血小板假性減少的實驗室分析與處理

李耀輝

(陽泉市第四人民醫院，山西陽泉　045000)

血小板假性減少的實驗室分析與處理

李耀輝

(陽泉市第四人民醫院，山西陽泉045000)

目的:分析采用EDTA抗凝管采集血樣時血小板計數假性減少的原因并探討實驗室處理方法。方法:對半年來發現的懷疑血小板假性減少患者中86例進行追蹤，分析不同抗凝劑血小板計數變化及血涂片染色鏡檢血小板分布情況。結果:86例懷疑血小板假性減少患者重新采血后，其中62例(72.1%)經EDTA和枸櫞酸鹽抗凝血涂片染色鏡檢血小板均未發生聚集，均呈散在均勻分布，并且血小板計數比較差異無統計學意義(P＞0.05);另外24例(27.9%)經EDTA抗凝血涂片染色鏡檢血小板聚集成團、成簇分布，而枸櫞酸鹽抗凝血涂片染色鏡檢血小板不聚集呈散在均勻分布且血小板計數正常，兩者比較差異有統計學意義(P＜0.05)。結論:EDTA偶爾可引起血液中血小板聚集的現象，使血小板發生假性減少，此時可將枸櫞酸鹽抗凝血血小板計數作為報告依據。

EDTA抗凝;血小板聚集;血小板假性減少;枸櫞酸鹽抗凝

隨著科學技術的發展，全自動血細胞分析儀廣泛的應用于臨床實驗室大批量標本的全血細胞分析，ICSH認可首選EDTA作為全血細胞分析的抗凝劑［1］。但在某些情況下，EDTA抗凝劑可誘導血小板聚集，導致血細胞分析儀血小板計數結果偏低，這種情況下檢驗科如果直接發報告容易使臨床醫生做出錯誤判斷。血小板作為參與凝血與止血的血細胞成分，在出血與血栓性疾病中具有較高的臨床應用價值。及時發現血小板聚集導致的血小板計數假性偏低并采取相應措施獲得真實的血小板計數引起實驗室檢驗人員高度重視。本研究對陽泉市第四人民醫院2015年上半年發現的懷疑血小板聚集導致血小板假性減少患者中86例進行追蹤，分析不同抗凝劑血小板計數變化及血涂片染色鏡檢血小板分布情況。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2015年1～6月陽泉市第四人民醫院住院患者約7 000例19 000個送檢樣本進行觀察，懷疑血小板聚集導致血小板假性減少124例，并對其中86例進行追蹤分析。86例患者中，腫瘤科13例，骨科33例，婦科7例，神經內科19例，老干科14例;男50例，女36例;年齡24～82歲。

1.2方法

1.2.1標本采集同時采用EDTA抗凝管、枸櫞酸鹽抗凝管按規定靜脈采血。

1.2.2儀器與試劑Sysmex XT-2000i血細胞分析儀及其配套試劑和質控品，瑞氏－吉姆薩染液，顯微鏡。

1.2.3檢測方法采用國際血液學復檢專家組推薦的規則對懷疑血小板假性減少的EDTA抗凝標本進行涂片并經瑞氏染后在顯微鏡下觀察血小板分布情況，若發現有血小板聚集成簇分布現象，再次對這部分患者同時采用EDTA抗凝管、枸櫞酸鹽抗凝管按規定靜脈采血，同時用Sysmex XT-2000i血細胞分析儀檢測，記錄血小板計數，并作血涂片染色鏡檢觀察血小板分布情況［1］。

1.3統計學方法

采用SPSS17.0統計軟件包對數據進行分析。計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗;計數資料以百分率表示，組間比較用χ2檢驗;P＜0.05表示差異有統計學意義。

2　結果

86例懷疑血小板假性減少患者重新采血后，其中62例經EDTA和枸櫞酸鹽抗凝血涂片染色鏡檢血小板均未發生聚集，均呈散在均勻分布，并且血小板計數比較差異無統計學意義(P＞0.05);另外24例經EDTA抗凝血涂片染色鏡檢血小板聚集成團、成簇分布，而枸櫞酸鹽抗凝血涂片染色鏡檢血小板不聚集呈散在均勻分布且血小板計數正常，兩者比較差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1、表2。

表1　86例不同抗凝劑血涂片染色鏡檢血小板分布情況

表2　86例不同抗凝劑采血血小板計數變化(±s)　×109/L

表2　86例不同抗凝劑采血血小板計數變化(±s)　×109/L

EDTA抗凝劑　枸櫞酸鹽抗凝劑　t值P 62例散在均勻分布68±15　73±13　1.03　＞0.05 24例聚集成簇分布35±8　121±24　3.24　＜0.05

3　討論

血小板在凝血、止血中起著重要的作用。當血小板數量、形態出現異常時可以引起出血性、血栓性疾病。病理狀態下，數量減少常發生于血小板減少性紫癜、脾大、急性白血病、再生障礙性貧血等;數量增多常發生于慢性粒細胞白血病、原發性血小板增多癥、真性紅細胞增多癥等。因此，血小板的檢測在臨床診斷和治療上有著重要的意義。血小板檢測的準確性直接影響臨床診斷和治療方案的正確性。

隨著實驗室日常工作量的增加，大批量標本的全血細胞分析采用全自動血細胞分析儀檢測。EDTA作為抗凝劑與血液中的鈣離子(凝血因子Ⅳ)結合成螯合物后使鈣離子失去凝血功能從而阻止血液凝固，并且由于其對血液中紅細胞、白細胞體積和形態影響較小，故被國際血液學標準委員會推薦為全血細胞分析的首選抗凝劑。然而，EDTA偶爾可引起血液中血小板聚集的現象，使血小板發生假性減少［2］。

當然，使血小板發生假性減少的原因有很多。EDTA作為抗凝劑可以誘導血小板活化導致血小板聚集的原因只是其中一種。其他方面，比如采血操作時穿刺不順利、采血后混勻不及時等也容易出現血小板聚集［3］;患者自身方面，血管內皮損傷、高脂血癥、高血液粘稠度、高鎂血癥、腫瘤藥物誘導等也很容易出現血小板聚集［4，5］。

不管什么原因導致標本中血小板產生聚集，因血小板聚集體體積超過了血細胞分析儀血小板計數閾值，血細胞分析儀不能正確識別為血小板，將其排除在血小板計數范圍外，致血小板計數假性減少［6］，此時直接發報告容易使臨床醫生做出錯誤判斷。所以要求實驗室檢驗人員應該謹慎對待此類檢測結果，認真分析原因并及時與臨床溝通，對此類血小板減少的患者及時進行復檢，發現因血小板聚集導致的血小板計數假性偏低時采取相應措施獲取真實的血小板計數以降低誤診率。

鑒于此，本文對懷疑血小板聚集導致血小板假性減少的86例患者進行追蹤分析。實驗表明，采用國際血液學復檢專家組推薦的規則對懷疑血小板假性減少的EDTA抗凝標本進行涂片并經瑞氏染后在顯微鏡下觀察血小板分布情況，若發現有血小板聚集成簇分布現象，再次對這部分患者同時采用EDTA抗凝管、枸櫞酸鹽抗凝管按規定靜脈采血于血細胞分析儀進行血小板計數，并作血涂片染色鏡檢觀察血小板分布情況后，對EDTA和枸櫞酸鹽抗凝血涂片染色鏡檢血小板均未發生聚集，均呈散在均勻分布的標本，EDTA抗凝血血小板計數直接發給臨床;而EDTA抗凝血涂片染色鏡檢血小板聚集成團、成簇分布，枸櫞酸鹽抗凝血涂片染色鏡檢血小板不聚集呈散在均勻分布且血小板計數正常的標本，則將枸櫞酸鹽抗凝血血小板計數作為報告依據。

［1］劉成玉，羅春麗.臨床檢驗基礎［M］.5版.北京:人民衛生出版社，2013.

［2］朱海燕.EDTA－k2抗凝劑導致血小板假性減少的原因探討分析［J］.淮海醫藥，2013，31(5):433-434.

［3］徐勇.EDTA抗凝導致血小板假性減少的原因探討［J］.首都醫藥，2013(18):19-21.

［4］鄺妙歡，歐陽文婷，林建華，等.腫瘤患者EDTA依賴性假性血小板減少的臨床分析［J］.中國醫學雜志，2010，56(44):3144-3146.

［5］周小棕，鄒曉.假性血小板減少癥研究進展［J］.中華檢驗醫學雜志，2007，30(9):1065.

［6］梁巍，余德玲，王域平.EDTA－k2誘導血小板假性減少的分析［J］.中外幼兒健康，2011，19(7):219-220.

本文編輯:王知平

R466.11

B

1671-0126(2016)02-0019-02

李耀輝，女，主管檢驗師，從事臨床檢驗工作