質譜技術在診斷急淋中樞神經系統白血病中的應用研究

田文洪，王曉燕，莫志芳，蔡艷霞

（深圳市福田區人民醫院血液科，廣東 深圳 518033）

質譜技術在診斷急淋中樞神經系統白血病中的應用研究

田文洪，王曉燕，莫志芳，蔡艷霞

（深圳市福田區人民醫院血液科，廣東 深圳 518033）

目的 研究質譜技術在診斷急淋中樞神經系統白血病中的應用價值。方法 選取我院2015年1月～12月收治的急性淋巴白細胞（ALL）患者20例作為研究對象，及健康體檢者10名為研究對象，應用SELDI-TOF-MS質譜技術檢測其腦脊液建立蛋白質指紋模型圖，并分析差異蛋白。結果 與對照組比較，單純ALL組發現有8個差異顯著的蛋白峰，差異有統計學意義（P＜0.05）；與單純ALL組比較，ALL合并CNSL組發現有11個差異顯著的蛋白峰，差異有統計學意義（P＜0.05）。對差異蛋白建立決策樹模型，用此模型診斷ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特異性為91.30%（21/23）。結論 應用SELDI-TOF-MS質譜技術建立急淋中樞神經系統白血病患者腦脊液蛋白質指紋模型圖，發現差異蛋白，有助于疾病診斷。

急淋中樞神經系統白血病；質譜技術；蛋白質指紋圖譜；診斷

研究表明［1］，中樞神經系統白血病（CNSL）是ALL復發的主要根源之一，因此，早期診斷CNSL，并及早給予干預措施有助于改善患者預后。隨著蛋白質組學的發展，采用現代先進科學儀器，如質譜，發現一些與腫瘤的惡性轉化、細胞增殖、抑制凋亡等相關的蛋白在病理狀態下會出現異常，對疾病診斷及預后判斷具有重要價值。本文以此為背景，研究質譜技術在診斷急淋中樞神經系統白血病中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年1月～12月收治的ALL患者20例作為研究對象，根據是否合并CNSL分為兩組：單純ALL組13例，男8例，女5例，年齡29～58歲，平均年齡（39.5±7.06）歲；ALL合并CNSL組7例，男4例，女3例，年齡31～54歲，平均年齡（41.1±6.42）歲。所有患者均符合WHO制定的診斷標準，并經骨髓形態學、免疫組化等檢查確診。同期接收的腦脊液及生化檢查無異常的健康體檢者10名為對照組，男6名，女4名，年齡30～60歲，平均年齡（40.8±7.47）歲。三組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 標本采集及檢測方法

腰椎穿刺抽取腦脊液標本，3000 r/min離心處理10 min，取上清液，置于-20℃冰箱內保存。取腦脊液標本，冰浴解凍后與等體積U9裂解液充分混勻。將處理好的樣品加入到弱陽離子交換型蛋白質芯片（WCX2，Ciphergen Biosystems 公司）的每一個孔中。置于振蕩器中反復震蕩沖洗后，吹干。使用Protein Chip Biology System（PBSò-c）質譜儀進行測定。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件對數據進行分析處理，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

與對照組比較，單純ALL組發現有8個差異顯著的蛋白峰，差異有統計學意（P＜0.05）；與單純ALL組比較，ALL合并CNSL組發現有11個差異顯著的蛋白峰，差異有統計學意（P＜0.05）。見表1。對差異蛋白建立決策樹模型，用此模型診斷ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特異性為91.30%（21/23）。

表1 不同組別之間蛋白質峰比較（±s）

表1 不同組別之間蛋白質峰比較（±s）

注：與單純ALL組比較，#P＜0.05

M/Z單純ALL組（n=13）ALL合并CNSL組（n=7）對照組（n=10）P 5903.20213.52±3.452.09±0.86#39.76±6.84#0.000 2217.3365.81±1.693.46±1.12#7.98±2.03#0.029 6436.6667.03±2.472.51±0.63#12.50±4.72#0.004 4306.7895.38±1.1613.49±4.67#1.27±0.65#0.000 10252.581.19±0.450.34±0.12#3.48±0.87#0.013 7771.52618.64±4.938.97±3.42#49.08±12.64#0.000 2018.0904.92±1.121.34±0.74#5.56±0.930.007 11660.208.93±3.0214.80±5.69#4.39±2.84#0.000 2956.2014.56±1.901.24±0.41#4.78±0.960.005 9351.7795.45±1.291.78±0.42#9.47±2.80#0.000 2194.8826.41±1.623.06±1.38#6.82±1.750.010

3 討 論

白血病是造血干細胞惡性克隆的白血病細胞增殖失控、在骨髓或者其他造血組織中大量累積、浸潤，抑制正常造血細胞功能的一種惡性克隆性血液系統疾病，任何年齡均可發病，ALL是最常見的成人急性白血病之一，據統計［2］，其在我國人群中的發病率高達5～6/10萬人次。隨著白血病發病機制研究的深入，化療方案可以最大限度的殺滅體內白血病細胞，對于無高危因素存在的ALL患者有效率可高達70%［3］。但是對于存在高危因素的患者，如ALL患者合并CNSL時，會導致病情進展加快、髓外浸潤范圍廣等，化療方案治療有效率不足50%，患者死亡率高。目前，除根據患者腦脊液常規細胞學涂片法結果外，因該病缺乏靈敏的實驗室數據檢測指標，導致對CNSL的早期診斷造成一定的困難。

本文研究表明，應用SELDI-TOF-MS質譜技術檢測急淋中樞神經系統白血病腦脊液建立蛋白質指紋模型圖，與單純ALL組比較，ALL合并CNSL組發現有11個差異顯著的蛋白峰，差異有統計學意義（P＜0.05），為ALL合并CNSL診斷有積極的臨床意義。但是本研究中，對差異蛋白建立決策樹模型，用此模型診斷ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特異性為91.30%（21/23），低于文獻報道［4］，可能與本研究納入例數較少有關。

綜上所述，應用SELDI-TOF-MS質譜技術建立急淋中樞神經系統白血病患者腦脊液蛋白質指紋模型圖，發現差異蛋白，有助于疾病診斷。

［1］ Patel JP，G6nen M，Figueroa ME，et a1.Prognostic relevance of integrated genetic profi ling in acute myeloid leukemia［J］.N Engl J Med，2012，366（12）:1079-1089.

［2］ 劉育欣，王婷婷，肖玉玲，等.不同臨床分類的急性白血病患者病原學數據分析［J］.現代預防醫學，2016，43（10）:185-187，192.

［3］ 趙 玥，孫雪靜，萬歲桂，等.急性髓系白血病細胞免疫表型與疾病復發的關系［J］.白血病，淋巴瘤，2011，20（5）:307-309.

［4］ 何愛麗，白 菊，黃 辰.等.急性髓系白血病血清標志物初步篩選及臨床意義［J］.中國實驗血液學雜志，2010，18（5）:1132-1137.

本文編輯：劉帥帥

項目類別：非資助【2013年度深圳市科技計劃項目（醫療衛生類）】

項目編號：201303157

項目名稱：質譜技術在診斷急淋中樞神經系統白血病中的應用研究

R733.7

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ISSN.2095-6681.2016.16.125.02