參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝的保護作用

李　鳳　于曉風　孫偉倫　劉一鳴　付雯雯　張　虹　睢大筼

(吉林大學藥學院藥理教研室，吉林　長春　130021)

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參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝的保護作用

李鳳于曉風孫偉倫劉一鳴付雯雯張虹睢大筼

(吉林大學藥學院藥理教研室，吉林長春130021)

目的觀察參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的保護作用。方法150只雄性Wistar大鼠，取12只作為正常組，其余大鼠制備AFLD模型：1～4 w灌胃給予40%白酒8 g/kg，5～8 w給予50%白酒9 g/kg，9～16 w給予50%白酒10 g/kg。第9周模型大鼠根據(jù)體重隨機分為模型組、參飛顆粒(1、2、4 g/kg)組及陽性藥水飛薊賓(80 mg/kg)組，各組分別灌胃給予相應藥物，正常及模型組給予同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉。給藥8 w后，水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，檢測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性。結(jié)果與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、VLDL、FFA及MDA含量明顯升高，SOD活性降低，AST、ALT活性升高。與模型組比較，參飛顆粒4g/kg劑量組能明顯降低大鼠血清中TC、TG、VLDL、MDA、FFA含量及ALT活性，升高SOD活性。結(jié)論參飛顆粒對大鼠AFLD具有保護作用，其作用機制可能與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、對抗脂質(zhì)過氧化損傷及改善肝功能有關。

參飛顆粒；酒精性脂肪肝；脂質(zhì)代謝；氧化應激

酒精性脂肪肝(AFLD)最初僅表現(xiàn)為脂肪肝，隨著飲酒的繼續(xù)，病情可繼續(xù)發(fā)展為酒精性肝炎、酒精性肝纖維化，以最后形成酒精性肝硬化、肝細胞癌〔1〕。當機體受到酒精的刺激時，脂質(zhì)過多的輸入導致肝臟脂蛋白合成代謝發(fā)生障礙，脂肪酸氧化不足，脂肪就會在肝臟沉積，進而發(fā)生脂肪肝〔2,3〕。參飛顆粒是以人參、黨參、水飛薊及山楂4味中藥組成的復方制劑，經(jīng)處方篩選證實具有保肝、驅(qū)脂及降脂作用。本研究旨在探討參飛顆粒對大鼠AFLD的保護作用。

1　材料和方法

1.1動物雄性Wistar大鼠150只，體重180～220 g，由吉林大學基礎醫(yī)學院動物實驗中心供給，合格證號：SCXK-(吉) 2007-0003。動物飼養(yǎng)于通風動物房內(nèi)，室溫(20±2)℃，自由進食與飲水。

1.2藥品和試劑參飛顆粒由白求恩醫(yī)科大學制藥廠提供，批號：20120523，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液；水飛薊賓膠囊由天津天士力制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號：20120721，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液；總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)測試盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3實驗方法〔4〕150只大鼠適應性飼養(yǎng)1 w，取12只大鼠為正常組，其余大鼠造AFLD模型：第1～4周灌胃給予40%白酒8 g/kg，第5～8周給予50%白酒9 g/kg，第9～16周給予50%白酒10 g/kg〔酒精劑量(g)=乙醇體積(ml)×預配酒精濃度(%)×酒精密度(0.8 g/ml)〕。第9周模型大鼠根據(jù)體重隨機分為模型組、參飛顆粒(1、2、4 g/kg)組及陽性藥水飛薊賓(80 mg/kg)組，各組分別灌胃給予相應藥物，正常及模型組給予同體積0.5%的羧甲基纖維素鈉。給藥8 w后，水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，分離血清，檢測TC、TG、VLDL、FFA、MDA含量及SOD、AST、ALT活性；取部分肝臟制備勻漿，檢測MDA含量及SOD活性。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS10.0軟件行方差分析。

2　結(jié)　果

2.1參飛顆粒對AFLD大鼠脂類代謝的影響與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量均有明顯升高(P<0.05或P<0.01)，與模型組比較，參飛顆粒4 g/kg組及水飛薊賓組均能明顯降低大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量(P<0.05或P<0.01)，參飛顆粒2 g/kg組能明顯降低大鼠血清TG、VLDL及FFA含量(P<0.05)，見表1。

表1　參飛顆粒對AFLD大鼠脂類代謝的影響

與正常組比較:1)P<0.05,2)P<0.01；與模型組比較:3)P<0.05,4)P<0.01；下表同

2.2參飛顆粒對AFLD大鼠自由基的影響與正常組比較，模型組大鼠血清及肝組織MDA含量明顯升高，SOD活性明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，參飛顆粒2、4 g/kg組均能明顯降低大鼠血清及肝組織MDA含量，升高血清及肝組織SOD活性(P<0.05或P<0.01)，見表2。

表2　參飛顆粒對AFLD大鼠自由基的影響

2.3參飛顆粒對AFLD大鼠血清肝酶的影響與正常組比較，模型組AST、ALT活性明顯升高(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較，參飛顆粒2、4 g/kg劑量組及水飛薊賓組均能明顯降低血清中ALT活性(P<0.05或P<0.01)，AST活性有降低趨勢(P>0.05)，見表3。

表3　參飛顆粒對AFLD大鼠血清肝酶的影響

3　討　論

由于長期飲酒導致肝臟損害，進而逐漸形成了AFLD。AFLD發(fā)病機制較為復雜，目前尚不完全清楚，可能與酒精及其代謝產(chǎn)物對肝臟的毒性作用、氧化應激、免疫介導、細胞因子、細胞凋亡、內(nèi)毒素、遺傳多態(tài)性、病毒的疊加作用等多種因素有關〔5～7〕。肝臟是脂類代謝的中心，對脂類的消化、吸收、氧化、分化、轉(zhuǎn)化起著重要作用。乙醇氧化導致的高代謝狀態(tài)使周圍脂肪的動員增加，肝細胞脂肪酸的水平隨著增加，從而造成TG在肝細胞內(nèi)大量積聚而導致肝細胞脂肪病變，使肝臟從脂肪氧化器官變?yōu)閮χ鞴伲罱K導致AFLD形成〔8,9〕。本實驗結(jié)果表明，參飛顆粒能顯著降低血清TC、TG水平，提示參飛顆?？赡苁峭ㄟ^減少脂質(zhì)沉積起到保護AFLD大鼠肝臟的作用。

氧化應激是活性氧(ROS)產(chǎn)物增加和抗氧化失去平衡引起的酒精肝損傷的重要特征〔10〕。氧化應激可增加脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物和細胞因子的釋放，介導AFLD的發(fā)生發(fā)展。本實驗結(jié)果提示酒精可引起體內(nèi)氧化與抗氧化失衡，氧自由基產(chǎn)生增多，從而啟動脂質(zhì)過氧化反應。給予參飛顆粒后，大鼠血清中MDA的含量顯著下降，SOD的活力顯著上升，提示參飛顆?？赡苁峭ㄟ^增強大鼠體內(nèi)清除氧自由基的能力和抗脂質(zhì)過氧化來保護肝細胞，從而防治AFLD。

ALT及AST酶學指標能反映肝細胞壞死的程度，直接關系到AFLD的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸〔11〕。本實驗提示參飛顆粒對肝功能具有改善作用，對大鼠AFLD具有保護作用，其作用機制可能與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、對抗脂質(zhì)過氧化損傷及改善肝功能有關。

1Duggan AE,Duggan JM.Alcoholic liver disease-assessment and management〔J〕.Aust Fam Physician,2011;40(8):590-3.

2Dugum M,McCullough A.Diagnosis and management of alcoholic liver disease〔J〕.J Clin Transl Hepatol,2015;28;3(2):109-16.

3Rocco A,Compare D,Angrisani D,etal.Alcoholic disease:liver and beyond〔J〕.World J Gastroenterol,2014;20(40):14652-9.

4李才.人類疾病動物模型的復制〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社,2008:266-8.

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9Seth D,Hogg PJ,Gorrell MD,etal.Direct effects of alcohol on hepatic fibrinolytic balance:implications for alcoholic liver disease〔J〕.J Hepatol,2008;48(4):614-27.

10曾民德.脂肪性肝病的氧應激及其治療對策〔J〕.國外醫(yī)學·消化系疾病分冊，2005;25(5):263-6.

11Fernandez M,Trépo E,Degré D,etal.Transient elastography using Fibroscan is the most reliable noninvasive method for the diagnosis of advanced fibrosis and cirrhosis in alcoholic liver disease〔J〕.Eur J Gastroenterol Hepatol,2015;27(9):1074-9.

〔2016-03-11修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

吉林省科技發(fā)展計劃項目(No.20130727003YY)

睢大筼(1957-)，男，教授，博士生導師，主要從事心血管藥理學研究。

李鳳(1987-)，女，醫(yī)學碩士，主要從事心血管藥理學研究。

R-322

A

1005-9202(2016)15-3642-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.15.014