血清Leptin、SFRP5、RBP4與冠心病的相關性分析

李瑤瑤，董文鵬，陸 華，童 光，王曉武，馬 濤，張衛達

血清Leptin、SFRP5、RBP4與冠心病的相關性分析

李瑤瑤1，2，董文鵬2，陸 華2，童 光2，王曉武2，馬 濤2，張衛達1，2

目的 探討血清中瘦素（Leptin）、分泌型卷曲相關蛋白5（SFRP5）和視黃醇結合單核蛋白4（RBP4）表達水平與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（CAD）的關系。方法 選取71例懷疑為CAD的患者，根據心電圖、冠脈造影等分為CAD組和非CAD組，收集患者臨床資料，并用ELISA法分別測定血清Leptin、SFRP5、RBP4的表達水平，將Leptin、SFRP5、RBP4表達水平與CAD患者臨床資料進行相關性分析。結果 CAD組血清SFRP5水平明顯低于非CAD組（P＜0.05），Gensini積分與血清SFRP5水平呈負相關性（r=-0.20，P=0.01）；CAD組Leptin水平高于非CAD組，差異有統計學意義（P＜0.05），血清RBP4水平在CAD組和非CAD之間差異無統計學意義。結論 Leptin、SFRP5表達水平的變化可能是CAD發生、發展的機制之一，可以作為預防、評估和治療CAD的一個新靶點。

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病；脂肪細胞分泌因子；瘦素；分泌型卷曲相關蛋白5

脂肪細胞不僅能夠儲存能量，而且能夠合成和分泌多種細胞因子，這些細胞因子統稱為脂肪細胞分泌因子，包括瘦素（Leptin）、脂聯素、抵抗素、內膜素等。既往研究［1-4］表明，脂肪細胞分泌因子與代謝紊亂或動脈粥樣硬化（atherosclerotic，AS）相關。分泌型卷曲相關蛋白5（secreted frizzled-related protein 5，SFRP5）、視黃醇結合單核蛋白4（retinol binding protein，RBP4）和Leptin均為脂肪細胞分泌因子，但SFRP5、RBP4和Leptin與中國冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（coronary atherosclerotic heart disease，CAD）患者的相關性目前尚較少研究。該研究擬選取CAD患者血清標本，檢測SFRP5、RBP4和Leptin的表達水平，并分析其與CAD的相關性，旨在為CAD的發病機制和臨床治療提供依據。

1 材料與方法

1.1 病例資料 收集2014年5月～2015年5月在廣州軍區廣州總醫院心臟中心71例行冠狀動脈造影患者（年齡39～80歲）的臨床資料，排除既往有冠脈干預手段或冠脈旁路移植手術。此外，慢性透析、急性冠脈綜合征、近期心肌梗死（4周內）、炎性疾病如膠原性疾病、嚴重感染性疾病和惡性疾病等也排除。根據患者臨床表現、心電圖及冠狀動脈造影等臨床癥狀把受試者分成兩組：心電圖檢查結果陽性、冠狀動脈計算機斷層成像血管造影主要血管狹窄≥50%者為病例組（CAD組）（53例）；對照組（非CAD組）為冠狀動脈造影/冠狀動脈計算機斷層成像血管造影的檢查結果為無病變或輕微病變者（18例）。

1.2 冠脈造影的評分 冠脈造影結果由至少兩位高年資心內科醫師評估并報告。使用兩套評估標準：①根據左主干、左前降支、左回旋支、右冠狹窄≥50%的病變血管的數目得分為0～3，若左主干狹窄≥50%，記錄為多支血管病變；②Gensini評分：首先根據冠脈狹窄程度確定基本評分，狹窄?＜25%記1分，≥25%～＜50%記2分，≥50%～＜75%記4分，≥75%～＜90%記8分，≥90%～＜99%記16分，99%～100%記32分，再根據不同冠脈分支確定相應的系數，分別為：左主干（LM）病變×5；左前降支（LAD）：近段×2.5，中段×1.5，遠段×1；對角支：D1×1，D2×0.5；左回旋支（LCX）：近段×2.5，鈍緣支×1，遠段×1，后降支×1，后側支× 0.5；右冠狀動脈（RCA）：近、中、遠和后降支均×1，每處病變的積分為狹窄程度乘以病變部位系數。

1.3 ELISA法 采集患者清晨空腹靜脈血4 ml，離心取上清液以Eppendorf管分裝為4管，置-80℃超低溫冰箱中保存待測，該研究中SFRP5、RBP4、Leptin試劑盒均購自美國RayBio公司，并嚴格按照試劑盒說明書進行操作，

1.4 統計學處理 采用SPSS 20.0軟件進行分析，計量資料以±s表示，兩組之間差異比較使用t檢驗或Manne Whitney U檢驗。計數資料用頻率表示，組間比較使用χ2檢驗；采用單因素或者多因素logistic回歸分析評價各變量與合并CAD之間的相關性。

2 結果

2.1 兩組基線資料比較 CAD組和非CAD組在年齡、性別、高血壓、血脂異常、糖尿病、吸煙狀態、藥物等差異均無統計學意義（表1）。CAD組血清SFRP5的水平低于非CAD組；CAD組Leptin水平高于非CAD組；兩組間RBP4水平差異無統計學意義（表1）。多支血管病變［37例，（23.3±14.8）ng/ ml］中SFRP5水平明顯低于單支血管病變［16例，（30.6±17.7）ng/ml］，Leptin水平在多支血管病變中明顯高于單支血管病變［（27.6±13.7）pg/ml vs（18.8±10.1）pg/ml］，RBP4水平與血管病變數量無顯著相關性（P＞0.05）。Gensini積分可反映CAD的嚴重程度，與血清SFRP5水平呈負相關性，與Leptin呈正相關性（r=-0.20，P=0.01；r= 0.26，P＜0.01）。

2.2 疾病狀態或使用藥物狀態下的SFRP5、RBP4、Leptin水平 血清SFRP5水平在年齡、高血壓、糖尿病、血脂異常、吸煙史等差異沒有統計學意義，但在性別間差異有統計學意義，男性SFRP5水平低于女性（t=2.775，P＜0.05）；血清Leptin水平在年齡＞65歲組中高于年齡≤65歲組，差異有統計學意義（t=-2.532，P=0.02），Leptin水平在性別間差異也有統計學意義，女性Leptin水平高于男性（t=2.087，P=0.01），在高血壓、糖尿病、血脂異常、吸煙和使用藥物方面差異沒有統計學意義（表2）；血清RBP4水平在年齡、性別、高血壓、糖尿病、血脂異常和藥物方面差異均無統計學意義。見表2。

2.3 相關危險因素的Logistics回歸分析 低血清SFRP5、高血清Leptin水平均是CAD的獨立危險因子（P＜0.05），見表3。在使用藥物方面，血清SFRP5水平和使用利尿劑相關，差異有統計學意義（P=0.03），但與血管緊張素轉換酶抑制劑/血管緊張素受體阻斷劑（ACEI/ARBS）、胰島素或他汀類降脂等藥物差異無統計學意義。

3 討論

3.1 Leptin與CAD的關系 既往實驗研究［5-6］顯示，抑制Leptin表達能夠抑制小鼠動脈粥樣硬化的發展，而促進Leptin表達則增加小鼠動脈粥樣硬化的幾率。本研究顯示CAD患者的Leptin水平高于非CAD患者，表明Leptin水平升高與CAD相關。此外，Leptin水平在多支血管病變中的水平高于單支血管病變，表明Leptin水平一定程度上反映了CAD的嚴重程度，其水平升高促進了CAD的發生發展。本研究顯示，Leptin水平在男、女間存在顯著差異，女性Leptin水平高于男性，表明女性可能比男性有更高的CAD發生風險。但先前的研究［7］表明，Leptin的濃度與性別不存在相關關系。因此，Leptin與性別之間是否存在相關性，仍需進一步大樣本量研究。

表1 CAD組和非CAD組基線資料比較

表2 冠脈造影時的疾病狀態或藥物下的SFRP5、RBP4、Leptin水平±s）

表2 冠脈造影時的疾病狀態或藥物下的SFRP5、RBP4、Leptin水平±s）

*P＜0.05

項目SFRP5（ng/ml）是否t值RBP4（mg/ml）是否t值Leptin（pg/ml）是否t值年齡（＞65歲）29.4±18.024.9±14.2-1.36311.4±3.211.5±3.10.93425.4±13.717.5±11.1-2.532*男性23.8±13.436.5±19.72.775*11.2±2.912.6±3.51.59818.3±12.127.9±11.92.087*高血壓25.0±14.129.3±18.20.86511.6±3.311.2±2.6-0.41121.8±12.617.3±12.3-1.643糖尿病24.8±15.226.9±15.90.51611.7±2.711.4±3.2-0.37423.4±13.219.6±12.5-1.229血脂異常20.5±12.127.6±16.10.97511.2±3.911.5±2.90.34920.3±13.420.3±12.60.165吸煙史23.7±12.830.7±18.71.99811.3±3.011.7±3.30.49017.9±11.424.0±13.71.916 ACEI/ARBs23.7±14.825.1±15.30.94711.8±2.511.6±3.0-0.04318.7±11.221.9±12.5-1.087他汀類26.1±15.325.0±12.31.06311.1±3.311.3±2.6-0.24222.5±12.624.2±11.3-0.245利尿藥29.8±16.521.5±14.21.51711.5±2.812.0±3.1-0.24720.6±12.718.2±11.2-1.097

表3 與CAD相關危險因素的Logistics回歸分析

3.2 SFRP5與CAD的關系 Bhatt et al［8］發現在小鼠和人的動脈粥樣硬化斑塊中均檢測到Wnt5a高表達。SFRP5-2005年研究者利用基因芯片鑒定出的一種新的脂肪細胞分泌因子，動物實驗研究［9-10］表明，SFRP5可通過抑制Wnt5a阻斷巨噬細胞或脂肪細胞產生炎癥介質。此外，本研究顯示，SFRP5水平與CAD病變嚴重程度呈負相關性，CAD患者血清SFRP5水平低于非CAD患者，多支血管病變的血漿SFRP5水平低于單支血管病變。Miyoshi et al［11］檢測185例受試者（128例CAD、57例非CAD）的SFRP5水平，發現CAD組血清SFRP5水平高于非CAD組，而且血清SFRP5水平和超敏C反應蛋白（hs-CRP）水平呈負相關性，這支持SFRP5有抗炎作用，本研究與既往研究結果相符，本研究顯示SFRP5水平在性別間差異有統計學意義，男性血清SFRP5水平低于女性（P＜0.01），但既往研究［11］顯示男、女差異無統計學意義。盡管SFRP5水平可能會被肥胖影響，但在本研究中，CAD組和非CAD組的體質指數之間差異無統計學意義，多因素Logistics回歸分析表明血清SFRP5水平和CAD獨立相關。此外，本研究顯示SFRP5水平和藥物之間的關系，使用利尿劑可能會增加SFRP5水平，但其影響機制尚未完全清楚。

3.3 RBP4與CAD的關系 既往研究［12-13］表明，RBP4可能通過干擾糖、脂質代謝，從而促進炎癥的發生，并在進一步的研究中證實，RBP4水平升高可能和胰島素抵抗、肥胖、動脈粥樣硬化相關。但關于RBP4在頸動脈和冠狀動脈粥樣硬化中的作用仍無明確結論［14-15］。本研究顯示RBP4水平在CAD組和非CAD組間差異無統計學意義，說明RBP4水平的變化與CAD的發生、發展無關。此外，RBP4水平與CAD的其它危險因素如吸煙、血脂異常等差異也無統計學意義，表明RBP4不影響CAD危險因子的作用。

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Correlation analysis between serum Leptin，
SFRP5 and RBP4 levels and coronary heart disease

Li Yaoyao1，2，Dong Wenpeng2，Lu Hua2，et al
（1Faculty of Graduate Studies，Southern Medical University，Guangzhou 510515；2Dept of Cardiovascular Surgery，General Hospital of Guangzhou Military Command，Guangzhou 510010）

Objective To investigate the relationship between serum Leptin，SFRP5 and RBP4 expression levels and coronary atherosclerotic heart disease（CAD）.Methods 71 patients suspected for CAD were included in the study and were divided into CAD and non-CAD group according to electrocardiogram and coronary angiography results.Serum Leptin，SFRP5 and RBP4 levels were examined using ELISA.Correlations of Leptin，SFRP5 and RBP4 expression levels and patients dermography such as CAD were analysed.Results Serum SFRP5 level in CAD group was significantly lower than in non-CAD group（P＜0.05）.Serum SFRP5 level was negatively correlated with Gensini score（r=-0.20，P=0.01）.In CAD group，serum Leptin level increased significantly compared with non-CAD group（P＜0.05）.There was no significant difference for serum RBP4 levels between CAD and non-CAD group.Conclusion The expression levels of Leptin，SFRP5 may be one of the mechanisms of initiation，development of CAD，which can be used as a new target for the prevention，assessment and treatment of CAD.

coronary artery disease；adipokines；Leptin；secreted frizzled-related protein 5

R 541.4

A

1000-1492（2016）08-1160-04

時間：2016-6-22 14：44：58

http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160622.1444.038.html

2016-05-29 接收

國家自然科學基金青年基金項目（編號：81500183、81200633）

1南方醫科大學研究生學院，廣州 510515

2廣州軍區廣州總醫院心血管外科，廣州 510000

李瑤瑤，女，碩士研究生；

張衛達，男，主任醫師，博士生導師，責任作者，E-mail：18819140974@163.com