兒童肺炎支原體的3種檢測方法對比分析與臨床檢驗學研究

尚曉東劉曉華宋明艷孫 贊

（1 遼寧省遼陽市康復醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；2 遼寧省遼陽市中心醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；3 遼寧省人民醫院檢驗科，遼寧 沈陽 110016）

兒童肺炎支原體的3種檢測方法對比分析與臨床檢驗學研究

尚曉東1劉曉華2宋明艷2孫 贊3

（1 遼寧省遼陽市康復醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；2 遼寧省遼陽市中心醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；3 遼寧省人民醫院檢驗科，遼寧 沈陽 110016）

目的 研究分析兒童肺炎支原體的3種檢測方法對比分析與臨床意義。方法 將360例肺炎支原體患兒的咽拭子和血清標本，分別采用熒光定量PCR法、快速培養法和血清抗體法進行檢驗，比較3種方法的陽性檢出率，進行回顧性對比分析。結果 熒光定量PCR法檢出94例陽性患兒，陽性率為26.11%，快速培養法檢出98例陽性患兒，陽性率為27.22%，血清抗體法檢出60例陽性患兒，陽性率為16.67%。熒光定量PCR法和快速培養法的陽性率顯著高于血清抗體法，差異具有統計學意義（P＜0.05）；熒光定量PCR法和快速培養法的陽性率比較不具有較大差異（P＞0.05）。結論 熒光定量PCR法和快速培養法均能夠有效的檢出肺炎支原體，值得在臨床上推廣應用。

熒光定量PCR法；快速培養法；血清抗體法；肺炎支原體；兒童；對比分析

肺炎支原體是臨床上患者支原體肺炎的病原體，它是能夠引起患者呼吸道感染的通過唾沫飛濺從而進行傳播的介于細菌和病毒之間的一類微生物。支原體肺炎的主要發病人群是青少年，發病季節以秋冬多見［1-2］。患者的臨床癥狀大部分表現為陣發性的刺激性的咳嗽、頭痛、發熱、咽喉痛等。肺炎支原體不僅能夠引起一般的肺炎，還能夠引發較嚴重的雙側肺炎以及其他的并發癥，嚴重危害著患者的身體健康［3-4］。目前臨床上對于肺炎支原體的檢測主要有熒光定量PCR法、快速培養法和血清抗體法等方法，它們的特異性和敏感性都有差異。本院就探討分析3種方法檢測兒童肺炎支原體的臨床應用與科研課題展開研究，取得了令人滿意的成果，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：隨機抽取在2013年1月至2015年10月來本院治療肺炎支原體的360例患者，男202例，女158例，年齡為4個月～13歲，平均年齡為4.3歲。這些患兒的臨床癥狀表現為：發熱、頭痛、咽喉發炎疼痛、氣喘。患兒在進入醫院后用一次性的咽拭子取兩份標本，并且抽取3 mL的靜脈血。

1.2儀器和試劑：①熒光定量PCR：中山大學達安基因股份有限公司生產的肺炎支原體核酸定量檢測試劑盒，PCR擴增儀：LightCyler基因擴增儀（羅氏公司生產）。②快速培養法：培養基取自武漢菁華時間科技有限公司生產的肺炎支原體快檢試劑盒。③血清抗體法：濰坊市康華生物技術有限公司生產的肺炎支原體IgM抗體檢測試劑盒。

1.3方法：①熒光定量PCR：選取一份咽拭子標本根據儀器上的說明進行操作。②快速培養法：選取一份咽拭子標本，將它接種到液體培養基中，然后將咽拭子放到瓶子中，瓶子外的東西舍去，在37 ℃下培養大約6 h。③血清抗體法：將抽取的患者的3 mL血液在3000 r/min下離心10 min，分離出血清，根據說明書的指示進行MP-IgM的檢測。

1.4檢測標準：①熒光定量PCR：咽拭子標本的MP-DNA含量≥5.0× 106基因拷貝，那標本即為陽性結果。②快速培養法：如果經過接種后獲得的液體由紅色轉變為澄清的黃色，結果即為陽性。③血清抗體法：在操作3 min后，陽性結果即為出現2個斑點，1個即為陰性結果，但是若沒有斑點出現，則需要重新檢測，操作可能存在失誤或者是不規范的地方。

1.5統計學處理：研究中的基本的數據都采用SPSS13.0軟件進行統計處理。計量的資料運用（）表示；利用t檢驗；計數資料以χ2進行檢驗，計數資料以率（%）表示。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2　結 果

熒光定量PCR法共檢出94例陽性患兒，陽性率為26.11%，快速培養法共檢出98例陽性患兒，陽性率為27.22%，血清抗體法共檢出60例陽性患兒，陽性率為16.67%。熒光定量PCR法和快速培養法的陽性率顯著高于血清抗體法，差異具有統計學意義（P＜0.05）；熒光定量PCR法和快速培養法的陽性率比較不具有較大差異（P＞0.05）。見表1。

表1　3種方法檢測肺炎支原體的陽性檢出率情況比較［n（%）］

3　討 論

肺炎支原體肺炎的大部分發病人群是兒童，他們的身體免疫機制還沒有發育成熟，抵抗外界病毒和細菌的能力比較弱，所以在感染了肺炎支原體后，病情一般不容易控制，反復發作，給治療帶來困難［5-6］。所以及早的檢測出肺炎支原體是早期預防和治療的關鍵，目前臨床上主要的檢測方案都存在著敏感度低，耗時比較長的缺點，限制了臨床應用。

本院就對熒光定量PCR法、快速培養法以及血清抗體法這3種方法對肺炎支原體的陽性檢出率進行比較分析，結果顯示熒光定量PCR法、快速培養法以及血清抗體法的陽性率分別為26.11%、27.22%、16.67%。從結果中我們可以發現熒光定量PCR法和快速培養法的陽性率顯著高于血清抗體法，差異具有統計學意義；熒光定量PCR法和快速培養法的陽性率相近。所以在臨床上運用熒光定量PCR法和快速培養法是比較有效的，而且快速培養法的成本比較低。對于血清抗體法檢測值最低的原因可能與患兒的病程有關，當肺炎支原體感染了1周后IgM值顯著升高，4周時達到最大值，之后就緩慢的下降，如果患兒是在4周以后入院治療的，則會導致血清抗體法檢測率較低［7-8］。但是總體來看，3種方法對肺炎支原體的檢測陽性率都不是很高，這可能與它們對病毒的敏感性不高有關［9-10］。

綜上所述，在對患兒進行肺炎支原體檢測的時候，醫院要根據實際情況選擇適當的方法，PCR法對儀器和操作的要求比較高，容易造成失誤，從而影響檢測結果，而快速培養法是一種價格低廉，操作方便的方法，是比較適用在醫院進行實際操作的，能夠滿足臨床要求，而且檢測陽性率在同類比較下是較高的，值得推廣使用。

［1］龍洋，邊彤，師帥.兒童肺炎支原體的三種檢測方法比較分析與臨床檢驗學研究［J］.中華醫學檢驗雜志，2015，38（2）：99-100.

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［3］湯瑩成，汪娘子，洋雙媛.兒童肺炎支原體的檢測方法對比分析與檢驗學研究［J］.中國衛生檢驗雜志，2015，25（8）：16-18.

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［5］陳宜.肺炎支原體的檢測方法的比較分析［J］.檢驗醫學與臨床，2015，12（16）：2002-2003.

［6］周新.檢驗醫學指南［M］.武漢：湖北科學技術出版社，2008：403-409.

［7］廖春盛，戴曉波，劉建軍，等.呼吸道感染患者肺炎支原體檢測的臨床意義［J］.國際檢驗醫學雜志，2015，36（13）：1474-1477.

［8］白繼文，王長印.檢驗醫學問答［M］.北京：人民衛生出版社，2008：505-508.

［9］徐衛東.兒童肺炎支原體檢測方法比較與分析［J］.現代實用醫學，2015，27（10）：1112-1114.

［10］葉應撫，王毓三.全國臨床檢驗規程［M］.南京：東南大學出版社，2008：191-199.

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1671-8194（2016）26-0126-02