1例類抗—Ec引起的聚凝胺法與抗人球蛋白法敏感性對比分析

隨著輸血醫學的快速發展，輸血安全越來越受到臨床廣泛的重視，紅細胞輸注前的交叉配血就顯得尤為重要，現在臨床上廣泛應用的檢測IgG類不規則抗體的方法主要有聚凝胺法和抗人球蛋白法。兩種方法對不同紅細胞抗體敏感性各有不同，近期在臨床檢測中發現一例類抗-Ec抗體，該抗體用抗人球蛋白法時只能檢測出抗-E抗體，只有用聚凝胺法時才能檢測出類抗-Ec抗體，現報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料 標本來自院普通外科，患者楊×× ，女，62歲，臨床診斷：直腸癌，消化道出血；現Hb：53g/L；曾有3次輸血史，共5～6單位，最近一次輸血為2個多月前。

1.2試劑 抗-A、抗-B血清（批號：20130509）、IgM抗D（批號：20130325）、反定型ABO紅細胞（批號：20145325）、IgM抗C（批號：20123003）、IgM抗E（批號：20133201）、IgM抗c（批號：20133102）、IgM抗e（批號：20123304）多特異性抗人球蛋白試劑（批號：20130904）、聚凝胺試劑（批號：20131113）、篩選細胞（批號：20145614）鑒定細胞（批號：20145703）均來自上海血液生物醫藥有限公司。酸放散試劑PeliStrip kit（批號：8000202877）來自Sanquin。

1.3方法 ABO正反定型（試管法）、RH分型（試管法）、抗體篩查和鑒定（鹽水：IS，抗人球蛋白法：IAT，聚凝胺法：Poly），放散實驗（酸放散）均嚴格按照試劑說明書及本室標準操作規程進行。

2結果

2.1患者ABO血型及RhD結果檢測 試管法結果為A型，RhD陽性。

2.2患者血清抗體篩查 患者血清聚凝胺法與抗人球蛋白法結果均為與Ⅰ，Ⅲ譜細胞出現凝集，根據圖譜初步判定可能含有抗-E和/或抗-c抗體，且自身對照結果陽性。

2.3患者紅細胞Coombs實驗（直接抗人球蛋白實驗）：陽性。

2.4患者血清抗體鑒定 根據譜細胞圖譜分析可鑒定患者血清中含有不規則抗-E抗體（見表1的IS與IAT）。

2.5患者Rh血型分型 試管法結果顯示患者Rh分型為Ccee

2.6患者紅細胞酸放散后放散液的抗體鑒定 上述結果初步得出結論為檢出不規則抗-E抗體，由于患者直抗實驗陽性，所以對患者紅細胞做了酸放散試驗，并用放散液進行抗體鑒定（放散液IS與放散液IAT）：顯示放散液與含有E抗原和/或c抗原的譜細胞有強凝集反應，而與其他抗原均為弱反應。根據譜細胞格局懷疑患者紅細胞放散液中含有類抗-Ec抗體，見表1。

2.7聚凝胺法復查患者血清的抗體鑒定 放散液中含有類抗-Ec抗體，但在患者血清中卻只檢出抗-E抗體，鑒于聚凝胺方法對Rh系統具有更高的敏感型，我們又用聚凝胺方法進行一次抗體鑒定復查，凝聚胺法中患者血清與含Ec抗原的譜細胞會有強凝集反應。通過聚凝胺法抗體鑒定證實患者血清中含有抗-Ec抗體，見表2。

2.8患者紅細胞放散液用Rh分型為CCee紅細胞吸收后再放散的放散液進行抗體鑒定 上述實驗已初步鑒定患者血清中含有抗-Ec抗體，而患者c抗原陽性，所以該抗體應為類抗體性質的不規則抗體，為了進一步證實該結論，我們用相應抗原陰性的紅細胞（即CCee）去吸收該抗體以確定其類抗體性質，該抗-Ec抗體能被CCee紅細胞吸收并放散下來，所以可以確定該抗-Ec抗體為類抗體，見表3。

3討論

有一類抗體本身具有一定的特異性，同時又能被\"抗原陰性\"的紅細胞全部吸收，顯示出一種廣譜的特異性，Lssitt[1]將這些顯示出特異性的抗體成為\"類抗體\"，有報道認為，Rh抗原是溫自身抗體最常見的靶抗原，在自身溶血性貧血患者，抗-e自身抗體最常見，其次抗-c，-E，-D，-C也有發生[2-4]。本文實驗結果表明檢出一例類抗-Ec抗體，本案例的特別之處在于用抗人球蛋白法只檢測出患者血清中有抗-E抗體而未能檢測出有類抗體性質的抗體，如果不是后續加做的凝聚胺法復查及酸放散液抗體鑒定則有可能漏檢類抗-c性質的類抗體，由于患者Rh分型不存在E抗原，而在放散液中能檢測出抗-E抗體，再結合其輸血史，可初步判定抗-E抗體應同為類抗體性質。如果在血清中檢出特異性抗體， 則可使用不含該特異性（抗體所對應抗原）的紅細胞進行吸收放散試驗， 以鑒別該抗體為同種抗體還是類同種特異性自身抗體。我們將患者紅細胞放散液用CCee紅細胞進行吸收后再進行酸放散，再用相應細胞對抗體進行鑒定，進一步證實了檢出的抗體為類抗-Ec抗體見表3。在一些情況下， 患者體內的類同種特異性自身抗體所具有的\"特異性\"， 可以針對患者自身紅細胞上的抗原。此時可不必考慮輸注的血液要與患者的紅細胞抗原類型相同，而要選擇避開類抗體特異性的紅細胞輸注[5]。有報道顯示， 避開類抗體特異性的紅細胞可以明顯延長體內存活時間[6]。

很多醫院輸血科在日常工作中當發現患者血漿中含有不規則抗體時，由于試劑不全的原因在交叉配血時可能都選擇盲配，并且隨著自動化儀器的日益普及，抗人球蛋白法配血日漸成為各醫院的主流。從本案例看來，抗人球蛋白法對Rh系統的某些抗體敏感性不如聚凝胺法，甚至有漏檢的可能性，即使采用Rh同型輸注的方法，也不能避免類同種抗體的影響，所以輸血科日常工作的交叉配血中聚凝胺法仍然不可或缺！

參考文獻：

[1]（英）杰夫.丹尼爾.人類血型[M].朱自嚴，主譯.第2 版.北京：科學出版社，2007：292.

[2]Garratty G. Specificity of autoantibodies reacting optimally at 37℃[J]. Immunohematology， 1999，9（15）：24-40.

[3]Bell CA，Zwicker H，Sacks HJ. Autoimmune hemolytic anemia： routine serologic evaluation in a general hospital population.Am J Clin Pathol 1973，60：903-911.

[4]Issutt PD，Pavone BG，Goldfinger D，et al.Anti-Wrb ，and other Autoantibodies responsible for positive direct antiglobulin tests in 150 individuals.Br J Haematol 1976，34：5～18.

[5]向東，劉曦，王健蓮，等.紅細胞溫自身抗體的血清血特點分析及配血對策[J].中國輸血雜志，2008，21（12）：924-926.

[6]Mary A. Direct Antiglobulin Testing：Systematic Problem-Solving[M].//Sally V.Rudmann Serologic Problem-Solving：A Systematic Approach for Improved Practice 1th， AABB Press Bethesda Maryland， 2005：87-88.

編輯/丁一