婦科門診患者人乳頭狀瘤病毒基因分型檢測結果分析

馮真真

婦科門診患者人乳頭狀瘤病毒基因分型檢測結果分析

馮真真

人乳頭狀瘤病毒；基因分型；宮頸癌

人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是專性感染人表皮和黏膜鱗狀上皮細胞的常見DNA病毒，其中高危型人乳頭狀瘤病毒（high-risk human papillomavirus，HR-HPV）是導致宮頸上皮內增生和宮頸癌的主要因素［1］。防治HPV成為預防和治療宮頸癌的關鍵［2］。該研究回顧性分析婦科門診患者806例可疑宮頸病變的HPV-DNA分型檢查結果，以了解本地區婦科門診患者HPV各亞型的分布情況和感染特點，指導宮頸病變的篩查和隨訪。

1　資料與方法

1.1一般資料以2015年1月—2015年12月在筆者所在醫院婦科門診就診的慢性宮頸炎、陰道異常出血和流液、白帶增多及疑為HPV感染的806例為研究對象，年齡20～70歲，中位年齡48歲。

1.2方法取婦科門診806例患者的宮頸脫落細胞使用基因芯片法進行HPV-DNA分型 （26種）檢測，此檢測可檢測到17種高危亞型分別是HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，67，68，73和 9種低危亞型分別是 HPV6，11，40，42，43，44，54，55，57。

1.2.1標本采集所有婦科患者均用陰道窺器暴露陰道及宮頸，將宮頸刷于子宮頸外口處，輕壓并依順時針方向旋轉3～4周，取得脫落細胞，并置于相應的細胞保存液中。采集的樣本應盡快送檢，樣本4℃保存不超過24 h，-20℃保存不超過6個月，避免反復凍融。

1.2.2儀器與試劑伯樂C-1000 PCR擴增儀；HPV-GenoCam-9600基因芯片檢測閱讀系統；R16型高速臺式冷凍離心機；K30B型干式恒溫器；恒溫水浴箱。HPV-DNA分型檢測試劑盒（港龍生物技術有限公司）。

1.2.3HPV檢測主要步驟用試劑盒對采集的脫落細胞進行樣本的預處理和DNA提??；用30 L反應體系對所提取的DNA進行PCR擴增；擴增產物加到處理好的芯片上進行DNA雜交和顯色。

2　結果

2.1婦科門診患者的年齡分布及HPV感染情況

共檢測婦科門診患者806例，其中HPV感染陽性患者417例，感染率為51．7%。＜35歲組、35～50歲組、＞50歲組 HPV感染陽性分別占病例數的18．0%、23．1%、10．7%。見表1。

表1　患者的年齡分布及HPV感染情況

2.2HPV感染婦科門診患者的各亞型分布在HPV感染的陽性樣本中，HPV單一型感染占61．9%（258/417）。感染率排在前5位的高危型HPV亞型依次為16、58、68、18、59型，5種高危型占總數的69．8%（180/258），其中HPV16和HPV58為主要感染。發現感染低危型HPV 6、11、40、43、44、53、54、55、66、67型，其中常見的低危型別是6、11、55。2種以上型別的多重HPV感染占26．4%（110/417），混合感染中除了13種高危型HPV不同型別的多重感染外，高危型別與低危型別也有混合感染。

3　討論

子宮頸癌由人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染引起的，是婦女最常見的惡性腫瘤，每年全球約有46．6萬的新發病例，給婦女健康造成了很大的威脅［3，4］。近年來宮頸癌發病有年輕化的趨勢。原位癌高發年齡為30～35歲，浸潤癌為45～55歲。而高危型HPV持續感染是宮頸內皮瘤樣病變以及宮頸癌最常見的致病因素［5］。宮頸癌由初期感染經量變到質變病變成癌的病理過程約為10年，及時篩查癌前病變并使用合理的治療方法可將癌變的發展及時扼殺，臨床調查發現，早期阻斷宮頸癌前病變可使其達到100%的治愈率，對宮頸癌的治療有極其重要的意義［6］。2006年，美國陰道鏡和宮頸病理學會（ASCCP），對于超過30歲婦女建立了科學的篩查方案，進行細胞學與HR－HPV聯合篩查，可以有效發現宮頸癌前病變，及時進行干預［7］。

該調查研究結果中顯示婦科門診就診的慢性宮頸炎、陰道異常出血和流液、白帶增多及疑為HPV感染的806例患者中感染率排在前5位的高危型HPV亞型依次為16、58、68、18、59型，5種高危型占總數的69．8%。婦科門診患者有臨床癥狀時，HPV檢查又是高危亞型，罹患宮頸癌的概率很大，對感染高危亞型的患者應及時進行進一步檢查，并應進行及時的隨訪及觀察。對于低危亞型的HPV6或11感染，應及時檢查臨床上是否出現疣狀突起，及時讓性伴侶也進行HPV檢查。臨床醫師根據患者的臨床癥狀、HPV感染的亞型及相關檢查對患者進行及時的分流管理。

因此，了解婦科門診患者HPV感染性陽性患者的年齡分布、感染亞型分布的情況，進行合理的篩查隨訪管理，使宮頸癌和癌前病變早期發現和及時治療，在預防HPV感染高危人群的宮頸癌的發生具有重要意義。進行HPV檢測的目的是發現有患宮頸癌高風險的人群，而非檢測出單純的HPV感染者。

［1］李華，劉利勝，宋現讓，等．宮頸癌患者感染高危型人乳頭狀瘤病毒的基因型分析［J］．中國衛生檢驗雜志，2015，25（22）：3909－3910．

［2］劉永良．導流雜交基因芯片檢測HPV－DNA亞型1760例結果分析［J］．診斷病理學雜志，2015，22（1）：59－60．

［3］Hospenthal DK，Crouch HK，English JF，et al．Multidrug－resistant bacterial colonization of combat－injured personnel at admission to medical centers after evacuation from Afghanistan and Iraq［J］．J Trauma，2011，21（1）：S52－57．

［4］Chua KY，Grayson ML，Burgess AN，et al．The growing burden of multidrug－resistant infections among returned Australian travelers［J］．Med J Aust，2014，200（2）：116－118．

［5］Tzenov YR，Andrew PG，Voisey K，et al．Human papilloma virus（HPV）E7－mediated attenuation of retinoblastoma（Rb）induces hPygopus2 expression via Elf－1 in cervical cancer［J］．Mol Cancer Res，2013，11（1）：19－30．

［6］Burki TK．Cervical cancer：screening and risk with age［J］．Lancet Oncol，2014，15（3）：e107．

［7］Gold MA，Thomas MA，Huh WK，et al．High－risk human papillomavirus detection in woman with low－grade squamous intraepithelial lesions or higher－grade cytology using the cervista hpv hr test［J］．J Low Genit Tract Dis，2013，17（1）：51－57．

［2016－05－14收稿，2016－06－11修回］

［本文編輯：吳蓉］

R737.33

B

10.14172/j.issn1671-4008.2016.11.009

453000河南新鄉，解放軍371醫院檢驗科（馮真真）

1.2.4HPV檢測結果的判讀統計臨床HPV陰性標本的檢測結果（INS）值，按平均值加3倍的標準差確定陰性參考值為11．0。HPV分型基因芯片檢測閱讀系統可自動檢測INS值，當INS＜11．0時，HPV陰性；當INS≥11．0時，HPV陽性，并報告HPV型別（本試劑盒檢測26種HPV型中的一種或多種）。