雞α-干擾素對(duì)羅曼雛雞免疫功能的影響

廖秀華　福建省建陽區(qū)麻沙鎮(zhèn)三農(nóng)服務(wù)中心　354200

雞α-干擾素對(duì)羅曼雛雞免疫功能的影響

廖秀華福建省建陽區(qū)麻沙鎮(zhèn)三農(nóng)服務(wù)中心354200

為研究雞α-干擾素對(duì)羅曼雛雞免疫功能的影響，將60羽健康1日齡羅曼雛雞隨機(jī)分為2組，即對(duì)照組、試驗(yàn)組。試驗(yàn)組雞于1日齡胸肌注射雞-α干擾素，0.5 mL/羽；對(duì)照組雞同期每羽注射生理鹽水0.5 mL。試驗(yàn)開始后，于第4 d、8 d、12 d、16 d、20 d對(duì)雞進(jìn)行翅下靜脈采血，并于20日齡剖殺摘取免疫器官。研究表明，雞注射α-干擾素后，其外周血液ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率和雞脾相對(duì)濕重顯著高于對(duì)照組，雞α-干擾素在一定范圍內(nèi)可提高雛雞免疫功能。

干擾素雞免疫功能

干擾素（Interferon，IFN）是1957年英國(guó)和瑞士科學(xué)家在利用雞胚絨毛尿囊膜研究流感干擾現(xiàn)象時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子［1］，并根據(jù)其可干擾病毒的復(fù)制而命名，其對(duì)病毒性疾病、惡性腫瘤以及增強(qiáng)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)能力有明顯效果。20世紀(jì)80年代，隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，人的干擾素（α、β和γ）已被成功克隆和表達(dá)，并廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床［2-4］。與哺乳動(dòng)物相似，雞的干擾素也有α、β和γ三種類型。1994年，sekellick等首次成功克隆和表達(dá)了雞IFN-α（ChIFN-α）基因，并進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析［5］。目前已知ChIFN-α是無內(nèi)含子的多拷貝基因，它與ChIFN-β有共同的受體，但抗病毒活性ChIFN-α比ChIFN-β強(qiáng)20倍［6-7］。

1　材料和方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物1日齡羅曼雛雞60羽。

1.2試驗(yàn)方法試驗(yàn)雞適應(yīng)性飼養(yǎng)至3日齡后，隨機(jī)分為2組：A組（對(duì)照組）和B組（試驗(yàn)組），每組30羽。其中，A組胸肌注射生理鹽水，B組胸肌注射干擾素；每組注射劑量均為0.5 mL/羽。于試驗(yàn)后第4 d、8 d、12 d、16 d和20 d，各組隨機(jī)抽取雞6羽，采血檢測(cè)雞外周血液ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率。于第20 d結(jié)束試驗(yàn)，逐羽稱活重，計(jì)算脾和法氏囊相對(duì)重量。

1.3外周血液ANAE+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)方法每組雞翅靜脈采血、涂片，采用mueller非特異性酸性α-醋酸荼酯酶染色鏡檢，油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)T淋巴細(xì)胞，并計(jì)算ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率。

1.4脾與法氏囊相對(duì)重量計(jì)算方法逐羽稱活重，剖殺后取脾和法氏囊并分別稱其濕重，按下列公式計(jì)算脾和法氏囊相對(duì)重量。脾（或法氏囊）相對(duì)重量（‰）=脾（或法氏囊）濕重/試驗(yàn)雞重×1000。

2　結(jié)果

2.1雛雞外周血液ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率結(jié)果B組外周血液ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率明顯上升；B組外周血液ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率于第8 d、12 d、16 d和20 d顯著高于A組（P＜0.05），見表1。

表1　各組不同時(shí)期血液ANAE+T淋巴細(xì)胞百分率（X±SD）

2.2雛雞脾和法氏囊的相對(duì)濕重結(jié)果B組雞脾的相對(duì)濕重顯著高于A組（P＜0.05），B組雞法氏囊的相對(duì)濕重較A組高，但差異不顯著，見表2。

表2　試驗(yàn)雞脾和法氏囊的相對(duì)濕重（X±SD）

淋巴細(xì)胞增殖能力是評(píng)價(jià)機(jī)體細(xì)胞免疫功能的一個(gè)重要指標(biāo)，其增殖能力的高低直接反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平［8］。有研究報(bào)道［9］，注射雞α-干擾素能明顯刺激機(jī)體外周血淋巴細(xì)胞的活性功能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組雞除4日齡T淋巴細(xì)胞百分比與對(duì)照組差異不顯著，其他日齡均差異顯著，與目前主流研究結(jié)果相一致。

胸腺是機(jī)體的免疫器官，能儲(chǔ)存分泌免疫細(xì)胞和免疫分子等；法氏囊是禽的中樞免疫器官，能誘導(dǎo)B細(xì)胞分化和成熟；脾臟的白髓部分參與免疫功能，是免疫應(yīng)答的主要場(chǎng)所［8］。因而，法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)反映了機(jī)體三個(gè)主要免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育程度，是從免疫器官發(fā)育的角度評(píng)價(jià)機(jī)體免疫狀態(tài)的指標(biāo)［10］。試驗(yàn)結(jié)果表明，注射雞α-干擾素組與空白組比對(duì)，試驗(yàn)組雞脾相對(duì)濕重差異顯著，而法氏囊相對(duì)濕重略有提升，但差異不顯著，這與常凱等［9］研究結(jié)果相似。該結(jié)果可能意味著，干擾素對(duì)肉雞機(jī)體免疫器官的影響主要體現(xiàn)在胸腺上，具體需設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。

4　小結(jié)

羅曼雛雞注射ChIFN-α，可改善其免疫功能，提高抗病能力。

［1］Isaacs A，Lindenmann J.Virus Interference I：The Interferon［J］.Proc R Soc B，1957，147：258-273.

［2］吳志光，夏春.雞Ⅱ型干擾素存在亞型［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2001（1）：50-54.

［3］吳志光，夏春，汪明，等.QIAexpress系統(tǒng)高效表達(dá)雞γ-干擾素cDNA的研究［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，7（3）：89-93.

［4］戴建華，秦愛建，許金俊，等.雞γ干擾素基因的克隆及其在原核和真核系統(tǒng)中的表達(dá)［J］.中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2003，25（4）：249-253.

［5］Sekellick M J，F(xiàn)errandino A F，Hopkins D A，et al.Chicken Interferon Gene：Cloning，Expression，and Analysis［J］.Journal of Interferon Research，1994，14（2）：71-79.

［6］Sick C，Schultz U，Staeheli P.A family of genes coding for two serologically distinct chicken interferons.［J］.Journal of Biological Chemistry，1996，271（13）：7635-7639.

［7］李鳳華，林云圣，崔麗，等.家禽基因工程干擾素生物學(xué)作用及其在禽病防治中的應(yīng)用［J］.山東家禽，2004（7）：43-45.

［8］楊漢春.獸醫(yī)免疫學(xué)［M］.3版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2003.［9］常凱，馬鳳龍，單虎.重組雞α-干擾素對(duì)雞免疫功能的影響［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2009，25（14）：15-17.

［10］夏春，吳丹，阮小飛.禽類基因工程重組干擾素研究進(jìn)展［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2003，24（4）：39-41.

Effect of interferon-α on immune function of chicken

Liao Xiuhua
（Three-rural service center of Masha town，Jianyang district，F(xiàn)ujian 354200）

The objective of this experiment was to study the effects of recombinant chicken interferon-α on proliferation of peripheral blood lymphocytes，the immune organ index and cytokine levels of broilers.60 one-day-age healthy AA broilers were divided into two groups randomly which were control group and test groupⅠ.The test groups were injected with interferon 0.5 mL at 1 days age.At the same time，the control group was injected with 0.5 mL PBS only.Results showed that∶the percentage of T ANAE+lymphocytes in peripheral blood and the relative wet weight of chicken spleen were significantly higher than that of normal saline group after the injection of interferon.These results indicated that chicken injection of interferon in a certain range can improve the chicken immune functions.

Interferon-α Chicken Immunity

A

1003-4331（2016）05-0021-02