下生殖道感染與陰道局部免疫的關系*

西電集團醫院婦產科(西安 710077)

何淑瑩 賈小文 楊 蕾

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下生殖道感染與陰道局部免疫的關系*

西電集團醫院婦產科(西安 710077)

何淑瑩 賈小文 楊 蕾

目的:探討Th1細胞因子干擾素-γ( IFN-γ)、白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-12(IL-12) 和Th2細胞因子白細胞介素-4(IL-4)、白細胞介素-10(IL-10)在細菌性陰道病(BV)和外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)患者陰道局部的表達情況及其檢測的臨床意義。方法:選擇BV患者、VVC患者和健康女性(對照組)各 30例，用ELISA 方法檢測3組對象陰道后穹隆灌洗液中的細胞因子的含量。結果:BV組和VVC組患者陰道灌洗液Th1細胞因子IFN-γ、 IL-2、IL-12 值明顯低于對照組(P<0.05)；VVC組IL-2和 IL-12值明顯低于BV組(P<0.05)。結論:BV和VVC患者陰道局部Th1細胞因子減少,Th1/Th2失衡,陰道局部免疫功能下降,病原微生物易于繁殖而發生BV、VVC等下生殖道感染性疾病。

近年來對于下生殖道感染與陰道局部免疫的研究逐漸成為熱點,細菌性陰道病(BV)和外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)是臨床上最常見的下生殖道感染疾病,但是目前準確的發病機制還不清楚[1]。本研究通過檢測BV 和VVC患者陰道局部Th1細胞因子干擾素-γ( IFN-γ)、白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-12(IL-12) 和Th2細胞因子白細胞介素-4(IL-4)、白細胞介素-10(IL-10)的含量,探討陰道局部免疫在下生殖道感染發病機制中的作用。

資料與方法

1 一般資料 將2014年8～11月在我院婦產科門診就診的下生殖道感染患者及健康體檢結果陰道菌群正常的婦女(年齡20～45歲)作為研究對象，根據陰道分泌物微生態檢測結果分為BV組、VVC組和對照組，每組各30例。BV組診斷標準：陰道分泌物微生態檢測Nugent評分≥7分；VVC組診斷標準：革蘭染色檢查找到假絲酵母菌的芽生孢子或假菌絲。對照組：Nugent 評分≤3 分,密集度Ⅱ～Ⅲ級,多樣性Ⅱ～Ⅲ級,優勢菌為革蘭陽性大桿菌G+b(L),炎性反應白細胞0～5個/高倍視野,pH值<4.5,H2O2(+)。排除標準：3 d內有性生活、有陰道沖洗或陰道放藥者；混合性陰道炎；3個月內服用性激素者；妊娠期及哺乳期婦女；患肝、腎等器質性疾病者；糖尿病、血液病患者；長期使用抗生素、類固醇制劑者；正在參加其他藥物臨床試驗者。

2 方 法 標本采集:一次性窺器充分暴露陰道,灌洗陰道上段注入5 ml生理鹽水,停留15 s后，再抽出4 ml，加標簽后隨即放入-30℃冰箱保存,以備檢測免疫因子含量。試劑及檢測:試劑采用人IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4、IL-10 EILSA試劑盒(上海信裕生物科技有限公司)。進行檢測前將所有標本取出,放在室溫下緩慢融解后,于離心機上3000r/min離心5 min,取上清液用于ELISA法檢測。所有操作步驟按試劑盒說明書進行,測量吸光度(OD值),根據標準品濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，然后將待測樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即得出樣品的實際濃度。

結 果

3組細胞因子水平比較：見附表。

附表 3組細胞因子水平比較(pg/ml)

注：與對照組比較,△P<0.05；與BV組比較,*P<0.05

BV和VVC兩組的Th1細胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12值均明顯低于對照組(P<0.05)；而兩組Th2細胞因子IL-4值略高于對照組,IL-10值略低于對照組,但差異均無統計學意義(P>0.05)。BV組和VVC組兩組比較：VVC組IL-2、IL-12值明顯低于BV組(P<0.05)；VVC組IFN-γ值略高于BV組,IL-4、IL-10值略低于BV組,差異均無統計學意義(P>0.05)。

討 論

女性生殖道固有的免疫系統是抵御病原體的第一道屏障，包括完整的陰道黏膜上皮及其表面的黏液層組成的物理屏障,酸堿性、補體系統、固有免疫系統的細胞及生殖道中的抗微生物因子。女性下生殖道是一個極其復雜的黏膜微環境,其結構性組織細胞、局部免疫細胞和寄居于陰道的微生物相互作用,并受多種因素的精確調節(尤其是性激素)[2]。下生殖道微生物的感染造成黏膜炎癥反應,局部細胞因子在免疫反應中起著重要的作用并與局部炎癥的發生息息相關。近年來研究認為,陰道感染與細胞介導的免疫狀態有關[3]。眾多研究均認為,下生殖道感染與Th1/ Th2 失衡有關,但眾研究結果中陰道局部Th1和Th2各細胞因子的變化不盡相同[4-6],可能與標本采集方式或樣本量少有關。本研究探討在感染狀態下,陰道局部細胞免疫功能發生的變化,結果顯示,BV和VVC兩組的Th1細胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12值均明顯低于對照組(P<0.05)；而BV和VVC兩組Th2細胞因子IL-4、IL-10值與對照組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。

按免疫調節作用將T 淋巴輔助細胞分泌的細胞因子分為 Th1 和Th2 兩類[3]。Th1細胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-12等,Th2細胞分泌IL-4、IL-10等。Th細胞分泌的細胞因子不僅決定了每個亞群的免疫效應功能,還調控整個亞群的形成和擴增[7]。Th1細胞的主要效應功能是增強吞噬細胞介導的抗感染免疫,特別是抗胞內病原體的感染[7]。IL-2 是 Th1 細胞的代表細胞因子,反映了機體的細胞免疫功能[8]。IFN-γ活化吞噬細胞,增強其殺傷已被吞噬的病原體的能力。IFN-γ還能促進IgG生成,IgG可通過調理作用和激活補體系統促進吞噬細胞的吞噬和殺傷功能[7]。IL-12刺激活化的T細胞和NK細胞的增值,增加其細胞毒作用,促進IFN-γ等細胞因子的產生；IFN-γ能促使T細胞向Th1細胞分化。IL-12 在感染性疾病發生、發展中也具有重要作用, IL-12 已成為機體抵御細菌及胞內寄生蟲感染必不可少的因子[9]。Th2 細胞分泌 IL-4、IL-10 等細胞因子可促進B 細胞的增值、分化和抗體形成,主要作用是誘導和促進 B 細胞介導的體液免疫應答[7]。IL-4主要由T細胞產生,能促進Th0細胞向Th2細胞的分化，抑制其向Th1分化。IL-10 主要生物學功能是限制和終止炎癥反應,調控免疫細胞的分化和增殖[10]。在BV及VVC狀態下陰道局部Th1細胞因子IL-2、IFN-γ、IL-12濃度下降,提示Th1介導陰道局部細胞免疫受到抑制，陰道活化及產生細胞因子的能力減弱，活化吞噬細胞的能力降低,使得其殺傷已被吞噬的病原體的能力減弱，機體細胞免疫功能低下,病原微生物易于在下生殖道繁殖,致使產生炎癥反應。而陰道局部Th2細胞因子IL-4、IL-12無明顯變化，提示Th2介導體液免疫與下生殖道感染關系不明顯。本研究還顯示，VVC組Th1細胞因子IL-2、IFN-γ、IL-12濃度明顯低于BV組,提示VVC患者陰道局部免疫功能受抑制更為明顯。

綜上所述,BV、 VVC等下生殖道感染的發生與陰道局部免疫功能紊亂密切相關,Th1細胞因子減少,Th2細胞因子無明顯變化,破壞了Th1/ Th2原有的平衡,機體免疫下降,病原微生物繁殖而發病。因此,積極改善陰道局部免疫狀態,維護陰道微生態和免疫功能的正常,對預防和治療下生殖道感染疾病有重要意義。

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(收稿：2016-04-27)

*西安市衛生局科研項目(2013056)

生殖道感染 陰道 細胞因子類

R711.31

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.009