力學因素對心肌重構的影響；另一方面可能通過降低心肌組織 ET、TNF-α合成和分泌，從而阻止TNF-α、 ET、CGRP、調(diào)節(jié)紊亂的發(fā)生，而起到抑制心肌肥厚的作用。CGRP又是機體內(nèi)源性的舒血管物質(zhì), 作為抗高血壓心肌肥厚的輔助用藥安全,無副作用，具有廣闊的臨床應用前景。

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文獻標志碼：A

文章編號：1001-1978(2016)02-0294-02

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2016.02.029

作者簡介：張欣(1980-)，女，博士生，講師，研究方向：心血管藥理學，E-mail：zxcc.aa@163.com;薛明明(1973-),女，碩士，教授,研究方向：心血管藥理學，通訊作者，Tel:0471-6657031,E-mail：happybird-nmg@163.com

基金項目：內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學基金資助項目(No 2012MS1125)

收稿日期:2015-09-25,修回日期:2015-10-22

網(wǎng)絡出版時間：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160125.1557.058.html

網(wǎng)絡出版地址：2016-1-25 15:57