超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化技術對淺表淋巴結轉移癌的診斷價值

戴維德，吳明曉，王川予，張　征，陳　嵐，馬衛華，韓秀婕，郭發金（北京醫院超聲科，北京00730；北京醫院病理科）

超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化技術對淺表淋巴結轉移癌的診斷價值

戴維德1，吳明曉1，王川予1，張征1，陳嵐2，馬衛華1，韓秀婕1，郭發金1（1北京醫院超聲科，北京100730；2北京醫院病理科）

目的評價超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化技術對于淺表淋巴結轉移癌的診斷價值。方法對70例淺表淋巴結腫大患者進行超聲引導下淋巴結細針穿刺抽吸，所獲得標本送細胞學檢查和細胞塊免疫組化檢測。將穿刺病理結果與術后病理結果或隨訪結果進行回顧性分析及對比。結果本組病例穿刺取材成功率為97.1%（68/70）。68例患者中，66例細胞學檢查與細胞塊免疫組化聯合診斷結果與隨訪結果相符，臨床診斷符合率為97.1%。穿刺細胞塊免疫組化結果:淋巴結轉移癌51例，非淋巴結轉移癌17例。術后病理或臨床隨訪結果:淋巴結轉移癌53例，非淋巴結轉移癌15例。該技術對淺表淋巴結轉移癌的診斷敏感度為96.2%（51/53），特異度為88.2%（15/17）。結論超聲引導細針抽吸細胞塊免疫組化檢測技術對淺表淋巴結轉移癌的診斷具有簡便實用、安全可靠、準確率高的特點，具有較高的臨床應用價值和推廣前景。

超聲引導；淋巴結轉移癌；細胞塊；免疫組化

淺表淋巴結位置表淺，腫大者易于被患者感知，常常作為患者首發或者唯一體征前來就診。其病因復雜，而腫瘤的淋巴結轉移是其中的重要因素之一［1］。對淺表淋巴結轉移癌的明確診斷，有助于臨床對腫瘤性質及腫瘤分期的判斷以及對治療方案的選擇和預后評價。本研究通過對70例淺表淋巴結腫大患者進行超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化檢測，并與手術病理或臨床隨訪結果對照，評價該技術對于淺表淋巴結轉移癌的診斷價值。

1　對象和方法

1.1對象

2014-10～2015-12在我院門診及住院就診的淋巴結腫大病因待查患者70例，其中男41例，女29例；年齡16-95歲，平均年齡48.6歲；其中腫大淋巴結位于頸部33例，鎖骨上部12例，腋窩淋巴結15例，腹股溝淋巴結8例，其他部位淋巴結2例。在行淋巴結穿刺前常規檢測凝血功能、血常規；醫生向患者或其家屬詳細交代超聲引導穿刺的方法、目的、注意事項及可能的并發癥，并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1設備器材百勝Mylab90型彩色多普勒超聲成像系統，探頭頻率5-12mHz。穿刺器材:10ml一次性注射器和25G空針各3支。

1.2.2操作方法患者取仰臥位或側臥位，充分顯露穿刺部位，先進行常規淋巴結超聲檢查，選擇最佳穿刺點、測量進針深度并完成體表定位。穿刺部位常規消毒鋪巾，2%利多卡因局麻后，手持10ml注射器接25G針頭，在超聲引導下避開大血管、神經及氣管等重要組織和臟器，進針到達腫塊邊緣。沿淋巴結長軸進入淋巴結皮質內，確定已刺入淋巴結內后，提拉注射器針芯至2ml刻度處，使注射器保持負壓狀態，反復旋轉抽吸3-5次后改變進針方向，使針頭在淋巴結內呈扇形朝不同方向抽吸，當注射器乳頭內出現吸取物后，去負壓退針。二維超聲顯示穿刺針穿入靶淋巴結（見圖1）。

一部分吸取物常規涂片2-3張，置入95%乙醇固定液中；一部分注入液基薄層細胞學檢測（TCT）小瓶中并送病檢。穿刺部位無菌紗布覆蓋并以適當力量壓迫穿刺點10min。觀察20min無不良反應方可離開。

圖1　二維超聲顯示穿刺針穿入靶淋巴結Figure1　Two-dimensional ultrasound showed puncture needle into the target lymph node

1.2.3免疫組化疑診來源于甲狀腺的病例，選用Tg；疑診來源于肺或胃腸道的病例，選用CK7；疑診來源于鼻咽部的病例，選擇CK14；而疑診神經內分泌起源的病例，選擇TTF-1、CgA及Syn。

1.3數據處理

統計病例取材成功率、臨床診斷符合率。評價超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化技術對于淺表淋巴結轉移癌診斷的敏感度、特異度。

2　結果

2.1超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化檢測結果

本組病例穿刺取材成功率為97.1%（68/70）。穿刺細胞塊免疫組化結果:淋巴結轉移癌51例；非淋巴結轉移癌17例，其中淋巴瘤8例，淋巴結反應性增生5例，淋巴結結核2例，無法診斷2例。術后病理或臨床隨訪結果:淋巴結轉移癌53例；非淋巴結轉移癌15例，其中淋巴瘤8例，淋巴結反應性增生5例，淋巴結結核2例（見表1）。

表1　細針抽吸細胞塊免疫組化檢測結果及術后或隨訪結果（例）Table1　The cell block immunohistochem icalresults and postoperative or follow-upresults（cases）

2.2超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化檢測評價淺表淋巴結轉移癌

超聲引導下細針抽吸細胞塊免疫組化檢測對淺表淋巴結轉移癌診斷的敏感度為96.2%（51/ 53），特異度為88.2%（15/17），臨床診斷符合率為97.1%（66/68），見表2。細胞塊免疫組化顯示Syn陽性表達（見圖2），細胞塊免疫組化及術后病理均診斷為肺小細胞癌頸淋巴結轉移；細胞塊免疫組化TTF-1及CK7陽性表達，細胞塊免疫組化及術后病理均診斷為肺腺癌頸淋巴結轉移（見圖3，4）。

表2　超聲引導細針抽吸細胞塊免疫組化檢測診斷淺表淋巴結轉移癌（例）Table2　results of cell block immunohistochemistry indiagnosis of superficial lym ph nodemetastasis （cases）

圖2　細胞塊免疫組化Syn陽性表達（DAB染色，×200）Figure2　Cell block immunohistochemistry showed positive expression of Syn（DAB staining，×200）

圖3　細胞塊免疫組化TTF-1陽性表達（DAB染色，×200）Figure3　Cell block immunohistochemistry showed positive expression of TTF-1（DAB staining，×200）

圖4　細胞塊免疫組化CK7陽性表達（DAB染色，×200）Figure4　Cell block immunohistochemistry showed positive expression of CK7（DAB staining，×200）

3　討論

淋巴結是人體免疫系統中重要的周圍淋巴器官。腫瘤發生淋巴道轉移時，原發腫瘤部位的腫瘤細胞可沿淋巴管侵入，并隨淋巴液到達淋巴引流區域的淋巴結。腫瘤細胞累及淋巴結，從而引起局部淋巴結腫大或形態改變［2］。對淺表淋巴結轉移癌的明確診斷，有助于臨床對腫瘤性質及腫瘤分期的判斷以及對治療方案的選擇和預后評價。

高頻超聲可對病變淋巴結形態、結構、內部回聲和血流分布等方面進行觀察。而超聲造影技術能進一步觀察淋巴結的血流灌注和微循環狀況，為淺表淋巴結病變性質的鑒別提供更為豐富的診斷信息［3］。目前，臨床通常采用外科手術切除或超聲引導粗針穿刺獲取組織學標本后進行免疫組化檢測來獲得淋巴結病變的病理診斷。手術切除活檢的優點是取材完整，易于滿足病理檢查的需要。但對患者創傷較大，易損傷周圍重要臟器及血管和神經。超聲引導下粗針穿刺淋巴結活檢所造成的創傷較手術要小，一般都能夠取得較滿意的標本，是鑒別淺表淋巴結良惡性的重要手段之一［4，5］。但這兩項技術都受到患者年齡、活檢部位、出凝血狀態等多因素影響。

超聲引導下細針抽吸相對于手術活檢或粗針活檢操作更簡單、對患者局部損傷更小，患者依從性更好。所得到的樣本一方面可以首先進行細胞學涂片檢查，通過對細胞內核膜、核仁及核質比等細胞形態異型性的觀察，對腫瘤生長的組織特異性診斷、分型，以及判斷轉移癌的組織來源進行初步判斷［6，7］。另一方面可以取樣本制成細胞塊，后者具有可以連續切片、標本易于保存及可以進行免疫組化標記染色等細胞學檢查不具備的優點［8，9］。由于淺表腫大淋巴結多位于頸部、鎖骨上下區、腋窩及腹股溝區等部位，其原發灶大多來自甲狀腺、鼻咽部、肺、乳腺及胃腸道。結合細胞學涂片檢查初步結論以及臨床病史和其他相關檢查，細針抽吸取得的細胞塊，在CK7、CK14、CK20、TTF-1、CgA、Syn等相關抗體中選取相應組合進行免疫組化標記染色，從而進一步明確腫瘤的良惡性、組織亞型及組織來源［10-12］。本研究細針穿刺取材成功率為97.1%，70例患者中僅有2例取材不滿意。66例細胞塊免疫組化檢測結果與隨訪結果相符，臨床診斷符合率為97.1%。細胞塊免疫組化結果與手術病理或臨床隨訪結果比較，該技術對淺表淋巴結轉移癌的診斷敏感度為96.2%，特異度為88.2%。表明細針抽吸細胞塊免疫組化檢測技術對于淺表淋巴結轉移癌診斷和鑒別診斷具有較高的應用價值。對于年老體弱或因活檢部位、出凝血狀態致手術或粗針活檢應用受限的患者尤其適用。

綜上所述，超聲引導細針抽吸細胞塊免疫組化檢測技術簡便實用、安全可靠，患者依從性好，對于淺表淋巴結轉移癌的診斷，具有較高的臨床診斷符合率、敏感度和特異度，對其治療方案的制定、治療效果評估和預后判斷意義重大，值得推廣。

［1］Martin BM，Etra JW，RussellmC，et al.Oncologic outcome of patients undergoingVideoscopic inguinal lymphadenectomy formetastaticmelanoma［J］.JAm Coll Surg，2014，218（4）:620-626.

［2］陳慰峰.醫學免疫學［M］.4版.北京:人民衛生出版社，2004: 16-18.

［3］冀鴻濤，朱強，榮雪余，等.超聲造影在頭頸部淋巴結良惡性病變鑒別診斷中的應用［J］.中華醫學超聲雜志:電子版，2011，8（7）:1549-1556.

［4］韓峰，李安華，鄒如海，等.超聲引導頸部淋巴結活檢的對比研究［J］.中國超聲醫學雜志，2008，24（10）:888-890.

［5］董寶瑋，溫朝陽.介入超聲學實用教程［M］.北京:人民軍醫出版社，2013:66-69.

［6］KooV，Lioe TF，SpencerA.Fine needle aspiration cytology in thediagnosis ofgranulomatous lymphadenitis［J］.Ulstermed J，2006，75:59-64.

［7］汪宏梅.133例頸部淋巴結細針穿刺細胞學分析［J］.西部醫學，2012，24（7）:1377-1378.

［8］劉福川，王小兵，陳守菊，等.胸腹水細胞塊的免疫組織化學研究［J］.中國腫瘤，2004，13（1）:42-44.

［9］Ku lkarniM B，Prabhudesainm，Desai SB，et al.Scrape cellblock technique for fine needle aspiration cytology smears［J］.Cytopathology，2000，11:179-184.

［10］Ugurluoglu C，Kurtipek E，Unlu Y，et al.Importance of the cell block technique indiagnosing patientswith non-small cell carcinoma accompanied by pleural effusion［J］.Asian Pac JCancer Prev，2015，16:3057-3060.

［11］Rivero ER，Grando LJ，de Oliveiraramosg，et al.Utility of cell block in the cytological preoperativediagnosis of keratocystic odontogenic tumor［J］.Patholres Pract，2014，210:224-227.

［12］Chumakov FI，KhmelevarI.Head and neck lymph node lesions ［J］.Vesth Otorinolaringol，2002，6:27-29.

DiagnosticValue of ultrasound-guided fine need le aspiration cytology com bined with cell block immunohistochem istry for superficial lym ph nodemetastatic carcinoma

DAIWeide1，WUmingxiao1，WANG Chuanyu1，ZHANG Zheng1，CHEN Lan2，MAWeihua1，HAN Xiujie1，GUO Fajin1（1department of Ultrasound，Beijinghospital，Beijing 100730，China；2department of Pathology，Beijinghospital）

Objective To evaluate the clinicalValue of ultrasound-guided fine needle aspiration cytology combined with cell block immunohistochemistry indiagnosing superficial lymph nodemetastatic carcinoma.Methods Superficial enlarged lymph node of 70 patientswere punctured and aspirated using fine needle under ultrasoundguidance.The sampleswere obtained for cytology and cell block immunohistochemistry.The conclusions and the follow-upresultswereretrospectively analyzed and compared.Results The puncture successfulrate was 97.1%（68/70）.Among68 patients，theresults of the cytology combined with cell block immunohistochemistry of 66 cases were consistentwith follow-upresults，and the coincidencerate of clinicaldiagnosis was 97.1%.Thediagnosisresults of cytology combined with cell block immunohistochem istry showed 51 cases of lymph nodemetastatic carcinoma and 17 cases of lymph node non-metastatic carcinoma.The pathologyresults after operation or follow-upresults showed 53 cases of lymph nodemetastatic carcinoma and 15 cases of lymph node non-metastatic carcinoma.The sensitivity and specificity of cytology combined with cell block immunohistochemistry was96.2%（51/53）and 88.2%（15/17），respectively.Conclusion Ultrasound-guided fine needle aspiration cytology combined with cell block immunohistochem istry is simple，practical，safe andreliable indiagnosis of superficial lymph nodemetastatic carcinoma andhashigher clinical applicationValue and promotion prospects.

ultrasound-guided；lymph nodemetastatic carcinoma；cell block；immunohistochemistry

R816.3

A

1007-6611（2016）04-0369-04

10.13753/j.issn.1007-6611.2016.04.016

國家科技支撐計劃基金資助項目（2014BAI08B03）；北京醫院臨床新技術準入項目（20150001）

戴維德，男，1971-09生，博士，主任醫師，E-mail:dai.weide@126.com

2016-01-15