凝膠滲透GC-QQQ法測定白酒中六六六與滴滴涕農(nóng)藥殘留

姜　利　侯素麗　湯有宏,2　劉國英,2　張光耀　高江婧　張大軍

(1.安徽古井貢酒股份有限公司，亳州 236800；2.安徽省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心，亳州 236820)

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凝膠滲透GC-QQQ法測定白酒中六六六與滴滴涕農(nóng)藥殘留

姜利1侯素麗1湯有宏1,2劉國英1,2張光耀1高江婧1張大軍1

(1.安徽古井貢酒股份有限公司，亳州 236800；2.安徽省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心，亳州 236820)

采用三重串聯(lián)四級(jí)桿氣質(zhì)聯(lián)用儀，建立了白酒中六六六和滴滴涕殘留的快速檢測方法。白酒去酒精后，采用二氯甲烷+丙酮提取，有機(jī)相用凝膠滲透進(jìn)行凈化、濃縮；經(jīng)HP-5MS毛細(xì)管柱分離后進(jìn)行質(zhì)譜分析，采用選擇性離子檢測模式，以子離子豐度比定性，內(nèi)標(biāo)法定量。六六六與滴滴涕在0.01～0.2mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(相關(guān)系數(shù)均大于0.99)，方法檢出限為0.20～1.0μg/L。白酒中六六六與滴滴涕的3個(gè)添加水平的回收率在80.2%～108.2%，重復(fù)性的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在2.0%～4.6%之間。該方法準(zhǔn)確可靠，適用于白酒中六六六與滴滴涕殘留的定性定量分析。

三重串聯(lián)四級(jí)桿氣質(zhì)聯(lián)用儀凝膠滲透色譜白酒六六六滴滴涕

20世紀(jì)40年代 DDT、六六六兩種有機(jī)氯化合物殺蟲藥開始使用，由于它們防治面廣，藥效比當(dāng)時(shí)的其他農(nóng)藥好，還由于它們的急性毒性低，而且殘留毒性尚未被發(fā)現(xiàn)，因而被廣泛用于防治作物的害蟲。六六六與滴滴涕的缺點(diǎn)是不易被生物分解，造成殘留而污染環(huán)境,至今仍在全球范圍的各種環(huán)境介質(zhì)中廣泛存在。有機(jī)氯農(nóng)藥因其高殘留性及高危害性引起了人們的廣泛重視[1]。白酒是以高粱等糧食為主要原料經(jīng)糊化、發(fā)酵、蒸餾而成，雖然經(jīng)過高溫過程，減少了農(nóng)藥殘留量，但仍有一部分可能會(huì)殘留在酒中，存在潛在威脅。因此建立一種準(zhǔn)確、靈敏的分析白酒中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測方法具有重要意義[2]。

目前國內(nèi)外有關(guān)有機(jī)氯農(nóng)殘檢測的研究報(bào)道很多，主要是以GC-ECD、GC-MS為主，樣品前處理是農(nóng)殘檢測的關(guān)鍵步驟，液態(tài)樣品的前處理主要有固相萃取、分散固相萃取、固相微萃取、凝膠滲透等[3]。本實(shí)驗(yàn)采用凝膠滲透色譜處理樣品，建立了三重串聯(lián)四級(jí)桿氣質(zhì)聯(lián)用儀MRM方法測定白酒中六六六與滴滴涕的方法，該方法定性準(zhǔn)確，靈敏度與準(zhǔn)確度均能滿足農(nóng)殘的分析要求。

1　材料與方法

1.1儀器

安捷倫三重串聯(lián)四級(jí)桿氣質(zhì)聯(lián)用儀7000C(配EI源)；瑞士步琪R210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；上海磐合Lctech Gmbh型全自動(dòng)凝膠滲透色譜儀。

1.2試劑

有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)品(六六六4種異構(gòu)體：α-666、β-666、γ-666和δ-666；DDT的4種異構(gòu)體：p.p’-DDT、o.p’-DDT、p.p’-DDE和p.p’-DDD，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所)；環(huán)氧七氯(100mg/L，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所)；二氯甲烷(HPLC);丙酮(HPLC);無水硫酸鈉(分析純，烘干后儲(chǔ)存于干燥器中，冷卻后備用)。

1.3色譜條件

色譜柱：安捷倫HP-5MS毛細(xì)管柱(30m×0.25 mm(內(nèi)徑)×0.25μm)[4]；進(jìn)樣口溫度250℃；傳輸線溫度：280℃；載氣：氦氣，純度99.999%；流速：1mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積：1μL[5,6]。

1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

吸取六六六與滴滴涕的混合標(biāo)準(zhǔn)品，加入一定量的環(huán)氧七氯，用正己烷定容分別配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在MRM方法條件下測定，以環(huán)氧七氯為內(nèi)標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5樣品前處理方法

1.5.1樣品的提取

吸取25mL酒樣(加入一定量內(nèi)標(biāo))于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40℃旋蒸除去酒精。去除酒精后將樣品轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入20mL二氯甲烷+丙酮(4∶1)萃取，靜置分層后取有機(jī)相(經(jīng)25g無水硫酸鈉)。重復(fù)上述步驟2次，合并有機(jī)相于樣品瓶中[7]。

1.5.2樣品的凈化

有機(jī)相在線濃縮后進(jìn)入凝膠滲透柱凈化，流動(dòng)相為環(huán)己烷+乙酸乙酯(1∶1)；

收集洗脫液并進(jìn)行在線濃縮定容，上樣進(jìn)行分析。

1.6樣品的定性

若樣品中待測物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間一致，同時(shí)所選定性離子的相對豐度比與標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)的離子相對豐度比一致或偏差在允許范圍內(nèi)，即可進(jìn)行定性確認(rèn)，判定樣品陽性檢出。

2　結(jié)果與討論

2.1質(zhì)譜儀器條件的優(yōu)化

通過進(jìn)行試驗(yàn)，選定六六六、滴滴涕與環(huán)氧七氯9種物質(zhì)的母離子、子離子以及碰撞能。具體內(nèi)容見表1。

表1　MRM參數(shù)的確定

2.2線性關(guān)系與定量限

按1.4方法，以六六六和滴滴涕化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，定量離子對的峰面積為縱坐標(biāo)對一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，各物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)含量在0.01～0.2mg/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)均大于0.995，滿足定量要求。本方法采用空白基質(zhì)進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)，以其定量離子色譜峰的信噪比(S/N)3確定六六六與滴滴涕四種異構(gòu)體的檢出限為0.20～1.0μg/L，圖1為六六六、滴滴涕標(biāo)準(zhǔn)溶液(MRM)譜圖。

2.3方法重現(xiàn)性與加標(biāo)回收率試驗(yàn)

取同一白酒樣品共18份，平均分為3組，各組分別添加不同濃度的六六六與滴滴涕混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行樣品加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)水平測定6次，在3個(gè)濃度添加水平上，六六六與滴滴涕的平均回收率均在80.2%～108.2%。結(jié)果見表2。

表2　各個(gè)農(nóng)藥組分的回收率

3　結(jié)論

實(shí)驗(yàn)研究建立了凝膠滲透GC-QQQ法檢測白酒中的六六六與滴滴涕殘留的快速測定和確證方法，該方法樣品前處理操作簡便，與公開報(bào)道的方法相比，測定結(jié)果線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.995，檢出限為0.20～1.0μg/L，加標(biāo)回收率在80.2%～108.2%之間，精密度與準(zhǔn)確度較好，方法的回收率和重現(xiàn)性能滿足白酒中的六六六與滴滴涕殘留定性和定量檢測要求，適用于進(jìn)行白酒中六六六與滴滴涕的監(jiān)控檢測及質(zhì)量安全評(píng)估[8]。

[1] 楊抗震,張?jiān)?李潔莉,等.食品中六六六和滴滴涕殘留檢測方法研究進(jìn)展[J].北京農(nóng)業(yè),2012,(3):108-109.

[2] 李俊,王震,龐宏宇,等.白酒中多種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測方法[J].釀酒科技,2013,(11):98-100.

[3] 張志罡,李勇,朱兆洲.GC-MS分析中的樣品制備和前處理技術(shù)[J].生命科學(xué)儀器,2010,(8):31-33.

[4] 王蓉,袁東,付大友,等.氣質(zhì)聯(lián)用測定白酒中的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留[J].釀酒科技,2007,(12):102-104.

[5] 李媛,肖麗和,殷果,等.分散固相萃取-氣相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法測定蒺藜中17中農(nóng)藥殘留[J].藥物分析雜志,2013,33(4):661-668.

[6] 施家威,李績革,王玉飛,等.固相萃取-氣相色譜/三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜分析蔬菜中43種農(nóng)藥殘留[J].色譜,2010,(12):1137-1143.

[7] 陳楠楠,高紅波,鐘其頂,等.分散固相萃取GC-MS法快速測定葡萄酒和葡萄中22種農(nóng)藥殘留[J].釀酒科技,2012,(7):119-123.

[8] DB34/T 1075-2009,蔬菜、水果、糧食、茶葉中30種有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多殘留同時(shí)測定方法——?dú)庀嗌V法[J].

Determination of pesticide residues of BHC and DDT in liquor by gel permeation chromatography(GPC)and GC-QQQ.

Jiang Li1,Hou Suli1,Tang Youhong1,2,Liu Guoying1,2, Zhang Guangyao1,Gao Jiangjing1,Zhang Dajun1

(1.AnhuiGujingGongjiuCo.Ltd.,Bozhou, 236820,China; 2.AnhuiSolid-StateFermentationEngineeringTechnologyResearchCenter,Bozhou236820,China)

After the evaporation of alcohol from liquor, the organic phase is extracted by methylene chloride and acetone，then purified and condensed by gel permeation chromatography method. The target analyte is detected by selective ion detection mode， qualitatively confirmed by abundance ratio of ions，and quantified by internal standard method.BHC and DDT have a good linear relationship (correlation coefficients are greater than 0.99) in mass concentration of 0.01-0.2 mg/L, the detection limit is 0.20-1.0 μg/L. At three spiked levels of BHC and DDT in liquor，the average recovery rates are from 80.2% to 108.2% and the repeatability relative standard deviations (RSDs) are between 2.0% and 4.6%. The method is accurate and reliable，it can be used for the qualitative and quantitative analysis of BHC and DDT residues in liquor.

gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry (GC-QQQ); gel permeation chromatography; liquor; BHC;DDT

姜 利，女，助理工程師，安徽古井貢酒股份有限公司技術(shù)中心研究員，從事釀酒發(fā)酵技術(shù)研究。

10.3936/j.issn.1001-232x.2016.02.010

2015-07-09