CD64指數(shù)對肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染的診斷價(jià)值

王顯雷，王　勇，何　聰，陳素麗，劉　銳，郭麗萍

(1.河北省胸科醫(yī)院結(jié)核三病區(qū)，河北 石家莊 050041；2.河北省人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，河北 石家莊 050051；

?

·論著·

CD64指數(shù)對肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染的診斷價(jià)值

王顯雷1，王勇1，何聰2，陳素麗1，劉銳1，郭麗萍3*

(1.河北省胸科醫(yī)院結(jié)核三病區(qū)，河北 石家莊 050041；2.河北省人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，河北 石家莊 050051；

3.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院呼吸科，河北 石家莊 050000)

目的研究CD64指數(shù)對肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染的診斷價(jià)值。方法選取河北省胸科醫(yī)院結(jié)核科及呼吸科住院患者200例，其中肺結(jié)核患者(Ⅰ組)及肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染患者(Ⅱ組)各100例。觀察2組48 h靜脈血CD64及降鈣素原(procalcitonin，PCT)、C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。根據(jù)2組CD64及PCT、CRP數(shù)據(jù)繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線，計(jì)算曲線下面積，計(jì)算得出CD64指數(shù)、PCT、CRP最佳臨界值，并計(jì)算其敏感度及特異度。結(jié)果Ⅱ組CD64指數(shù)、PCT、CRP均高于Ⅰ組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD64、PCT及CRP數(shù)據(jù)ROC曲線下面積 CD64(0.971)>PCT(0.921)>CRP(0.825)，與標(biāo)準(zhǔn)面積0.5相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論CD64在肺結(jié)核合并肺部感染患者血清中含量較高，在診斷細(xì)菌感染的判定價(jià)值上與PCT相仿，優(yōu)于CRP，可作為判斷肺結(jié)核合并肺部感染患者存在細(xì)菌感染的輔助檢查指標(biāo)。

結(jié)核，肺；降鈣素；感染

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.06.012

肺結(jié)核、細(xì)菌性肺炎是呼吸科常見病、多發(fā)病。有時(shí)二者難以鑒別，且常表現(xiàn)為肺結(jié)核基礎(chǔ)上合并肺部感染，給臨床診斷、治療帶來一定困難。臨床上常通過抗感染治療或試驗(yàn)性抗結(jié)核、抗感染治療并行，短期復(fù)查胸部X線片、胸部CT，根據(jù)病變吸收情況作出最終診斷，這勢必造成抗生素、抗結(jié)核藥物的不合理使用，從而導(dǎo)致病情延誤。CD64作為感染性疾病的敏感指標(biāo)在很多研究中得到證實(shí)，且特異度較高。本研究檢測CD64在肺結(jié)核繼發(fā)肺部感染中的表達(dá)水平，同時(shí)與降鈣素原(procalcitonin，PCT)及C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)進(jìn)行對比分析，旨在探討CD64在肺結(jié)核及肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染中的診斷價(jià)值，以便為早期區(qū)分肺結(jié)核和細(xì)菌性肺炎以及為肺結(jié)核合并感染時(shí)早期、合理使用抗生素提供理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2012年10月—2014年10月河北省胸科醫(yī)院結(jié)核科及呼吸科住院患者200例，其中肺結(jié)核患者(Ⅰ組)及肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染患者(Ⅱ組)各100例。Ⅰ組男性44例，女性56例，年齡21～75歲，平均(50.39±12.94)歲。Ⅱ組男性47例,女性53例,年齡23～74歲，平均(49.76±10.25)歲。2組性別、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入標(biāo)準(zhǔn)患者年齡大于18歲、小于80歲。肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合2001年中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病分會(huì)《肺結(jié)核診斷和治療指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，病原學(xué)或組織病理學(xué)檢查陽性，并且抗結(jié)核治療有效。肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染目前仍缺乏統(tǒng)一的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，本研究主要根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行臨床診斷：①肺結(jié)核經(jīng)有效抗結(jié)核藥物治療，不需使用抗生素治療，臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)，胸部X線或胸部CT顯示肺部陰影吸收，診斷為單純肺結(jié)核；②肺結(jié)核經(jīng)有效抗結(jié)核藥物治療后，感染癥狀好轉(zhuǎn)不明顯，發(fā)熱不退或再次發(fā)熱，咯膿痰或痰量較多，實(shí)驗(yàn)室檢查顯示白細(xì)胞、CRP、PCT升高，聯(lián)合使用抗生素后，患者臨床癥狀好轉(zhuǎn)，肺部陰影有吸收好轉(zhuǎn)，診斷為肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染。

1.3排除標(biāo)準(zhǔn)年齡小于18歲、大于80歲；病毒性肺炎、非典型病原體肺炎；合并肺外感染；院外應(yīng)用抗生素；合并肝炎、自身免疫系統(tǒng)疾病、肺部基礎(chǔ)病(如慢性支氣管肺炎、支氣管擴(kuò)張)、艾滋病、糖尿病等慢性疾病的患者。

1.4實(shí)驗(yàn)試劑及主要儀器異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的小鼠抗人CD64抗體(購于美國BD公司)，CD64-FITC同型陰性對照試劑(購于美國BD公司)，溶血?jiǎng)?0.83%的氯化銨溶液)。微量血 CRP 檢測儀(雅培Ⅰ2000)，PCT 檢測儀(羅氏Cobas e601)，流式細(xì)胞儀(BD FACSCalibur)。

1.5觀察指標(biāo)所有入組患者均于入組48 h內(nèi)抽取靜脈血查CD64、PCT、CRP。

1.6CD64指數(shù)、PCT及CRP檢測

1.6.1CD64指數(shù)檢測待檢測標(biāo)本制成單細(xì)胞懸液，經(jīng)過熒光素標(biāo)記的CD64-FITC單抗與細(xì)胞表面CD64抗原相結(jié)合，經(jīng)激光照射，被標(biāo)記上的熒光素發(fā)出一定波長的光，被探測器檢測，并將不同波長的熒光信號進(jìn)行區(qū)分，送到不同的光電倍增管中，經(jīng)過信號轉(zhuǎn)換、放大、數(shù)字化處理等流程，通過計(jì)算機(jī)直觀地統(tǒng)計(jì)染各種熒光染料的細(xì)胞的百分比。

1.6.2PCT檢測應(yīng)用羅氏cobase e601全自動(dòng)生化分析儀，采用電化學(xué)發(fā)光檢測法進(jìn)行檢測。EDTA-K2管采靜脈血2 mL顛倒混勻后即刻1 300r/min離心10 min分離血漿，儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本中的分析物濃度，由專人操作并質(zhì)控，嚴(yán)格按說明書操作。

1.6.3CRP檢測應(yīng)用雅培Ⅰ2000全自動(dòng)生化分析儀，采用超敏免疫比濁法測定，由專人操作并質(zhì)控，全部采用雙標(biāo)準(zhǔn)雙管測量，嚴(yán)格按說明書操作。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線，計(jì)算曲線下面積，計(jì)算得出CD64指數(shù)、PCT、CRP的最佳臨界值，并計(jì)算其敏感度及特異度。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

肺結(jié)核合并肺部感染組CD64指數(shù)、PCT、CRP均高于肺結(jié)核組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

根據(jù)肺結(jié)核組、肺結(jié)核合并肺部感染組的 CD64、PCT及CRP數(shù)據(jù)繪制ROC曲線，可見曲線下面積 CD64(0.971)>PCT(0.921)>CRP(0.825)，與標(biāo)準(zhǔn)面積0.5相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖 1)。計(jì)算得出血清 CD64、PCT、CRP的最佳截?cái)嘀担?dāng)CD64取臨界值為 3.930時(shí)，診斷肺結(jié)核合并肺部感染的敏感度為86.2%，特異度為98.3%;當(dāng)PCT取臨界值為0.395 μg/L時(shí)，敏感度為 80.5%，特異度為 95.3%；當(dāng) CRP 取 26.25 mg/L 為臨界值時(shí)，敏感度為 88.0%，特異度為 84.6%。見表2。

表12組CD64、PCT及CRP比較

組別CD64PCT(μg/L)CRP(mg/L)Ⅰ組2.916±1.5910.258±0.09914.400±6.588Ⅱ組6.424±2.1220.482±0.16630.963±14.845t9.19811.55110.198P<0.010.021<0.01

表2　CD64、PCT、CRP對診斷肺結(jié)核合并肺部感染的意義

圖1　CD64、PCT、CRP的ROC曲線

3　討　　論

肺結(jié)核本身是一種由結(jié)核分枝桿菌引起的肺部感染，與其他病原體引起的肺部感染比較，在癥狀，體征及影像學(xué)上并無絕對特征性的表現(xiàn)，如沒有可靠的病原學(xué)依據(jù)，肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染的診斷很難成立，但細(xì)菌性肺炎患者痰標(biāo)本容易受口咽部菌群的污染，因此很難從常規(guī)的痰標(biāo)本的分離培養(yǎng)結(jié)果來確定真正的病原體，故肺結(jié)核合并肺部細(xì)菌感染的診斷有很大難度。

PCT主要由甲狀腺C細(xì)胞分泌，是降鈣素的前肽，為一種無激素活性的糖蛋白。正常人血清中PCT含量極低，在體外穩(wěn)定性很好。當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染后，脂多糖及各種炎癥因子，如白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素2、白細(xì)胞介素6和腫瘤壞死因子α等對機(jī)體PCT表達(dá)為正刺激效應(yīng)，在短時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生大量PCT。在全身性炎癥反應(yīng)的2～3 h PCT即可升高，因此，PCT具有早期診斷膿毒癥的價(jià)值[2-3]。近年來研究表明，PCT是與感染相關(guān)性較好的生物學(xué)標(biāo)記物，它與感染所致的全身炎癥反應(yīng)綜合征、膿毒癥等全身性感染的嚴(yán)重程度和預(yù)后具有較好的相關(guān)性[4]。重癥肺炎時(shí)，血清PCT濃度明顯增高，經(jīng)抗菌藥物治療，感染被控制后，血清PCT濃度會(huì)逐漸下降，故有學(xué)者認(rèn)為PCT可反映全身炎癥反應(yīng)的活躍程度[5]。目前臨床上認(rèn)為PCT是現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)中早期診斷膿毒癥最有效的指標(biāo)，也是鑒別細(xì)菌感染與其他非細(xì)菌性全身炎癥反應(yīng)的最佳標(biāo)志物之一[6]。

CD64是一種相對分子質(zhì)量為72 000的跨膜糖蛋白，屬免疫球蛋白超家族中的成員，在細(xì)胞吞噬、抗原遞呈、釋放炎癥介質(zhì)、清除免疫復(fù)合物中起重要作用，起連接細(xì)胞免疫和體液免疫的橋梁作用[7]。

CD64主要分布于單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞表面，是巨噬細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞表面的最基本成分。生理情況下，CD64在中性粒細(xì)胞表面呈低水平表達(dá)，當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染時(shí)，在細(xì)菌細(xì)胞壁內(nèi)毒素、集落刺激因子、白細(xì)胞介素12、干擾素γ等因子的刺激下，CD64在中性粒細(xì)胞表面表達(dá)明顯增加[8]。CD64介導(dǎo)中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞對免疫球蛋白的Fc段進(jìn)行識別和結(jié)合，從而增強(qiáng)免疫球蛋白的生理功能及殺傷能力，同時(shí)可調(diào)控多種炎癥反應(yīng)，在抗感染過程中發(fā)揮重要作用[9]。

一般情況下，CD64在機(jī)體感染或內(nèi)毒素入侵等刺激后4～6 h即可明顯升高，CD64與其配體結(jié)合后，可啟動(dòng)并放大免疫反應(yīng)，主要包括吞噬病原微生物、抗體依賴的細(xì)胞毒性作用及大量細(xì)胞因子的釋放[10]。有研究顯示，感染發(fā)生后24 h內(nèi)，CD64表達(dá)水平明顯增高，為細(xì)菌感染尤其是全身性感染早期敏感的指標(biāo)[11-13]。目前國內(nèi)外關(guān)于肺結(jié)核合并肺部感染患者CD64表達(dá)水平研究較少。本研究結(jié)果顯示，肺結(jié)核合并肺部感染組患者CD64指數(shù)較肺結(jié)核組明顯升高，肺結(jié)核組、肺結(jié)核合并肺部感染組CD64、PCT、CRP的ROC曲線提示CD64診斷肺結(jié)核合并肺部感染的特異度均較PCT及CRP高。

綜上所述，CD64可作為一種敏感的監(jiān)測感染狀態(tài)的指標(biāo)，尤其是當(dāng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陰性或結(jié)果回報(bào)延遲時(shí)，根據(jù)CD64指導(dǎo)抗生素應(yīng)用尤為重要。實(shí)際臨床工作中結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)及聯(lián)合檢測、動(dòng)態(tài)觀察CD64、PCT、CRP的變化，對肺部感染情況進(jìn)行綜合評估，可判斷患者的疾病狀態(tài)，這對于系統(tǒng)管理和治療肺結(jié)核合并肺部感染患者具有重要意義。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì).肺結(jié)核診斷和治療指南[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2001,24(2):70-75.

[2]Vouloumanou EK，Plessa E,Karageorgopoulos DE,et al. Serum procalcitonin as a diagnostic marker for neonatal sepsis：a systematic review and Meta analysis[J]. Intensive Care Med,2011,37(5):747-762.

[3]Pupelis G,Drozdova N,Mukans M,et al. Serum procalcitonin is a sensitive marker for septic shock and mortality insecondary peritonitis[J]. Anaesthesiol Intensive Ther，2014,46(4):262-273.

[4]Jung B,Embriaco N,Roux F,et al. Microbiogical data,but not procalcitonin improve the accuracy of the clinical pulmonary infection score[J]. Intensive Care Med,2010,36(5):790-798.

[5]Cuquemelle E,Soulis F,Villers D,et al. Can procalcitionin help identify associated bacterial infection in patients with severe influenza peneumonia?a multicentre study[J]. Intensive Care Med,2011,37(5):796-800.

[6]Dellinger RP,Levy MM,Rhodes A,et al.Surviving sepsis campaign:international guidelines for management of severe sepsis and septic shock:2012[J]. Crit Care Med,2013,41(2):580-637.

[7]Streimish I,Bizzarro M,Northrup V,et al. Neutrophil CD64 as a diagnostic marker in neonatal sepsis[J]. Pediatr Infect Dis J,2012，31(7):777-781.

[8]Farias MG,de Lucena NP,Dalbo S,et al. Neutrophil CD64 expression as an important diagnostic marker of infectionand sepsis inhospital patients[J]. J Immunol Methods,2014,414:65-68.

[9]Soni S,Wadhwa N,Kumar R,et al. Evaluation of cd64expression on neutrophils as an early indicator ofneonatal sepsis[J]. Pediatr Infect Dis J,2013,32,(1):e33-37.

[10]Cid J,Aguinaco R,Sanchez R,et al. Neutrophil CD64 expression as marker of bacterial infection:a systematic review and meta-analysis[J]. J Infect,2010,60(5):313-319.

[11]Hussein OA,El-Toukhy MA. Neutrophil CD64 expression in inflammatory autoimmune diseases:its value in distinguishing infection from disease flare[J]. Immunol Invest,2010,39(7):699-712.

[12]Gros A,Roussel M,Sauvadet E,et al. The sensitiviy of neutrophil CD64 expression as a biomarker of bacterial infection is low in critically ill patients[J]. Intensive Care Med,2012,38(3):445-452.

[13]Maertzdorf J,Repsilber D,Parida SK,et al. Human gene expression profiles of susceptibility and resistance in tuberculosis[J]. Genes Immunity,2011,12(1)：15-22.

(本文編輯：劉斯靜)

Diagnostic value of CD64 on pulmonary tuberculosis with bacterial infection

WANG Xian-lei1, WANG Yong1, HE Cong2, CHEN Su-li1, LIU Rui1, GUO Li-ping3*

(1.Department of Tuberculosis Ⅲ Ward, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041，China; 2.Department of Critical Care Medicine, the General Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041，China; 3.Department of Respiration, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000，China)

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of CD64 on pulmonary tuberculosis with bacterial infection. MethodsA total of 200 patients, hospitalizing at the departments of respiration and tuberculosis in Hebei Chest Hospital were divided into two groups:Group Ⅰ(n=100), patients with pulmonary tuberculosis; Group Ⅱ(n=100), patients suffering pulmonary tuberculosis with bacterial infection. Firstly, we detected the level of CD64, procalcitonin(PCT), and C-reactive protein(CRP) invenous blood drawn within 48 h after patients were enrolled in group. Secondly, ROC curves could be plotted based on the data of CD64，PCT and CRP. Finally, it was essential to account the area under curve, the best borderline of CD64, PCT and CRP. Then the sensitivity and specificity were caculated. ResultsCompared with Group Ⅰ，CD64 index，PCT and CRP in Group Ⅱ were increased significantly(P<0.05). The area under curves plotted basing on the data from two groups were 0.971(CD64)>0.921(PCT)>0.825(CRP), respectively. Compared with the standard area of 0.5, there were statistical significance(P<0.05). ConclusionCD64 is highly expressed in infectious patients with pulmonary tuberculosis, whose diagnostic value is similar to PCT, whereas better than CRP. These results indicate that CD64 might be an assistant marker in diagnosing pulmonary tuberculosis with bacterial infection.

tuberculosis, pulmonary； calcitonin； infection

2015-10-21；

2016-02-28

河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究指導(dǎo)性課題(20130441)

王顯雷(1981-)，男，滿族，河北豐寧人，河北省胸科醫(yī)院主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)學(xué)士，從事呼吸系統(tǒng)疾病診治研究。

R521

A

1007-3205(2016)06-0663-04