梅毒血清學檢測方法的選擇

李秀姿+梁服泉+呂慶良+廖衍強

[摘要]目的研究并探討不同梅毒血清檢測方法在產前梅毒常規篩查中的應用效果。方法于2014年1月～2015年6月，選取在我院進行產前梅毒常規篩查的500例孕婦進行研究，分別采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法）對梅毒進行檢測，對比TPPA法、免疫膠體金法、TRUST法、三種方法聯合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值。結果500例進行產前梅毒常規篩查的孕婦中，有448例孕婦被確診為梅毒陽性，52例孕婦為陰性。三種梅毒血清學檢測方法的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均不存在統計學差異（P>0.05），但三種檢測方法聯合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均明顯高于單一的檢測方法（P<0.05）。結論在產前梅毒篩查中，TPPA法、TRUST法以及膠體金法具有其各自的優勢，三種方法進行聯合檢測可提高梅毒檢出率，產前梅毒篩查時可進行聯合檢測。

[關鍵詞]產前篩查；梅毒；血清學檢測；診斷

梅毒是一種傳染性較強的人類性傳播疾病，其病原體主要為梅毒螺旋體，傳染性較強，危害性較為嚴重。梅毒通常可分為先天性梅毒和獲得性梅毒，其中先天性梅毒主要傳播方式為母嬰傳播，母體攜帶的梅毒螺旋體通過胎盤組織傳染給宮內胎兒，可能會導致胎兒早產、流產等妊娠不利結局。因此，有必要在產前對孕婦進行梅毒篩查，以便于及時采取相應的干預措施，以減少梅毒的傳播，改善妊娠結局。本次研究為了探討不同梅毒血清檢測方法在產前梅毒常規篩查中的應用效果，特于2014年1月～2015年6月選取500例進行梅毒篩查的孕婦進行研究，分別采取梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法）進行檢測。現將研究結果分析如下。

1資料與方法

1.1一般資料

于2014年1月～2015年6月，選取在我院進行產前梅毒常規篩查的500例孕婦進行研究，所有孕婦均進行產前梅毒常規篩查，孕婦的年齡分布于20～37歲之間，平均為（29.67±6.34）歲，孕周為12～32周，平均孕周為（21.94±9.57）周，其中有427例初產婦、73例經產婦。在進行研究前，孕婦及其家屬均對研究方法和目的進行了詳細的了解，并簽署知情同意書。此次研究經醫院倫理委員會許可通過。

1.2研究方法

分別采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法）對孕婦進行梅毒血清學檢測，每例孕婦均于清晨空腹狀態時采集5mL的靜脈血液，以3000r/min的速度進行離心處理，取血清進行檢測。具體檢測方法如下：（1）TPPA法：使用微量滴管將血清稀釋液依次滴入微量反應板的第1～4孔中，每孔均滴入25μL血清稀釋液，使用移液管將25μL血清稀釋液轉移到微量反應板的第1孔中，再以2倍遞增的量依次轉移到第4孔，未致敏粒子滴入至第3孔中，將致敏粒子滴入至第4孔中，并使用平板振蕩器進行30s的振蕩，使其混合，加蓋，放置于室溫中，2h后觀察并記錄結果。當粒子環增大且外周邊緣不規則，或有均勻的凝集形成且呈膜狀延伸，表示檢測結果為陽性。（2）免疫膠體金法：將血清和膠體金試紙放置于室溫中，將試紙帶有箭頭的一端放置入血清容器中，待10s后，將其平放，15min后觀察并記錄結果。當試紙的檢測線和對照線位置均出現1條反應線時，表示檢測結果為陽性。（3）TRUST法：在室溫環境中，取0.05mL血清，置入試驗卡圈中，均勻涂抹，滴入1滴TRUST試劑液，以每分鐘100r的速度輕輕搖晃，8min后觀察并記錄結果。當試驗卡圈中出現粉紅色的凝集物質時，表示檢測結果為陽性。

1.3觀察指標

對比三種單一的梅毒血清學檢測方法、三種方法聯合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值。

以暗視野顯微鏡檢查和VDRL非梅毒螺旋體抗原試驗作為診斷金標準，顯微鏡下可見梅毒螺旋體，且非梅毒螺旋體抗原試驗結果為陰性，即確診為梅毒。敏感度=真陽性/（真陽性+假陰性）；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）；準確性=（真陽性+真陰性）/總例數；陽性預測值=真陽性/（真陽性+假陽性）；陰性預測值=真陰性/（真陰性+假陰性）。

1.4統計學方法

在SPSS17.0軟件中錄入數據，并進行處理。計數資料表示為[n（%）]，進行x²檢驗。三組之間的敏感度、特異度等數據采用2×3卡方表格檢驗，三組與三組聯合檢測之間的數據采用2×4卡方表格檢驗。當P<0.05時，表示數據間差異具有統計學意義。

2結果

500例進行產前梅毒常規篩查的孕婦中，有448例孕婦被確診為梅毒陽性，52例孕婦為陰性。三種梅毒血清學檢測方法的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均不存在顯著差異（x²=0.674、0.400、0.254、0.104、0.085，P=0.714、0.819、0.881、0.949、0.959），但三種檢測方法聯合檢測的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值均明顯高于單一的檢測方法（x²=35.953、14.484、50.323、26.975、50.381，P=0.000、0.002、0.000、0.000、0.000）。見表1～2。

3討論

梅毒是一種由梅毒螺旋體入侵機體引發的感染性疾病，是一種較為常見的性傳播疾病，其臨床表現以生殖器官潰瘍為主。一般情況下，梅毒可分為先天性梅毒和獲得性梅毒，獲得性梅毒是指通過性行為傳播的梅毒，先天性梅毒是指妊娠期孕婦體內的梅毒經胎盤組織進入宮內胎兒體內引發的梅毒。近年來，隨著生活方式和觀念的轉變，梅毒的發病率逐漸增高，通常表現為潛伏性的梅毒，如孕婦攜帶有梅毒螺旋體，很可能會傳染給其宮內胎兒，導致胎兒宮內死亡、胎兒畸形等妊娠不利結局的發生。因此，有必要對妊娠期孕婦進行產前梅毒篩查，以盡早發現孕婦的梅毒攜帶情況，并采取相應的干預措施，能夠有效具有十分重要的意義。

目前，臨床上檢測梅毒螺旋體的方法主要有梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA法）、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST法），其中TPPA法主要是通過對梅毒病原體進行分包處理，采用致敏粒子和未致敏粒子進行對比，觀察其凝集反應，以檢測梅毒螺旋體，這種檢測方法相對較為簡單，檢測所需時間較少，可在2h內對結果進行判斷，通常被應用于大規模的梅毒篩查；膠體金法主要是通過試紙在血清中放置后的反應線出現數目進行判斷，操作相對簡單，檢測較為快速，但容易受到其他因素的干擾，容易出現漏診；TRUST法主要是通過特制的TRUST試劑液對血清中的反應素進行檢測，操作簡單，但容易受到機體其它免疫性病變的影響，容易出現假陽性情況。

本次研究分別采用TPPA法、免疫膠體金法、TRUST法對500例孕婦的梅毒螺旋體進行檢測，檢測結果顯示，這三種檢測方法的敏感度、特異度、準確性、陽性預測值以及陰性預測值方面均不存在明顯差異，再對三種方法聯合檢測的檢出情況進行觀察后發現，聯合檢測的檢出準確性較之單一檢測明顯更高（P<0.05），提示我們在梅毒篩查時盡量進行聯合檢測。

綜上所述，在產前梅毒篩查中，TPPA法、TRUST法以及膠體金法具有其各自的優勢，三種方法進行聯合檢測可提高梅毒檢出率，產前梅毒篩查時可進行聯合檢測。