淮安地區6 228例女性感染人乳頭瘤病毒的基因型分布

李紅林，劉小寧，郭愛霞，時峰俊

（南京醫科大學附屬淮安第一醫院1.檢驗科，2.中心實驗室，3.婦產科，4.感管科，江蘇 淮安 223300）

淮安地區6 228例女性感染人乳頭瘤病毒的基因型分布

李紅林1，劉小寧2，郭愛霞3，時峰俊4

（南京醫科大學附屬淮安第一醫院1.檢驗科，2.中心實驗室，3.婦產科，4.感管科，江蘇 淮安 223300）

目的探討淮安地區女性感染人乳頭瘤病毒（HPV）及其基因亞型分布情況，為HPV感染防治和流

人乳頭瘤病毒；基因分型；宮頸癌；多重感染

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一類嗜上皮性小雙鏈環狀DNA病毒的總稱，人類的黏膜鱗狀上皮細胞是其天然宿主。主要通過性行為、母嬰垂直、直接皮膚接觸等方式傳播。目前發現的HPV亞型有200多種，其中大約40多種能引起人的生殖道感染，是尖銳濕疣、宮頸上皮內瘤樣病變及宮頸癌的主要發病原因[1]。流行病學研究顯示，不同地區、種族的人群之間HPV亞型分布具有顯著的差異[2]。淮安地區位于江蘇省北部，橫貫秦玲-淮河一帶，是我國地理文化的南北分界線，具有獨特的人文地理環境和居民生活方式[3]。但目前關于淮安地區女性HPV基因型感染的相關研究卻鮮有報道。本研究應用核酸分子快速雜交基因分型技術對淮安地區女性患者進行HPV基因型檢測，以便為該地區HPV感染的防治提供實驗室依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2013年11月-2015年10月在淮安市第一人民醫院就診且臨床資料完整的6 228例女性患者作為研究對象。年齡16～84歲，平均（38.9±9.5）歲，其中≤25歲患者577例，26～35歲患者1 663例，36～45歲患者2 473例，46～55歲患者1 290例，≥56歲患者225例。在征得患者同意并承諾保護患者隱私的情況下，由婦產科醫師專人采集宮頸分泌物，并置于專用的細胞保存液4℃中保存，1周內檢測。標本采集前3 d內患者沒有陰道內用藥或對陰道進行沖洗；24 h內無性行為，且標本采集時患者不處于月經期。排除復查患者的檢測結果。

1.2 HPV檢測

采用凱普醫用核酸分子雜交技術及其配套試劑檢測21種常見HPV基因型，其中高危型15種：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68；低危型6種：6、11、42、43、44和CP8304（81）。經DNA分離提取，聚合酶鏈反應擴增，導流雜交等檢測步驟后顯色判定結果。

1.3統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率或百分比表示，用χ2檢驗，多組間的兩兩比較時用Bonferroni法校正檢驗水準，P＜0.05為差異有統計學意義，

2 結果

2.1 不同年齡段HPV陽性檢出率比較

HPV總陽性檢出率為37.73%（2 350/6 228），其中單純低危亞型感染率為4.88%（304/6 228），單純高危亞型感染率為27.76%（1 729/6 228），混合型感染率為5.09%（317/6 228）。≤25歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲、≥56歲年齡段女性HPV陽性檢出率分別為41.07%（237/577）、35.38%（588/1 663）、37.73%（933/2 473）、37.91%（489/1 290）、45.78%（103/225），經χ2檢驗，不同年齡段的陽性檢出率比較，差異有統計學意義（χ2=12.950，P=0.012）；且≥56歲年齡段與26～35歲年齡段比較，差異有統計學意義（χ2= 9.273，P=0.002），≥56歲年齡段感染率高于26～35歲年齡段。≤25歲及≥56歲年齡段感染率略高，而26～35歲、36～45歲、46～55歲等3個年齡段的感染率偏低；HPV陽性檢出率與年齡段呈近似U形分布。見附圖。

附圖不同年齡段HPV感染率曲線

2.2HPV陽性的基因亞型重數構成比

將檢出1種HPV基因亞型作為單重感染、檢出2種HPV基因亞型作為二重感染、檢出3種HPV基因亞型作為三重感染，以此類推，分別統計HPV陽性的基因亞型重數構成比。2 350例HPV陽性標本中，單重、雙重、三重、四重、五重及以上感染構成比分別為66.03%（1 555例）、22.76%（536例）、7.09%（167例）、2.93%（69例）、1.19%（23例）。各年齡段均以單重感染為主，其中≤25歲年齡段的五重及以上感染構成比最高（2.14%），但與其他年齡段比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；36～45歲年齡段的單重感染構成比最高（68.38%），≥56歲年齡段的單重感染構成比（51.46%）低于其他年齡段（χ2=14.242，P= 0.006）；≥56歲年齡段的二重（31.07%）感染構成比高于其他年齡段（χ2=11.634，P=0.020），三重（9.71%）和四重（5.84%）感染構成比與其他年齡段比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 不同年齡段HPV基因亞型陽性重數構成比例（%）

2.3HPV陽性的基因亞型種類分布

HPV陽性標本中，高危型HPV陽性數為2861例（81.12%）；前5位分別為HPV16（15.23%）、HPV52（11.79%）、HPV58（9.58%）、HPV53（7.00%）和HPV33（6.95%）；低危型陽性數為666例（18.88%），前3位為CP8304（HPV81）（7.14%）、HPV11（5.30%）和HPV6（4.31%）。見表2。

表2 HPV陽性的基因型分布

3 討論

HPV感染能引起生殖道黏膜上皮發生增生性損傷，現已成為最常見的性傳播疾病之一。＞70%女性一生中至少感染1次HPV，但其中大多數是一過性的，一般會在2年內為機體自身免疫系統清除；若2年內沒有被清除，則稱為HPV的持續感染[4]。根據HPV對宮頸致癌的危險程度，可將HPV基因型分為高危型和低危型。低危型主要引起生殖道尖銳濕疣；高危型則通過產生E6和E7癌蛋白，結合宿主細胞中的抑癌基因p53和Rb，誘導細胞周期調控失常，引發宮頸癌變[5]。高危型HPV的持續感染是宮頸癌變的主要因素。因此，HPV分型檢測已成為目前早期篩查宮頸癌、判斷疾病類型和選擇診治方案的重要手段之一[6]。

本研究結果顯示，①淮安地區女性的HPV感染率為37.73%；高于文獻報道的青島地區（32.2%）[7]、成都地區24.83%[8]、廣東地區（7.3%）[9]，以及海南少數民族地區（25.96%）[10]；但低于湖南地區（44.45%）[11]和遼寧地區（45.6%）[12]，這可能與不同研究所選擇的目標人群和研究方法不同有關；但也進一步證明HPV的分布存在地域差異性。②淮安地區女性的HPV感染以基因型單重感染為主，但多重基因型感染也存在較大的比例，并且單純高危亞型HPV感染率（27.76%）高于全國37個城市的綜合平均水平（21.07%）[2]，提示淮安地區女性宮頸癌的潛在發生率較高，應引起當地疾控部門和居民的重視，盡早采取預防措施。③淮安地區不同年齡段女性HPV感染率比較，差異有統計學意義。在≤25歲和≥56歲年齡段感染率較高，分別為41.07%和45.78%；而在26～35歲、36～45歲和46～55歲等3個年齡段的感染率略低，分別為35.38%、37.73%和37.91%；HPV感染率與年齡段呈近似U形分布，與廣東地區報道的結果相似[9]。這可能是因為≤25歲年輕女性性生活較為活躍，易于發生HPV感染；而≥56歲女性HPV感染率顯著高于26～35歲年齡段，則可能是由于≥56歲女性雌激素水平和機體免疫力均較為低下，易于感染HPV；另外本研究所選擇的老年人群多是到婦科就診的宮頸疾病患者，而單純進行宮頸癌篩查的人群較少，這可能也是引起≥56歲年齡組HPV感染率較高的原因之一。因此，應加強對老年女性HPV感染和宮頸癌篩查知識的宣教力度。④淮安地區女性感染的高危HPV亞型以HPV16、52和58為主，與廣東、青島地區報道的結果相似，而與成都，遼寧地區報道結果稍有不同；另外國內其他地區較少見的低危型HPV81在淮安地區女性中感染率較高；提示未來淮安地區HPV疫苗的研制和選擇均應結合當地的地域特點進行。但因本文研究結果均來自淮安地區一家最大的綜合性三甲醫院，初步提示當地人群HPV基因型感染具有獨特的地域特點，但對于該地區各種HPV基因型感染率的確切水平及其與宮頸癌等婦科疾病的相關性，還有待當地開展多中心，大樣本的進一步合作研究。

綜上所述，淮安地區女性HPV感染率較高，且高于國內37個城市的平均水平。當地應重點做好對≤25歲和≥56歲2個高峰年齡段女性的宣教篩查工作，早診斷、早治療，預防和控制HPV感染及宮頸癌等相關疾病的發生，提高女性的衛生保健水平。

[1]NUNEZ D A.HPV infection is more than Cervical Cancer and Genital Warts[J].Postgraduate Medical Journal,2015,85(1009): 573-581.

[2]WANG R,GUO X L,WISMAN G B A,et al.Nationwide prevalence of human papillomavirus infection and viral genotype distribution in 37 cities in China[J].Bmc Infectious Diseases,2015, 15(1):1-10.

[3]張劍,柳小妮,譚忠厚,等.基于GIS的中國南北地理氣候分界帶模擬[J].蘭州大學學報（自然科學版）,2012,3(3):28-33.

[4]王薇,馬丁.不同人乳頭瘤病毒檢測方法的臨床應用價值[J].實用婦產科雜志,2013,29(3):165-167.

[5]ZAINAL A,NAOKI O,JUNKO K,et al.Gene silencing with siRNA targeting E6/E7 as a therapeutic intervention against head and neck cancer-containing HPV16 cell lines[J].Acta Oto-laryngologica,2013,133(7):761-771.

[6]L STEWART M.Developing guidelines for cervical cancer prevention in the face of diagnostic complexity[J].Journal of the National Comprehensive Cancer Network Jnccn,2014,12(3):349-353.

[7]BI Q,ZHANG L,ZHAO Z,et al.Human papillomavirus prevalence andgenotypesdistributionamongfemaleoutpatientsin Qingdao,East China[J].J Med Virol,2015,87(12):2114-2121.

[8]石艷艷,羅紅權.成都地區女性感染人乳頭瘤病毒基因型分布[J].廣東醫學,2014,35(4):585-587.

[9]JING L,ZHONG X,ZHONG Z,et al.Prevalence of Human papillomavirus Infection in Guangdong province,China:a population-based survey of 78,355 women[J].Sexually Transmitted Diseases,2014,41(12):732-738.

[10]鐘威達,黎惠紅,王雄,等.海南黎族婦女宮頸人乳頭瘤病毒感染現狀及相關因素分析[J].中國現代醫學雜志,2016,26(1):89-93.

[11]聶妹芳,李登清,黃民主,等.11461例婦科門診患者HPV亞型感染狀況的研究[J].中國現代醫學雜志,2011,21(27):3434-3438.

[12]WANG S,WEI H,NING W,et al.The prevalence and role of human papillomavirus genotypes in primary cervical screening in the northeast of China[J].Bmc Cancer,2012,12(1):1-10.

（童穎丹 編輯）

Distribution of genotypes of human papillomavirus among 6,228 infected women in Huaian district

Hong-lin Li1,Xiao-lin Liu2,Ai-xia Guo3,Feng-jun Shi4
(1.Clinical Laboratory,2.Central Laboratory,3.Department of Gynecology and Obstetrics, 4.Department of Infection Management,Huaian First Hospital,Nanjing Medical University,Huaian,Jiangsu 223300,China)

Objective To investigate the human papillomavirus(HPV)infection prevalence and subtype distribution among women in Huaian district,in order to provide a scientific basis for intervention,prevention and epidemiological studies of HPV infection.Methods A total of 21 vaginal HPV DNA types were tested among 6,228 women using DNA flow-though hybridization genotyping technique.Results The overall HPV infection rate of involved women in Huaian district was 37.73%(2,350/6,228).The infection rate of single lowrisk HPV subtype was 4.88%(304/6,228),that of single high-risk HPV subtype rate was 27.76%(1,729/ 6,228)and the multiple-infection rate was 5.09%(317/6,228).There were significant differences in HPV infection rates among different age groups(P＜0.05),the paragraph of HPV infection rate in different age group presented as"U"shaped curve.Among the 2,350 HPV-positive specimens,positive infection rates of single, double,three,four and five(including more than five)genotypes were 66.03%(1,555),22.76%(536),7.09% (167),2.93%(69)and 1.19%(23),respectively.The top five high-risk HPV subtypes were HPV16(15.23%), HPV52(11.79%),HPV58(9.58%),HPV53(7.00%)and HPV33(6.95%).The top three low-risk HPV subtypes were CP8304(HPV81,7.14%),HPV11(5.30%)and HPV6(4.31%).Conclusions The rate of HPV in－fection is high in the women of Huaian district.HPV16,52 and 58 are the most common subtypes among high-risk HPV infections,while HPV81,11 and 6 are the most common subtypes among low-risk HPV infections.The peak infection age is≤25 years and≥56 years.

human papillomavirus;genotype;cervical cancer;multiple infection

R737.33

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.23.027

1005-8982（2016）23-0128-04

2016-04-11

時峰俊，E-mail：406329841@qq.com

行病學研究提供依據。方法采用核酸分子雜交法篩查6 228例淮安女性生殖道21種HPV基因亞型。結果

淮安地區女性HPV總感染率為37.73%（2 350/6 228），其中單純低危亞型感染率為4.88%（304/6 228），單純高危亞型感染率為27.76%（1 729/6 228），混合型感染率為5.09%（317/6 228）。不同年齡段之間HPV感染率比較，差異有統計學意義（P＜0.05），感染率與年齡段呈近似U形曲線。2 350例HPV陽性標本中，單重、雙重、三重、四重、五重及以上基因型陽性構成比分別為66.03%（1 555例）；22.76%（536例）、7.09%（167例）、2.93%（69例）和1.19%（23例）；高危亞型陽性構成比前5位分別為HPV16（15.23%）、HPV52（11.79%）、HPV58（9.58%）、HPV53（7.00%）和HPV33（6.95%）；低危亞型陽性構成比前3位分別為CP8304（HPV81）（7.14%）、HPV11（5.30%）、HPV6（4.31%）。結論淮安地區女性HPV感染率較高，高危亞型感染以HPV16、52和58為主，低危亞型感染以HPV81、11和6為主。感染高峰年齡段為≤25歲和≥56歲。