血小板結(jié)果異常時(shí)作人工鏡檢的必要性

董文婷

(夏縣人民醫(yī)院，山西夏縣　044400)

血小板結(jié)果異常時(shí)作人工鏡檢的必要性

董文婷

(夏縣人民醫(yī)院，山西夏縣044400)

目的:探討血細(xì)胞分析儀檢測血小板假性增高或假性減低的原因。方法:對150例血小板結(jié)果異常的病例進(jìn)行分析，通過血細(xì)胞分析儀，人工計(jì)數(shù)，血涂片3種方法進(jìn)行對比。結(jié)果:血小板中度減低的標(biāo)本3種方法結(jié)果有差異。結(jié)論:細(xì)胞分析儀檢測血小板雖然方便、快捷且重復(fù)性好，但對于低于正常值的標(biāo)本，必須要引起足夠重視，要采取血細(xì)胞分析儀和血涂片、人工計(jì)數(shù)相結(jié)合的方式進(jìn)行報(bào)告，以免引起醫(yī)療事故和糾紛。

血細(xì)胞分析儀;假性減低;假性增高

1　資料與方法

1.1一般資料

收集夏縣人民醫(yī)院2013年8月～2014年7月血細(xì)胞分析儀測定血小板結(jié)果異常150例(血小板大于800×109/L或小于100×109/L)，年齡11～72歲，平均61歲，其中內(nèi)科100例，兒科13例，骨科15例，外科15例，皮膚科7例。血小板數(shù)目和人數(shù)統(tǒng)計(jì)見表1。

表1　異常血小板數(shù)目和人數(shù)分布

1.2儀器與試劑

1.2.1儀器邁瑞B(yǎng)C5500全自動血細(xì)胞分析儀，雙筒顯微鏡，計(jì)數(shù)板。

1.2.2試劑邁瑞原裝配套試劑，瑞—姬氏染液，草酸銨稀釋液，質(zhì)控物(中值，高值)。

1.3方法

1.3.1患者取坐位進(jìn)行靜脈采血2 mL，放入乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)真空采血管中，立即混勻5～8次，在1 h內(nèi)上機(jī)測定，每份標(biāo)本檢測3次，取平均值，進(jìn)行患者檢測前質(zhì)控中值、高值都必須在控。

1.3.2用EDTA-K2全血制備血涂片將標(biāo)本進(jìn)行上機(jī)測定后，取干凈無油膩的玻片一張，取混勻的全血一滴于玻片的一端，用標(biāo)準(zhǔn)推片置于血滴前端，血滴沿推片散開后，勻速前進(jìn)，取得厚薄適宜，頭，體，尾分明的標(biāo)準(zhǔn)血涂片，制備完成后，立即在空氣中晃動幾下，加快干燥，以防細(xì)胞皺縮，待自然干燥后進(jìn)行瑞姬氏染色，15 min后，沖洗待干鏡檢。需要注意的是:沖洗時(shí)不能先倒掉染液再沖，應(yīng)該平端玻片，用自來水從一端緩緩沖洗1 min，待干鏡檢。

1.3.3人工計(jì)數(shù)取草酸銨稀釋液0.38 mL，加入混勻全血20 μL，擦去管尖外附著血液，置于血小板稀釋液內(nèi)，立即充分混勻，待完全溶血后再次混勻1 min，取上述混勻的血小板懸液1滴，沖入計(jì)數(shù)池內(nèi)，靜置10～15 min，使血小板下沉后，開始計(jì)數(shù)，每份標(biāo)本沖池2次，取平均值。

2　結(jié)果

血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)，人工計(jì)數(shù)及血涂片情況見表2。

表2　三種血小板檢測方法結(jié)果對比

3　討論

血液分析儀檢測血小板雖然方便，快捷和重復(fù)性好，但低于正常值的標(biāo)本，甚至中度減低的標(biāo)本，必須要引起足夠重視。

閱片過程中發(fā)現(xiàn)有血小板附著在中性粒細(xì)胞四周(血小板衛(wèi)星現(xiàn)象)，被誤認(rèn)為白細(xì)胞而使血小板計(jì)數(shù)假性減低［1］。某些血液系統(tǒng)疾病可導(dǎo)致血小板體積偏大，血細(xì)胞分析儀在血小板與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，只識別顆粒大小而不識別顆粒性質(zhì)，致使這些體積偏大的血小板不被納入血小板計(jì)數(shù)范圍，使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。大血小板，巨大血小板體積和小淋巴細(xì)胞，小紅細(xì)胞大小相似，也是導(dǎo)致血小板假性減低的原因之一。本次研究發(fā)現(xiàn)(80～100)×109/L組及(50～80)× 109/L有差異，有10%～15%可見血小板聚集現(xiàn)象(衛(wèi)星現(xiàn)象)，或有大血小板及巨大血小板，這可能是造成血小板數(shù)量不符合的內(nèi)在因素，這可以說明血小板儀器法產(chǎn)生誤差的原因不是與血小板數(shù)量有關(guān)，而是與血小板聚集情況和體積異常有關(guān)［2］。退化的白細(xì)胞碎片，紅細(xì)胞碎片及雜物被誤認(rèn)為血小板而使血小板計(jì)數(shù)假性增高。

本次研究過程中發(fā)現(xiàn)一位肺癌患者，多次化療血小板一直還在正常范圍，在130×109/L左右，突然有一次化療后血小板低至9×109/L，血涂片也符合，患者情況危機(jī)，輸注幾個(gè)治療量的血小板后，稍有好轉(zhuǎn)，和臨床聯(lián)系，是患者本次化療換藥物所致，現(xiàn)在患者血小板又恢復(fù)正常。這個(gè)案例說明檢驗(yàn)要經(jīng)常與臨床聯(lián)系，這樣才能掌握患者的真實(shí)狀態(tài)，等患者停藥后再采集標(biāo)本送檢，因?yàn)檫@不代表患者的真實(shí)結(jié)果，以免造成不必要的浪費(fèi)和恐慌。

在以后的工作中，必須要注意以下幾點(diǎn):a)血小板檢測前的質(zhì)量控制:基本原則，避免血小板被激活、破壞、并避免污染。采血是否順利很關(guān)鍵，因采血過程中因操作緩慢，穿刺不順，組織液混入，可因血流不暢可導(dǎo)致血小板破壞過多，采血后混勻不及時(shí)可引起血小板聚集等均可使血小板假性減低。抗凝劑是否合適也很重要，因?yàn)楦嗡乜鼓嗡乜墒寡“灞砻娼Y(jié)構(gòu)發(fā)生改變，形成肝素—血小板復(fù)合體，引起血小板在較短時(shí)間內(nèi)聚集，使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低，所以推薦使用EDTA-K2。采血后立即混勻5～8次以防發(fā)生小的凝集，混勻時(shí)動作應(yīng)緩慢，力度大可引起血小板破壞增加。采血后1 h內(nèi)血小板趨于穩(wěn)定平衡。標(biāo)本應(yīng)放于室溫保存，因低溫可激活血小板，使血小板聚集引起血小板假性減低。采集后放置時(shí)間不能過長。試劑應(yīng)避免污染，否則，雜質(zhì)微粒會使本底增高，導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果偏高。采血時(shí)血液和抗凝劑的比例也會影響檢測質(zhì)量，所以必須按照采血管上采血量的要求規(guī)范操作。定期對臨床護(hù)士進(jìn)行分析前質(zhì)量控制的培訓(xùn)，對檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性也起到重要作用。b)檢測中，手工計(jì)數(shù)，應(yīng)定期檢查稀釋液質(zhì)量，先做稀釋液空白計(jì)數(shù)，以確認(rèn)是否存在細(xì)菌污染或雜質(zhì)，空白計(jì)數(shù)應(yīng)該為零。血細(xì)胞分析儀使用前，必須檢查各個(gè)試劑是否足夠，廢液是否清空，并查看試劑的質(zhì)量是否有異常，然后才能開機(jī)運(yùn)行，調(diào)試好后，必須是質(zhì)控(包括中值，高值)在控后才能進(jìn)行患者標(biāo)本檢測。c)檢測后，對于過高或過低結(jié)果的標(biāo)本，應(yīng)該充分重視，遇到過高或過低的結(jié)果，特別是中度偏低的結(jié)果，不能馬虎，必須采用血細(xì)胞分析儀和血涂片檢查，人工計(jì)數(shù)相結(jié)合的方式進(jìn)行復(fù)核，當(dāng)遇到血小板減低的病例時(shí)，應(yīng)先做血涂片染色進(jìn)行顯微鏡檢查，有不符合者再用手工計(jì)數(shù)進(jìn)行復(fù)核，有些特殊病例最終以人工計(jì)數(shù)結(jié)果報(bào)告給臨床，這樣無論是血小板成堆聚集或圍繞在白細(xì)胞四周，還是大體積血小板造成的假性減低都能及時(shí)報(bào)出結(jié)果，并在備注欄中說明血涂片血小板的分布情況，形態(tài)特征，供臨床醫(yī)生參考，以盡量減少醫(yī)療事故及糾紛。

［1］熊立凡，劉成玉，主編.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)［M］.4版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008.

［2］李勝發(fā)，程大林.血小板可逆性聚集在血細(xì)胞分析儀中的影響［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2003，21(1):37.

本文編輯:王霞

R446.11

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1671-0126(2016)02-0032-03

董文婷，女，主管檢驗(yàn)師，從事臨床檢驗(yàn)工作