自噬通過抑制C/EBP同源蛋白表達減輕氧化低密度脂蛋白誘導的巨噬細胞凋亡*

田 華， 馬守原， 康攀攀， 郝 奇， 焦 鵬， 邵夏炎， 徐曉燕， 秦樹存△， 姚樹桐,△

(泰山醫學院 1動脈粥樣硬化研究所，山東省高校動脈粥樣硬化重點實驗室，2基礎醫學院，山東 泰安 271000；3中國人民解放軍總醫院南樓心血管內科，北京 100853；4承德醫學院附屬醫院，河北 承德 067000；5泰山醫學院藥學院，山東 泰安 271000)

自噬通過抑制C/EBP同源蛋白表達減輕氧化低密度脂蛋白誘導的巨噬細胞凋亡*

田 華1,2▲， 馬守原3▲， 康攀攀4， 郝 奇2， 焦 鵬1， 邵夏炎2， 徐曉燕5， 秦樹存1△， 姚樹桐1,2△

(泰山醫學院1動脈粥樣硬化研究所，山東省高校動脈粥樣硬化重點實驗室，2基礎醫學院，山東 泰安 271000；3中國人民解放軍總醫院南樓心血管內科，北京 100853；4承德醫學院附屬醫院，河北 承德 067000；5泰山醫學院藥學院，山東 泰安 271000)

目的： 研究自噬對氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)所致巨噬細胞凋亡的影響，并探討可能的分子機制。方法:體外培養RAW264.7巨噬細胞，分別給予3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA； 3 mmol/L)、雷帕霉素(rapamycin，Rap; 1 μmol/L)或4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid，PBA; 4 mmol/L)預處理1 h，再加入ox-LDL(100 mg/L)繼續培養12 h。分別采用MTT法和Annexin V-FITC雙染法檢測細胞活力和凋亡情況；相應試劑盒測定培養液乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)和細胞內caspase-3活性；采用Western blot法檢測自噬標志分子beclin-1和內質網應激標志分子葡萄糖調節蛋白78(glucose-regulated protein 78，GRP78)及促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein，CHOP)表達的變化;采用激光共聚焦顯微鏡觀測細胞內微管相關蛋白1輕鏈3(microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3)的變化。結果:ox-LDL處理可顯著降低巨噬細胞活力，并增加LDH漏出、凋亡率及caspase-3活性；ox-LDL對細胞的上述損傷作用可被自噬抑制劑3-MA促進而被自噬誘導劑雷帕霉素拮抗。ox-LDL誘導巨噬細胞自噬反應，表現為beclin-1表達上調，LC3顆?；@著；ox-LDL對自噬的誘導作用可被3-MA抑制而被Rap增強。另外，3-MA可促進ox-LDL所誘導的CHOP進一步上調，而Rap可明顯拮抗ox-LDL對CHOP的誘導作用。PBA可顯著抑制ox-LDL所誘導的GRP78上調，且明顯減輕ox-LDL所誘導的自噬反應，表現為beclin-1表達下調，LC3顆?；潭葴p弱。結論:內質網應激介導ox-LDL對巨噬細胞自噬的誘導作用，而一定程度的自噬可通過抑制CHOP表達從而減輕ox-LDL所誘導的巨噬細胞凋亡。

自噬； 內質網應激； 氧化低密度脂蛋白； 巨噬細胞； 細胞凋亡

動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)作為心腦血管疾病的主要病理基礎，嚴重危害人類的健康。在AS發生發展尤其晚期粥樣硬化斑塊破裂過程中，巨噬源性泡沫細胞凋亡起到至關重要的作用，一方面可直接導致凋亡的平滑肌細胞和巨噬細胞不能被有效吞噬，促進脂質核心的形成及增大，另一方面富含游離膽固醇的凋亡巨噬細胞通過釋放基質降解蛋白酶損傷纖維帽，并產生白細胞介素-1β、腫瘤壞死因子-α等炎癥因子，引起繼發性炎癥反應和壞死，從而促進斑塊不穩定[1]。因此，巨噬細胞已被認為是AS防治、降低急性心血管事件發生率的重要干預靶點[2]，而進一步闡明巨噬細胞凋亡機制及其影響因素無疑具有重要意義。文獻報道[3-4]和本課題組既往研究[5-6]表明，C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein，CHOP)介導的內質網應激(endoplasmic reticulum stress，ERS)凋亡途徑在巨噬細胞凋亡和易損斑塊形成中具有重要作用，而載脂蛋白A1模擬肽D4F和蜂膠醇提物可通過抑制CHOP表達減輕氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)所誘導的巨噬細胞凋亡。

自噬是細胞將受損、變性的蛋白質以及損傷細胞器運輸到溶酶體進行消化降解，以胞質內出現自噬體為特征的細胞自我消化過程，是細胞在應激情況下用來維持細胞內環境穩定和存活的一種重要防御機制[7]。近年來研究表明，AS斑塊中存在巨噬細胞自噬，且自噬的激活可減輕AS病變，增強斑塊的穩定性[8]，但其機制尚未完全闡明。新近研究報道ERS誘導劑衣霉素可通過誘導自噬反應增強AS斑塊的穩定性[9]，提示ERS與自噬可能存在交互作用，并參與AS的發生發展；而本課題組既往研究[10]表明，ox-LDL可誘導巨噬細胞自噬，且一定程度的自噬可減輕ox-LDL所誘導的巨噬細胞損傷，但其機制尚不清楚。本工作在ox-LDL誘導的巨噬細胞損傷模型上，研究自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)和誘導劑雷帕霉素(rapamycin，Rap)對ox-LDL所誘導的細胞凋亡及CHOP表達的影響，并觀察ERS抑制劑4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid，PBA)對ox-LDL所致自噬反應的影響，以探討ERS與自噬在巨噬細胞凋亡中的交互作用。

材 料 和 方 法

1 材料與試劑

ox-LDL購自北京協生生物科技有限公司；DMEM高糖培養基和胎牛血清購自Gibco； RIPA裂解液和BCA蛋白定量試劑盒為Solarbio產品；兔抗葡萄糖調節蛋白78(glucose-regulated protein 78，GRP78)、CHOP、beclin-1和微管相關蛋白1輕鏈3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)多克隆抗體分別購自Santa Cruz和Cell Signaling Technology；Rap、3-MA、PBA和兔抗β-actin抗體購自Sigma；辣根過氧化物酶標記山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 488標記驢抗兔 II 抗分別購自北京中杉金橋和Molecular Probes；四甲基偶氮唑藍[3-(4,5-dimeth-ylthiazol-2-y-l)-2,5-diphenyl-2H- tetrazolium bromide，MTT]和Annexin V-FITC凋亡測定試劑盒分別購自Genview和南京凱基公司；增強化學發光(enhanced chemiluminescence，ECL)試劑盒和PVDF膜分別為Pierce和Millipore產品；Caspase-3和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)活性測定試劑盒分別購自碧云天生物和南京建成生物技術公司；其余試劑均為分析純產品。

2 方法

2.1 細胞培養與實驗分組 鼠源RAW264.7巨噬細胞購自中國科學院上海生物化學與細胞生物學研究所細胞庫，用含10%胎牛血清、1×105U/L青霉素和100 mg/L鏈霉素的DMEM高糖培養基在37 ℃、5% CO2的培養箱中培養。處理前換無血清培養基同步化12 h，然后隨機分為如下5組：正常對照(control)組：培養液中常規培養；ox-LDL組：培養液中加入100 mg/L ox-LDL；自噬抑制劑3-MA預處理組(ox-LDL+3-MA組)：培養液中先加入3 mmol/L 3-MA預處理1 h，再加入100 mg/L ox-LDL；自噬誘導劑雷帕霉素預處理組(ox-LDL+Rap組)：培養液中先加入1 μmol/L Rap預處理1 h，再加入100 mg/L ox-LDL；ERS抑制劑PBA預處理組(ox-LDL+PBA組)：培養液中先加入4 mmol/L PBA預處理1 h，再加入100 mg/L ox-LDL。培養 12 h 收集細胞。

2.2 細胞活力和LDH的測定 接種于96孔板的細胞經處理后，按既往報道的MTT分析方法[11]檢測細胞活力。以正常對照組細胞活力為100%，其余各組細胞活力以其吸光度(A)值占對照組A值的百分比表示。按照LDH活性檢測試劑盒說明書測定培養上清中LDH活性。

2.3 Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測細胞凋亡 細胞經處理后，收集并重懸于500 μL上樣緩沖液中，與5 μL Annexin V-FITC和5 μL碘化丙啶(propidium iodide，PI)室溫避光孵育15 min。細胞凋亡率由流式細胞儀(Becton-Dickinson)分析測定。總細胞凋亡率(%)=早期凋亡率(Annexin+/PI-)+晚期凋亡率(Annexin+/PI+)。

2.4 細胞內caspase-3活性的測定 按照試劑盒說明書操作，即細胞經處理后，收集并用PBS洗滌1次，以裂解液冰浴裂解15 min，4 ℃條件下18 000×g離心15 mim，采用Bradford法檢測上清液中蛋白濃度。在96孔板中將10 μL裂解上清液、80 μL反應緩沖液和10 μL caspase-3底物混合并在37 ℃條件下孵育2 h。在多功能酶標儀(Tecan)上于405 nm處讀取吸光度，通過相同條件下獲得的標準曲線計算出樣品中caspase-3活性，并以正常對照組細胞caspase-3活性為100%，其余各組細胞caspase-3活性以其占正常對照組的百分比表示。

2.5 免疫熒光細胞化學法檢測LC3的表達 將細胞培養于放有無菌蓋玻片的6孔培養板內，細胞經處理后， PBS潤洗3次，4%多聚甲醛固定20 min，PBS潤洗后以0.1% Triton X-100室溫處理4 min，10%驢血清封閉，滴加1∶100比例稀釋的兔抗小鼠LC3的 I 抗，4 ℃過夜后滴加Alexa Fluor 488標記驢抗兔 II 抗(1∶1 000)，37 ℃孵育30 min，并以DAPI復染細胞核(藍色)，PBS充分潤洗后以抗淬滅劑封片。激光共聚焦顯微鏡 (Nikon)下觀察，LC3陽性表達呈綠色，呈顆粒狀聚集表明發生自噬反應。

2.6 Western blot分析 細胞經處理后，按照RIPA蛋白提取試劑盒說明書提取各組細胞蛋白，經定量、變性處理并進行SDS-PAGE(8%～10%分離膠)后電轉印至PVDF膜，5%脫脂奶粉封閉后，分別用兔抗beclin-1 (1∶800)、CHOP (1∶500)、GRP78 (1∶400)和β-actin抗體(1∶1 000)4 ℃孵育過夜，洗膜后用辣根過氧化物酶標記的相應 II 抗孵育2 h。免疫條帶用ECL法顯示，應用化學發光成像系統(上海歐翔科學儀器有限公司)進行圖像采集，采用Image-Pro Plus軟件分析蛋白條帶累積吸光度(integrated absorbance，IA)值，以靶蛋白IA值/β-actinIA值的比值反映靶蛋白相對水平。

3 統計學處理

用SPSS 13.0統計軟件進行單因素方差分析，結果用均數±標準差(mean±SD)表示。組間兩兩比較應用SNK法，以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 3-MA和雷帕霉素對ox-LDL所誘導的巨噬細胞活力的影響

分別采用MTT法和LDH活性檢測試劑盒測定巨噬細胞活力和LDH漏出情況，結果顯示，以100 mg/L ox-LDL處理RAW264.7細胞12 h可明顯造成細胞損傷，表現為細胞活力降低和LDH漏出增加(P<0.01)；ox-LDL對巨噬細胞的上述損傷作用可被自噬抑制劑3-MA進一步加重，但可被自噬誘導劑Rap所拮抗，與ox-LDL處理組比較差異均具有統計學顯著性(P<0.05)，表明自噬可減輕ox-LDL所誘導的細胞損傷,見圖1。

2 3-MA和雷帕霉素對ox-LDL所誘導的巨噬細胞凋亡的影響

Annexin V-FITC/PI雙染色法結果顯示，ox-LDL處理組細胞凋亡率明顯增加，為正常對照組的3.59倍(P<0.01)；與ox-LDL處理組比較，3-MA預處理組細胞凋亡率增加72.1%(P<0.01)，而Rap預處理組細胞凋亡率下降37.0%(P<0.05)。

Figure 1.The effect of 3-MA and Rap on the cell viability of RAW264.7 macrophages induced by ox-LDL. The cells were pretreated with or without 3-MA (3 mmol/L) or Rap (1 μmol/L) for 1 h and then stimulated with ox-LDL (100 mg/L) for 12 h. Mean±SD.n=6.**P<0.01vscontrol group;#P<0.05vsox-LDL group.

圖1 3-MA和雷帕霉素對ox-LDL所誘導的巨噬細胞活力的影響

Caspase-3是細胞凋亡過程中的關鍵蛋白酶，檢測其活性變化可進一步證實自噬對ox-LDL所致細胞凋亡的影響。3-MA可進一步促進ox-LDL所誘導的caspase-3活性,而Rap則拮抗ox-LDL對caspase-3的誘導作用(P<0.05)，表明自噬可減輕ox-LDL所誘導的細胞凋亡，見圖2。

3 3-MA和雷帕霉素對ox-LDL所誘導的CHOP表達的影響

Beclin-1是自噬啟動的關鍵分子；自噬發生后，LC3-I經泛素樣加工修飾形成 LC3-II，進而整合到自噬體膜中，在自噬體形成中起重要作用，因此beclin-1和LC3可作為自噬的標志分子。分別采用Western blot(圖3)和免疫細胞化學法(圖4)檢測beclin-1表達和LC3聚集情況，結果顯示，與正常對照組比較，以ox-LDL處理RAW264.7細胞 12 h，beclin-1表達水平明顯增加(P<0.01)，LC3顆?；憩F顯著，表明ox-LDL可誘導巨噬細胞自噬；ox-LDL的上述作用可被3-MA抑制(P<0.05); Rap可稍增加ox-LDL誘導的beclin-1的表達，但差異沒有統計學意義。

Western blot實驗結果顯示，以3-MA抑制巨噬細胞自噬后，ox-LDL所誘導的CHOP進一步上調(P<0.05)，而Rap可明顯拮抗ox-LDL對CHOP的誘導作用(P<0.05)，表明一定程度的自噬可減輕ox-LDL對CHOP的誘導作用。

Figure 2.The effect of 3-MA and Rap on the apoptosis of RAW264.7 macrophages induced by ox-LDL. A: the cell apoptosis was detected by flow cytometry and the total apoptotic cells (early-and late-stage apoptosis) were represented by the right side of the panel (Annexin V staining alone or together with PI); B: the caspase-3 activity was determined by colorimetric assay. Mean±SD.n=6.**P<0.01vscontrol group;#P<0.05,##P<0.01vsox-LDL group.

圖2 3-MA和雷帕霉素對ox-LDL所誘導的巨噬細胞凋亡的影響

4 PBA對ox-LDL所誘導的自噬反應的影響

為了進一步證明ERS是否可介導ox-LDL對巨噬細胞自噬的誘導作用，課題組又探討了ERS抑制劑PBA對ox-LDL所致RAW264.7細胞自噬的影響，結果顯示，PBA可顯著抑制ox-LDL所誘導的ERS標志分子GRP78表達(P<0.01)，且明顯減輕ox-LDL所誘導的自噬反應，表現為beclin-1表達下調(P<0.05)，LC3顆粒化程度減弱，見圖5、6。

Figure 3.The effect of 3-MA and Rap on the expression of beclin-1 and CHOP in RAW264.7 macrophages. Mean±SD.n=3.**P<0.01vscontrol group;#P<0.05vsox-LDL group.

圖3 3-MA和雷帕霉素對巨噬細胞beclin-1和CHOP表達的影響

Figure 5.The effect of PBA on the expression of GRP78 and beclin-1 in the RAW264.7 macrophages. The cells were pretreated with or without PBA (4 mmol/L) for 1 h and then stimulated with ox-LDL (100 mg/L) for 12 h. The protein levels of GRP78 and beclin-1 were evaluated by Western blot. Mean±SD.n=3.**P<0.01vscontrol group;#P<0.05,##P<0.01vsox-LDL group.

圖5 PBA對巨噬細胞GRP78和beclin-1表達的影響

Figure 4.The effect of 3-MA and Rap on the expression of LC3 in RAW264.7 macrophages. The cells were treated as described in figure 1 and then immunofluorescence experiment showed LC3 visualized by Alexa Fluor 488 (green) and nuclei stained with DAPI (blue). The representative fluorescent images captured using a laser scanning confocal microscope were showed.

圖4 3-MA和雷帕霉素對巨噬細胞LC3表達的影響

Figure 6.The effect of PBA on the expression of LC3 in RAW264.7 macrophages. The cells were treated as described in figure 5 and then immunofluorescence experiment showed LC3 visualized by Alexa Fluor 488 (green) and nuclei stained with DAPI (blue). The representative fluorescent images captured using a laser scanning confocal microscope were showed.

圖6 PBA對巨噬細胞LC3表達的影響

討 論

自噬是指細胞受到饑餓、氧化應激等因素刺激后在自噬相關基因(autophagy-associated gene，ATG)的調控下，利用溶酶體降解錯誤折疊、受損、衰老蛋白及細胞器進而再利用的過程，該過程以包繞胞漿成分的具有雙層膜結構的自噬體為主要特征。近年來研究表明，自噬與AS密切相關，廣泛發生于AS發生發展中的血管內皮、平滑肌及巨噬細胞，并參與其生物活性的調控[7, 12]。研究報道，在粥樣硬化斑塊中存在自噬反應[8]，ox-LDL及其主要氧化成分7-酮膽甾醇(7-ketocholesterol，7-KC)可誘導血管平滑肌和內皮細胞自噬，而自噬缺陷或自噬抑制劑3-MA可加重ox-LDL、7-KC所致的血管平滑肌和內皮細胞損傷[13-14]。另有文獻報道介導自噬過程的關鍵蛋白ATG5缺陷可增加粥樣硬化斑塊中巨噬細胞凋亡，促進斑塊壞死，而給予雷帕霉素誘導自噬則降低斑塊的易損性[8, 14]，提示自噬作為一種細胞自穩態調控機制，可能對AS進展具有延緩作用。本實驗結果顯示，自噬抑制劑3-MA加重了ox-LDL所誘導的RAW264.7巨噬細胞損傷，表現為細胞活力降低，LDH漏出、細胞凋亡率及caspase-3活性進一步增加；而自噬誘導劑雷帕霉素則可減輕ox-LDL所誘導的上述細胞損傷，表明一定程度的自噬可減輕ox-LDL所誘導的巨噬細胞凋亡。

大量研究表明ERS介導的巨噬細胞凋亡與AS 斑塊形成和破裂密切相關。內質網是調控細胞內蛋白合成、折疊、修飾和運輸以及鈣穩態的重要細胞器。氧化應激、膽固醇超負荷、高血糖等多種因素均可導致內質網功能紊亂，出現以未折疊/錯誤折疊蛋白聚集和鈣穩態失衡為主要特征的ERS反應[15]。一定程度的ERS通過暫時性抑制蛋白合成、上調GRP78等分子伴侶和激活內質網相關蛋白降解途徑，維持內質網功能和細胞生存。但是過強或過久的ERS則會誘發細胞凋亡，導致不可逆損傷，其中由CHOP介導的ERS凋亡途徑在巨噬細胞凋亡尤其是晚期不穩定粥樣斑塊形成中的作用已被大量研究證實[3, 4, 16]。而且我們前期工作已證實ERS-CHOP信號途徑介導ox-LDL誘導的巨噬細胞凋亡，而D4F和蜂膠黃酮及其單體槲皮素通過抑制該信號途徑減輕ox-LDL對巨噬細胞凋亡的誘導作用[5-6, 17-18]。He等[14]報道7-KC可通過氧化應激觸發人動脈平滑肌細胞ERS和自噬的發生，而3-MA抑制自噬則加重7-KC所誘導的ERS反應和細胞死亡，雷帕霉素誘導自噬則減輕7-KC的上述作用。本實驗結果顯示，ox-LDL對CHOP的誘導作用被3-MA進一步上調，而被雷帕霉素所拮抗，提示一定程度的自噬可能通過抑制ox-LDL對CHOP的上調作用減輕巨噬細胞凋亡。

ERS時產生的大多數可溶性未折疊或錯誤折疊蛋白優先通過內質網相關降解途徑(ER-associated degradation，ERAD)降解。然而當未折疊或錯誤折疊蛋白過多超出ERAD的清除能力或ERAD功能受損時，將會形成聚泛素化、穩定難溶且對蛋白酶體功能有一定毒性的蛋白聚集物，此時可通過激活自噬清除這些有毒聚集物，因此,ERS是激活自噬反應的重要因素，且與自噬存在交互作用[19]。Ma等[9]報道ERS誘導劑衣霉素可通過誘導自噬反應增強粥樣硬化斑塊的穩定性。本實驗結果顯示，ERS抑制劑PBA可明顯減輕ox-LDL所誘導的自噬反應，提示ERS介導ox-LDL對巨噬細胞自噬的誘導作用。

綜上所述，ERS介導ox-LDL對巨噬細胞自噬的誘導作用，而一定程度的自噬可通過抑制CHOP的表達減輕ox-LDL所誘導的巨噬細胞凋亡。

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(責任編輯： 陳妙玲， 余小慧)

Autophagy protects macrophages from oxidized low-density lipoprotein-induced apoptosis by inhibiting C/EBP homologous protein expression

TIAN Hua1, 2, MA Shou-yuan3, KANG Pan-pan4, HAO Qi2, JIAO Peng1, SHAO Xia-yan2, XU Xiao-yan5, QIN Shu-cun1, YAO Shu-tong1, 2

(1InstituteofAtherosclerosis,KeyLaboratoryofAtherosclerosisinUniversitiesofShandong,2CollegeofBasicMedicalSciences,TaishanMedicalUniversity,Taian271000,China;3DepartmentofCardiovascularMedicineinSouthBuilding,ChinesePLAGeneralHospital,Beijing100853,China;4AffiliatedHospitalofChengdeMedicalUniversity,Chengde067000,China;5CollegeofPharmacy,TaishanMedicalUniversity,Taian271000,China.E-mail:shucunqin@hotmail.com;yst228@126.com)

AIM: To investigate the protective effect of autophagy on oxidized low density lipoprotein (ox-LDL)-induced macrophage apoptosis and the underlying molecular mechanisms. METHODS: The RAW264.7 macrophages were pretreated with 3 mmol/L 3-methyladenine (3-MA), 1 μmol/L rapamycin (Rap) or 4 mmol/L 4-phenylbutyric acid (PBA) respectively for 1 h and then treated with ox-LDL (100 mg/L) for 12 h. The cell viability and apoptosis were determined by MTT assay and flow cytometry with Annexin V-FITC/ PI staining, respectively. The activities of lactate dehydrogenase (LDH) in the medium and caspase-3 in the cells were determined by detection kits. The protein levels of beclin-1 (a molecular marker of autophagy), glucose-regulated protein 78 (GRP78, an endoplasmic reticulum stress marker) and C/EBP homologous protein (CHOP, a key-signaling component of endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis) were examined by Western blot. Microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3, another molecular marker of autophagy) was observed under laser scanning confocal microscope.RESULTS: Treatment of the RAW264.7 macrophages with ox-LDL at 100 mg/L for 12 h resulted in significant decrease in cell viability, and dramatic elevation in LDH leakage, cell apoptosis and caspase-3 activity, which were promoted by 3-MA (an autophagy inhibitor) and inhibited by Rap (an autophagy inducer). ox-LDL induced autophagy in the macrophages as assessed by beclin-1 upregulation and frequent granulation of LC3, which were inhibited by 3-MA and promoted by Rap. Interestingly, 3-MA enhanced, while Rap blocked, the CHOP upregulation induced by ox-LDL. Moreover, PBA (endoplasmic reticulum stress inhibitor) significantly inhibited ox-LDL-induced GRP78 upregulation and autophagy as determined by the attenuation of beclin-1 upregulation and frequent granulation of LC3. CONCLUSION: Endoplasmic reticulum stress mediates ox-LDL-induced autophagy in macrophages, and moderates activation of autophagy may protect macrophages from ox-LDL-induced apoptosis by inhibiting CHOP expression.

Autophagy; Endoplasmic reticulum stress; Oxidized low density lipoprotein; Macrophage; Apoptosis

1000- 4718(2016)12- 2192- 07

2016- 07- 04

2016- 09- 13

國家自然科學基金資助項目(No. 81570410； No. 81370381)；國家級大學生創新訓練項目(No. 201510439126； No. 201510439100)

R363.2

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2016.12.011

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