α-硫辛酸對急性冠脈綜合征患者心肌損傷保護作用的研究

楊翠翠，丁旵東，操全霞

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◇臨床醫學研究◇

α-硫辛酸對急性冠脈綜合征患者心肌損傷保護作用的研究

楊翠翠，丁旵東，操全霞

目的 探討α-硫辛酸(α-LA)對急性冠脈綜合征(ACS)患者心肌損傷的保護作用。方法 研究對象為59例急性冠脈綜合征患者，隨機分為常規藥物治療組和α-LA組。常規藥物組29例給予抗栓、調脂、擴管藥物治療；α-LA組30例在常規藥物治療基礎上加用α-LA(600 mg/d，IVD，療程3d)。2組在用藥前0 h、用藥后24 h和72 h各采取靜脈血4 ～ 5 ml，采用ELISA法測定血清乙醛脫氫酶2(ALDH2)活性，硫代苯巴比妥酸法測定血清丙二醛(MDA)水平，微量酶標法測定血清乳酸脫氫酶(LDH)含量，LVEF通過心臟彩色多普勒超聲心動圖檢查測定。 結果 ① 兩組在用藥前0 h的血清ALDH2活性、MDA及LDH水平、LVEF值無顯著差異；② 兩組在用藥24 h 和72 h后血清ALDH2活性水平較用藥前0 h明顯上升(P<0.01)，MDA較用藥前0 h顯著下降(P<0.01)；LDH水平在用藥72 h較24 h顯著下降(P<0.01)，LVEF值72 h和1周后均有明顯升高(P<0.05)；③ 與常規治療組比較，α-LA組在用藥24 h及72 h后血清ALDH2活性均顯著上升(P<0.01)，MDA水平顯著下降(P<0.05)，LDH亦顯著下降(P<0.01)，LVEF值1周后升高更顯著(P<0.05)。結論 α-LA上調ACS患者的ALDH2活性,減少過氧化終產物MDA的生成，減輕心肌組織缺血及缺血再灌注后的氧化損傷(LDH水平回降)。

急性冠脈綜合征；α-硫辛酸；乙醛脫氫酶2；丙二醛；乳酸脫氫酶

急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)指因冠狀動脈粥樣斑塊的破裂及其血栓形成使冠狀動脈閉塞，致使心絞痛加重和發生急性心肌梗死的綜合征，包括不穩定型心絞痛、ST段抬高性心肌梗死、非ST段抬高性心肌梗死[1]。ACS對人類的危害極大，早期選擇合適的治療方案，可以改善患者的預后、降低死亡率及致殘率。及時開通嚴重病變的“罪犯”血管，恢復血流，能夠有效地改善心肌缺血癥狀及預后，但是“罪犯”血管開通早期引起的缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury，IRI)[2]是一直困擾著臨床工作者的難題，如何減輕急性期心肌缺血及IRI是目前臨床研究中的重要任務。有研究[3]表明，在離體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型中激活乙醛脫氫酶2(aldehyde dehydrogenase 2 ，ALDH2)可以使心肌梗死面積減少60%。α-硫辛酸(alpha lipoic acid，α-LA )不僅是強效的抗氧化劑，具有清除自由基和活性氧的能力[4-5]，而且是ALDH2激活劑，其是否能降低急性期心肌缺血及IRI，減少心肌損傷，目前研究較少。該研究選取ACS患者病例為研究對象，探討α-LA對急性缺血及缺血再灌注引起的心肌損傷的保護作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象 入選研究對象為2014年6月 ～ 2015年12月安徽醫科大學第二附屬醫院綜合內科收治的ACS患者59例，隨機分為常規藥物組和α-LA組。常規藥物組29例，其中男19例，女10例，(60±9)歲，給予冠心病二級預防藥物治療；α-LA組30例,其中男20例，女10例，(58±10)歲，在冠心病二級預防藥物治療基礎上給予α-LA 靜脈滴注，600 mg/d，療程3 d(首劑于入院后2 h內給予)。病例入選標準：① 入院前內有典型的心絞痛發作；② cTnI陽性和(或)CK-MB陽性；③ 心電圖有缺血性表現：ST段下移≥1 mm、ST段抬高≥ 1 mm和(或)T波倒置；符合3項中2項的患者入選本實驗。排除標準：近期服用抗炎藥、激素、阿片類藥物、抗氧化劑及長期服用華法林患者，患有惡性腫瘤、先天性心臟病、肝腎功能衰竭、近期有炎癥、嚴重的其他系統疾病患者排除在外?；颊呔炇饡嬷橥鈺?，該研究由安徽醫科大學第二附屬醫院倫理委員會批準(受理號：2016-05-04)，符合倫理審查標準及赫爾辛基宣言。

1.2 研究方法 采用病例對照研究方法。收集臨床資料：采用病史采集記錄單的形式記錄患者的資料，包括：性別、年齡、飲酒史、吸煙史、疾病史(高血壓病、糖尿病、心血管病家族史)，藥物(阿司匹林、氯吡格雷、硝酸酯類、他汀類、β受體阻滯劑類等)使用情況。

1.3 主要試劑和儀器 α-LA(山西亞寶藥業集團股份有限公司)；ALDH2試劑盒(武漢華美生物工程有限公司)；丙二醛(malondialdehyde，MDA)試劑盒、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)試劑盒(南京建成生物工程研究所)；-80 ℃超低溫冰箱(青島海爾特種電器有限公司)；超凈工作臺(青島海爾特種電器有限公司)；低溫超速離心機(美國Sigma公司)；37 ℃恒溫孵育箱(上海一恒科技有限公司)；恒溫搖床(上海智城分析儀器制造有限公司)；酶標儀(上?？迫A實驗系統有限公司)。

1.4 ACS患者心肌損傷程度的評估 心肌損傷程度主要是通過心肌壞死標志物(CK-MB、cTnI)評估。α-LA組和常規藥物組患者入院0、24、72 h檢測心肌壞死標志物并進行統計學處理，對比兩組患者不同時間段心肌損傷程度的差異。

1.5 ACS患者心臟收縮功能的評估 心臟收縮功能通過左室射血分數(LVEF)評估?；颊呷朐? h、72 h和1周行心臟彩色多普勒超聲心動圖檢查，測定左室收縮末期和左室舒張末期容積并計算LVEF。

1.6 ALDH2活性檢測 在給藥0、24、72 h采集兩組患者靜脈血，4 ℃、1 600 r/min離心5 min后收集血清，-80 ℃保存，按照ELISA試劑盒說明書操作，測定ALDH2活性。

1.7 MDA水平檢測 在給藥0、24、72 h采集兩組患者靜脈血，按照試劑盒說明書操作，采用硫代巴比妥酸法檢測MDA活性。

1.8 LDH含量檢測 在給藥0、24、72 h采集兩組患者靜脈血，按照試劑盒說明書檢測LDH活性。

2 結果

2.1 患者臨床基線資料及其他非研究項目的比較 α-LA組與常規藥物組比較，性別、年齡、飲酒史、吸煙史、疾病史(高血壓病、糖尿病、心血管病家族史)、藥物使用史等差異均無統計學意義。見表1。

2.2 α-LA對ACS患者心肌損傷程度及心臟收縮功能的影響 α-LA組和常規藥物組在0 h時CK-MB、cTnI及LVEF差異均無統計學意義；24 h及72 h時α-LA組的CK-MB和cTnI水平低于常規藥物組，差異有統計學意義(P<0.01)；72 h及1周后，α-LA組的LVEF值高于常規藥物組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3 α-LA對ACS患者ALDH2的影響 α-LA組和常規藥物組在0 h檢測患者血清ALDH2水平，差異無統計學意義；治療24、72 h后，兩組患者血清ALDH2水平均明顯上升，各組內差異有統計學意義(P<0.01)；α-LA組較常規藥物組在24、72 h上升幅度更顯著，差異有統計學意義(P<0.01)。見表3。

2.4 α-LA對ACS患者MDA的影響 α-LA組和常規藥物組在0 h檢測患者血清MDA水平，差異無統計學意義；治療24、72 h后，兩組患者血清MDA水平均明顯下降，各組內差異有統計學意義(P<0.01)；且α-LA組較常規藥物組在24、72 h下降幅度更顯著，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

2.5 α-LA對ACS患者LDH的影響 α-LA組和常規藥物組在0 h檢測患者血清LDH水平，差異無統計學意義；治療24 h后，兩組患者血清LDH水平均上升，α-LA組上升幅度小于常規藥物組，差異有統計學意義(P<0.01)；治療72 h后，兩組患者血清LDH水平明顯下降，α-LA組較常規藥物組下降幅度更顯著，差異有統計學意義(P<0.01)。見表3。

表1 α-LA組與常規藥物組患者治療前相關基線資料的比較(n)

表2 α-LA對ACS患者血清心肌損傷標志物及心臟收縮功能的影響±s)

與常規藥物組比較:*P<0.05,**P<0.01

表3 α-LA對ACS患者血清中氧化代謝產物的影響±s)

與常規藥物組比較：*P<0.05,**P<0.01;與組內0 h比較：#P<0.05,##P<0.01; 與組內24 h比較：△P<0.05,△△P<0.01

3 討論

當組織缺血缺氧時，機體發生氧化應激，產生內源性氧自由基(free radical, FR)，包括羥自由基，超氧陰離子、氮氧自由基、過氧化氫等，統稱為活性氧(reactive oxygen species, ROS)[6]，導致氧化系統與抗氧化系統間的平衡出現紊亂。有研究[7]顯示，缺氧可導致體外培養的心肌細胞產生大量ROS，降低ALDH2活性，阻礙ALDH2清除脂質過氧化產生的丙二醛(malondialdehyde，MDA)、4-HNE等毒性物質，氧化應激及相關代謝產物堆積的結果是引起組織缺血缺氧損傷的主要原因[8]。因此，抗氧化應激反應，清除ROS，提高ALDH2活性是減輕心肌缺血及IRI損傷的關鍵。

乳酸脫氫酶(LDH)是機體糖酵解供能系統的關鍵酶之一，機體缺氧時組織無氧代謝增強，LDH活性及水平升高，組織發生缺氧損傷后細胞中LDH大量滲出，使血清LDH水平升高，因此血清LDH水平可以反映組織缺氧損傷的程度[7]。

α-LA是一種新型抗氧化劑，對ALDH2活性具有良好的調節作用，是近年降低氧化應激損傷的研究熱點。前期體外研究[3,9-10]結果表明，α-LA可提高ALDH2活性，降低大鼠心肌細胞低氧、低氧/復氧引起的氧化損傷程度。目前關于α-LA的臨床研究尚少，本實驗通過對基線臨床資料相匹配的兩組病例血清ALDH2、MDA、LDH水平及LVEF值的研究顯示：① 治療24、72 h后，兩組血清ALDH2水平逐漸上升，α-LA組上升幅度更顯著；② 與之相反，兩組血清MDA及LDH水平逐漸下降，α-LA組下降程度更顯著；③ LVEF值升高在1周后更明顯，α-LA組優于常規藥物組。這些結果表明，α-LA增加ACS患者血清ALDH2活性，降低氧化應急產生的ROS，減少脂質過氧化產生的MDA等毒性物質[11]，減小ACS患者缺血和(或)IRI引起的急性氧化應激心肌損傷，因而較常規組更顯著降低心肌壞死標志物水平、改善左心室收縮功能(LVEF)。ACS患者發生急性缺血及IRI心肌損傷時α-LA可以發揮保護作用。

綜上所述，α-LA能減輕心肌缺血及IRI引起的氧化應激性心肌損傷，降低ACS患者風險、改善預后。其減輕心肌缺血及IRI氧化應激性心肌損傷與上調ACS患者血清ALDH2活性，減少脂質過氧化物的產生有關。本研究樣本量較少，隨訪時間較短，具體調節機制還有待進一步探討。

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The protective effects of α-lipoic acid on myocardial injury of acute coronary syndrome patients

Yang Cuicui, Ding Chandong, Cao Quanxia

(DeptofInternalMedicine,TheSecondAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei230601)

ObjectiveTo investigate the protective effects of α- lipoic acid (α-LA) on myocardial injury of acute coronary syndrome patients.Methods59 patients with acute coronary syndrome were randomized into two groups: conventional treatment group and α-LA group. 29 patients in conventional treatment group received routine drugs, while 30 patients in α-LA group were given α-LA (600 mg/d, IVD, for 3 days) besides routine drugs. The activity of ALDH2，level of MDA and LDH of serum in all patients were separately detected by microtitration，TBA and ELISA before and after treatment ( 24, 72 hours )，LVEF values were analyzed by UCG.Results① There were no significant differences between the two groups before treatment. ② After 24 h and 72 h treatment, the activity of ALDH2 in two groups were increased (P<0.01) and the level of MDA was decreased (P<0.01) compared to the data before treatment. Compared to after 24 h, the level of LDH was reduced after 72 h (P<0.01) and the LVEF values were significantly higher after 72 h and 1 week (P<0.05). ③ Compared to conventional treatment group, the activity of ALDH2 in α-LA group was significantly increased (P<0.01) and the levels of MDA and LDH were decreased after 24 h and 72 h (P<0.05,P<0.01). The LVEF values were significantly increased after 1 week (P<0.05).Conclusionα-LA may increase the ALDH2 activity, reduce peroxidation end product (MDA) generation of serum in ACS patients, and finally decline oxidative damage to myocardial ischemia and reperfusion (the level of LDH decreased).

acute coronary syndrome; α-lipoic acid; ALDH2; MDA; lactate dehydrogenase

安徽省衛生廳醫學科研課題計劃(編號：2010C058)

安徽醫科大學第二附屬醫院綜合內科，合肥 230601

楊翠翠，女，碩士研究生； 丁旵東，男，主任醫師，碩士生導師，責任作者，E-mail:dcdsunshine@sina.com

http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20161012.1323.017.html

R 541.4

A

1000-1492(2016)11-1630-04

10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.11.017

2016-02-28接收