Wip1相關研究進展*

劉可美， 顏紅兵

(國家心血管病中心， 中國醫學科學院阜外醫院， 北京協和醫學院， 北京 100037)

·綜 述·

Wip1相關研究進展*

劉可美， 顏紅兵△

(國家心血管病中心， 中國醫學科學院阜外醫院， 北京協和醫學院， 北京 100037)

Wip1； 腫瘤； 衰老； 免疫； 炎癥； 代謝

Fiscella等[1]首次通過γ射線或UV射線誘導發現了野生型p53誘導的磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1，Wip1),并且證實Wip1的表達依賴于p53。編碼Wip1蛋白的基因稱為PPM1D，定位于人染色體17q23和小鼠第11號染色體上，PPM1D編碼的mRNA在很多器官組織包括睪丸和心臟中表達[2]。人Wip1蛋白包含605個氨基酸，分子量大約為66 kD，屬于蛋白磷酸酶2C(type 2C protein phosphatase，PP2C)家族[3]。Wip1蛋白序列分為2個主要的結構域，N端第1～375個氨基酸是高保守的磷酸酶結構域，第376～605個氨基酸是低保守的非催化區，可能與Wip1的核定位有關[4]。很多應激如電離輻射、紫外線照射、茴香霉素、過氧化氫、甲烷磺酸鹽和炎癥因子等可以誘導Wip1表達。誘導活化后，Wip1可與應激通路中一些重要的信號蛋白如p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK)結合并使其去磷酸化，從而使其失活或活化。通過去磷酸化作用，Wip1在機體內發揮著調節細胞周期、抑制凋亡、抑制DNA修復和抑制炎癥等功能[5]。

1 Wip1的生理調節作用

Wip1在個體發育過程中起著重要的生理調節作用。Wip1基因敲除(Wip1 knockout, Wip1-KO)小鼠有一系列發育異常，包括雄鼠發育不全、生殖器官萎縮、生殖能力下降和壽命縮短[3]。敲除Wip1基因的雄鼠輸精管和附睪發育異常導致生殖功能缺陷，而壽命縮短可能是激素水平失衡或類固醇受體活化受限引起的。Wip1可以通過增強類固醇受體共激活劑1的固有活性刺激類固醇受體，從而正向調節雌激素、黃體酮和雄激素受體活性[6]。此外，Wip1在成年神經細胞生成中也有著重要的調節作用。Wip1缺失的神經干細胞的細胞周期延長，細胞聚集在G2期，細胞內p53磷酸化上調，導致依賴p53的細胞周期抑制因子如p21和Reprimo表達增加。Zhu等[7]應用Wip1和p53雙基因敲除小鼠證實p53在Wip1調節神經干細胞中的作用。在Wip1-KO小鼠中敲除p53可以完全逆轉Wip1缺失引起的細胞周期受損，并使神經干細胞和成神經細胞數量增多，提示Wip1可以通過p53調節神經干細胞的細胞周期[7]。其它蛋白包括p38 MAPK和毛細血管擴張共濟失調突變蛋白(ataxia-telangiectasia mutated protein, ATM)等DNA損傷修復分子也與Wip1調節成年神經細胞生成有關[8]。

2 Wip1與腫瘤

2002年，Li等[9]和Bulavin等[10]分別報道了Wip1在乳腺癌發生發展中起著重要作用。乳腺癌細胞系中，位于17q23位點的PPM1D發生擴增，其可以通過調節細胞凋亡和細胞轉化促進致癌表型[9]。Bulavin 等[10]在326例原發性乳腺癌患者中發現37例患者存在PPM1D擴增，在PPM1D擴增的8例患者中有7例患者PPM1D 的mRNA過表達。此后，Wip1在其它腫瘤中的作用陸續被報道，包括成神經管母細胞瘤[11]、胰腺癌[12]、慢性淋巴細胞白血病[13]、肺癌[14]和肝癌[15]等。

Wip1促進腫瘤發生發展的主要機制是直接或間接抑制包括p38 MAPK、ATM、細胞周期檢測點激酶2 (checkpoint kinase 2，CHK2)、鼠雙微小體2(murine double minute 2, MDM2)和p53等抑癌通路。首個被發現的Wip1作用靶點是p38 MAPK，Wip1可使p38 MAPK第180位點蘇氨酸去磷酸化，減少p38 MAPK的核定位并進一步降低p53的激酶活性[16]。雙鏈DNA損傷可激活ATM激酶，活化的ATM激酶在細胞周期、DNA修復、凋亡和腫瘤形成方面起著重要的調節作用。通過促進ATM第1 981位和第367位絲氨酸去磷酸化，Wip1可以抑制依賴ATM的DNA損傷修復通路，進而促進腫瘤的發生發展[17-18]。與ATM類似，CHK2活化在DNA損傷修復中也起著重要調節作用。體外研究顯示Wip1可以使CHK2第68位蘇氨酸去磷酸化，從而影響CHK2的活性[19]。DNA損傷引起的ATM活化可誘導MDM2第395位點絲氨酸磷酸化，減少MDM2與p53的相互作用，從而使p53趨于穩定。在Wip1作用下，MDM2第395位點絲氨酸去磷酸化，進而影響p53穩定性和抑癌作用[20]。腫瘤抑制因子p53是DNA損傷修復的中心節點，可通過調節細胞周期檢查點、DNA修復和凋亡而抑制腫瘤的發生發展。除了上述間接作用外，Wip1還可直接作用于p53第15位絲氨酸，使其去磷酸化而影響p53活性[21]。

鑒于Wip1在腫瘤中的重要作用，是否可以通過Wip1抑制劑治療腫瘤便成為進一步研究方向。2014年，Gilmartin等[22]研究發現Wip1的小分子抑制劑GSK2830371可以通過一個扁平結構域結合至Wip1的催化部位，此催化部位可將Wip1與其它PP2C家族成員區分，因而保證藥物對Wip1的高選擇性。應用GSK2830371可抑制造血腫瘤細胞系和Wip1擴增的乳腺癌細胞系生長，小鼠口服GSK2830371對抑制淋巴瘤也取得較好療效。應用GSK2830371治療可以改善DNA損傷修復通路，通過p21信號通路使細胞聚集在細胞周期的G1和G2期。聯合應用GSK2830371和阿霉素或MDM2拮抗劑nutlin-3可通過增加p53第15位點絲氨酸磷酸化和第382位點賴氨酸乙酰化誘導p53通路激活，增加p53目的基因產物表達和活化凋亡相關的蛋白酶caspase-9，從而促進細胞凋亡[23-24]。

3 Wip1與衰老

衰老可以導致很多器官功能下降，遺傳、環境和行為學因素都可能影響衰老，但具體的分子學機制尚不清楚。有研究顯示細胞周期素依賴蛋白激酶抑制蛋白(inhibitor of CDK4，Ink4α)與替代閱讀框(alternative reading frame，Arf)是衰老的標志和效應分子。隨著年紀增長，Ink4α與Arf表達增加，導致具有自我更新功能的成體干細胞的增殖減少[25]。胰腺β細胞中Wip1的表達隨年齡增長而逐漸減少[26]。老年胰腺的β細胞在應激情況下不具有增殖能力，對胰島素分泌的適應性下降而導致2型糖尿病。在Wip1-KO小鼠模型，胰島中Ink4α與Arf表達增加而β細胞增殖減少。通過減少p38 MAPK磷酸化，Wip1過表達可降低Ink4α與Arf表達，進而改善衰老引起的胰島增殖功能下降[26]。因此，Wip1可能通過p38 MAPK通路調節胰腺衰老過程。Lee等[27]發現人間充質干細胞隨年齡增長發生的增殖衰減與p38 MAPK活性增加和Ink4α表達上調有關。過表達Wip1可以抑制p38 MAPK活性并減少Ink4α增加，進而恢復間充質干細胞的增殖能力。Wip1在早期成骨細胞中高表達，但表達量隨著細胞擴增而下降，從而引起成骨細胞異常表型和纖維軟骨替代組織形成減少。穩定表達Wip1的成骨細胞對衰老和分化不敏感，對氧化應激的抵抗力更強，這種抵抗力與p38 MAPK活性相關。表達Wip1的成骨細胞還可以在較長時間內保持固有的成骨特性，從而改善移植后的軟骨再生[28]。

Wip1也能通過其它信號通路影響衰老過程。缺失Wip1的神經干細胞的表型隨年齡增加逐漸加重，某些特殊位點的p53磷酸化增加。各種刺激引起的p53活化可導致大腦中成體干細胞減少，而敲除p53可以改善Wip1-KO小鼠的神經干細胞表型[7]。在室管膜下層中僅有神經干細胞可以表達WNT信號通路抑制劑DKK3，DKK3可以抑制成神經細胞形成，敲除DKK3或藥物激活WNT信號通路可以改善年老小鼠的神經元形成和嗅覺功能[29]。因此，Wip1可以通過WNT信號通路調節衰老過程中的神經元分化。Chen等[30]發現Wip1可以通過傳統的p53通路調節造血干細胞分化以及mTORC1信號通路調節造血干細胞擴增。缺失Wip1的小鼠干細胞表現為多種衰老表型，包括細胞池增大和再生能力受損。敲除p53可以在不影響細胞衰老或凋亡的情況下改善Wip1缺失引起的造血干細胞再生缺陷[30]。與野生型小鼠胚胎成纖維細胞相比，Wip1-KO小鼠胚胎成纖維細胞在傳統培養條件下表現為早衰，細胞中組蛋白2A變異體(histone family 2A variant，H2AX)磷酸化水平增加，提示Wip1可以通過調節DNA損傷修復通路防止DNA復制過程中內源性雙鏈斷裂引起的細胞早衰[31]。

4 Wip1與免疫及炎癥

Wip1-KO小鼠存在免疫缺陷。敲除Wip1基因的小鼠出現皮膚潰瘍，淋巴器官紊亂或增生，正常組織中炎癥增加，體內B細胞和T細胞失衡，對抗原和有絲分裂刺激反應低下[32]。Schito等[33]發現Wip1在雙陰性T細胞轉變為雙陽性T細胞的過程中起著重要作用。相對于野生型小鼠，Wip1-KO小鼠的胸腺較小，胸腺中T細胞數量較少并且發育異常。在Wip1-KO小鼠中敲除p53可以使異常的胸腺表型恢復正常。中性粒細胞在宿主防御和組織修復中有重要作用。Liu等[34]報道Wip1在骨髓祖細胞向成熟中性粒細胞分化過程中表達增加，Wip1缺失可損害骨髓祖細胞向中性粒細胞的分化過程，Wip1調節中性粒細胞的發育、成熟和穩態主要是通過p38 MAPK-信號轉導及轉錄激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1, STAT1)-CCAAT/增強子結合蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein, C/EBP)信號通路。另外，Wip1對B細胞的發育成熟也起著調節作用。Wip1-KO小鼠的骨髓、外周血液和脾臟中B細胞數量明顯減少，早期B細胞前體表現出細胞內在缺陷。Wip1缺失可使B細胞中p53持續活化，引起B細胞前體池凋亡增加，敲除p53可完全挽救Wip1缺失引起的B細胞發育受損。因此，Wip1缺失通過活化p53通路使早期B細胞前體凋亡增加進而損害B細胞發育[35]。

人和小鼠中性粒細胞被激活后Wip1表達減少，膿毒癥患者體內中性粒細胞中Wip1表達水平與炎癥因子合成呈負相關，提示Wip1可能影響炎癥反應。進一步研究發現，Wip1-KO小鼠對金黃色葡萄球菌的抗菌活性更強，對脂多糖引起的急性肺損傷更敏感，中性粒細胞浸潤和炎癥反應更嚴重。Wip1缺失可通過p38 MAPK-STAT1和NF-κB信號通路提高中性粒細胞的炎癥活性和遷移[36]。與野生型小鼠相比，Wip1-KO小鼠對葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium，DSS)誘導的大腸炎更為易感，患病后生存率更低，疾病活動指數更高，大腸病理表現更嚴重。給予DSS的野生型小鼠和Wip1-KO小鼠中性粒細胞中白細胞介素17(interleukin-17，IL-17)高表達，在Wip1-KO小鼠中敲除IL-17可以明顯減輕Wip1-KO小鼠的病理表型。因此，Wip1可以通過影響免疫細胞和IL-17表達調節宿主對大腸炎的敏感性[37]。在脂多糖腹側注射誘導的成年大鼠神經炎模型中，Wip1在產生炎癥的大腦皮層活性星形膠質細胞中表達增加。體外實驗也顯示，被脂多糖活化的星形膠質細胞中Wip1表達上調，通過siRNA阻斷Wip1可以抑制星形膠質細胞中TNF-α的合成[38]。因此，Wip1在中樞神經系統免疫反應中也起著重要作用。

5 Wip1與代謝性疾病

Le Guezennec等[39]報道了Wip1可通過調節自噬和膽固醇流出影響肥胖和動脈粥樣硬化。敲除Wip1可促進脂質轉化為載脂蛋白A1(apolipoprotein A1，apoA1)和高密度脂蛋白，抑制巨噬細胞轉變成泡沫細胞，這個過程與ATM、自噬和溶酶體酸酯酶(lysosomal acid lipase，LAL)等信號通路相關。基于LAL自噬依賴的脂質流出可能是Wip1逆轉早期動脈粥樣硬化斑塊的機制。在動脈粥樣硬化形成過程的后期，Wip1可通過哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)信號通路和自噬影響斑塊進展[39]。Wip1還能調節血糖代謝過程。在小鼠胚胎成纖維細胞中敲除Wip1可降低胰島素調節的AKT活性[40]。給予低脂飲食或高脂飲食的Wip1-KO小鼠或Wip1-KO小鼠胚胎成纖維細胞中促炎細胞因子表達增加，Wip1-KO小鼠出現糖耐量異常和胰島素抵抗，炎癥反應增加可能是Wip1-KO小鼠在低脂和高脂飲食時產生胰島素抵抗的原因[40]。

綜上所述，隨著研究越來越深入和全面，作為致癌基因被大家熟知的Wip1的其它作用逐漸被發現。通過影響不同的信號通路，Wip1不僅僅作用于腫瘤的發生發展，在生理發育、衰老、免疫、炎癥和代謝方面也起著重要作用。雖然Wip1抑制劑在細胞水平和動物模型中均有較好效果，但目前仍沒有關于Wip1抑制劑在人類腫瘤中的作用和臨床療效的報道，其是否能應用于臨床并取得較好療效仍需要大量研究。Wip1可通過調節脂質代謝影響動脈粥樣硬化形成，而脂質代謝及動脈粥樣硬化與心血管疾病如心肌梗死關系密切，Wip1是否在心肌梗死及預后中有一定作用也需進一步探討。若這些問題得到解答，一定可以提供更多的關于Wip1的信息并服務于臨床實踐，以期改善臨床患者的預后。

[1] Fiscella M, Appella E. Wip1, a novel human protein phosphatase that is induced in response to ionizing radiation in a p53-dependent manner[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 1997, 94(12):6048-6053.

[2] Choi J, Appella E, Donehower LA. The structure and expression of the murine wildtype p53-induced phosphatase 1 (Wip1) gene[J]. Gene Genomics, 2000, 64(3):298-306.

[3] Lu X, Nguyen TA, Moon SH, et al. The type 2C phosphatase Wip1: an oncogenic regulator of tumor suppressor and DNA damage response pathways[J]. Cancer Metastasis Rev, 2008, 27(2):123-135.

[4] Yoda A, Xu XZ, Onishi N, et al. Intrinsic kinase activity and SQ/TQ domain of Chk2 kinase as well as N-terminal domain of Wip1 phosphatase are required for regulation of Chk2 by Wip1[J]. J Biol Chem, 2006, 281(34):24847-24862.

[5] Lowe J, Cha H, Lee MO, et al. Regulation of the Wip1 phosphatase and its effects on the stress response[J]. Front Biosci (Landmark Ed), 2012, 17:1480-1498.

[6] Proia DA, Nannenga BW, Donehower LA, et al. Dual roles for the phosphatase PPM1D in regulating progesterone receptor function[J]. J Biol Chem, 2006, 281(11):7089-7101.

[7] Zhu YH, Zhang CW, Lu L, et al. Wip1 regulates the generation of new neural cells in the adult olfactory bulb through p53-dependent cell cycle control[J]. Stem Cells, 2009, 27(6):1433-1442.

[8] Zhu YH, Bulavin DV. Wip1-dependent signaling pathways in health and diseases[J]. Prog Mol Biol Transl, 2012, 106:307-325.

[9] Li J, Yang Y, Peng Y, et al. Oncogenic properties ofPPM1Dlocated within a breast cancer amplification epicenter at 17q23[J]. Nat Genet, 2002, 31(2):133-134.

[10]Bulavin DV, Demidov OS, Kauraniemi P, et al. Amplification ofPPM1Din human tumors abrogates p53 tumor-suppressor activity[J]. Nat Genet, 2002, 31(2):210-215.

[11]Castellino RC, De Bortoli M, Lu X, et al. Medulloblastomas overexpress the p53-inactivating oncogeneWIP1/PPM1D[J]. J Neuro-oncol, 2007, 86(3):245-256.

[12]Loukopoulos P, Shibata T, Katoh H, et al. Genome-wide array-based comparative genomic hybridization analysis of pancreatic adenocarcinoma: identification of genetic indicators that predict patient outcome[J]. Cancer Sci, 2007, 98(3):392-400.

[13]López-Guerra M, Trigueros-Motos L, Molina-Arcas M, et al. Identification ofTIGARin the equilibrative nucleoside transporter 2-mediated response to fludarabine in chronic lymphocytic leukemia cells[J]. Haematologica, 2008, 93(12):1843-1851.

[14]Zajkowicz A, Butkiewicz D, Drosik A, et al. Truncating mutations ofPPM1Dare found in blood DNA samples of lung cancer patients[J]. Br J Cancer, 2015, 112(6):1114-1120.

[15]Wang B, Li D, Sidler C, et al. A suppressive role of ionizing radiation-responsive miR-29c in the development of liver carcinoma via targetingWIP1[J]. Oncotarget, 2015, 6(12):9937-9950.

[16]Takekawa M, Adachi M, Nakahata A, et al. p53-indu-cible Wip1 phosphatase mediates a negative feedback regulation of p38 MAPK-p53 signaling in response to UV radiation[J]. EMBO J, 2000, 19(23):6517-6526.

[17]Shreeram S, Demidov ON, Weng KH, et al. Wip1 phosphatase modulates ATM-dependent signaling pathways[J]. Mol Cell, 2006, 23(5):757-764.

[18]Shreeram S, Weng KH, Demidov ON, et al. Regulation of ATM/p53-dependent suppression of myc-induced lymphomas by Wip1 phosphatase[J]. J Exp Med, 2006, 203(13):2793-2799.

[19]Fujimoto H, Onishi N, Kato N, et al. Regulation of the antioncogenic Chk2 kinase by the oncogenic Wip1 phosphatase[J]. Cell Death Differ, 2006, 13(7):1170-1180.

[20]Lu X, Ma O, Nguyen TA, et al. The Wip1 phosphatase acts as a gatekeeper in the p53-Mdm2 autoregulatory loop[J]. Cancer Cell, 2007, 12(4):342-354.

[21]Lu X, Nannenga B, Donehower LA. PPM1D dephosphorylates Chk1 and p53 and abrogates cell cycle checkpoints[J]. Gene Dev, 2005, 19(10):1162-1174.

[22]Gilmartin AG, Faitg TH, Richter M, et al. Allosteric Wip1 phosphatase inhibition through flap-subdomain interaction[J]. Nat Chem Biol, 2014, 10(3):181-187.

[23]Sona P, Kamila B, Jan B, et al. Inhibition of WIP1 phosphatase sensitizes breast cancer cells to genotoxic stress and to MDM2 antagonist nutlin-3[J]. Oncotarget, 2016, 7(12):14458-14475.

[24]Sriraman A, Radovanovic M, Wienken M, et al. Coope-ration of Nutlin-3a and a Wip1 inhibitor to induce p53 activity[J]. Oncotarget, 2016, 7(22):31623-31638.

[25]Janzen V, Forkert R, Fleming HE, et al. Stem-cell ageing modified by the cyclin-dependent kinase inhibitor p16INK4a[J]. Nature, 2006, 443(7110):421-426.

[26]Wong ES, Le Guezennec X, Demidov ON, et al. p38 MAPK controls expression of multiple cell cycle inhibitors and islet proliferation with advancing age[J]. Dev Cell, 2009, 17(1):142-149.

[27]Lee JS, Lee MO, Moon BH, et al. Senescent growth arrest in mesenchymal stem cells is bypassed by Wip1-me-diated downregulation of intrinsic stress signaling pathways[J]. Stem Cells, 2009, 27(8):1963-1975.

[28]Cha BH, Lee JS, Kim SW, et al. The modulation of the oxidative stress response in chondrocytes by Wip1 and its effect on senescence and dedifferentiation during invitro expansion[J]. Biomaterials, 2013, 34(9):2380-2388.

[29]Zhu Y, Demidov ON, Goh AM, et al. Phosphatase WIP1 regulates adult neurogenesis and WNT signaling during aging[J]. J Clin Invest, 2014, 124(7):3263-3273.

[30]Chen Z, Yi W, Morita Y, et al. Wip1 deficiency impairs haematopoietic stem cell function via p53 and mTORC1 pathways[J]. Nat Commun, 2015, 6:6808.

[31]Sakai H, Fujigaki H, Mazur SJ, et al. Wild-type p53-induced phosphatase 1 (Wip1) forestalls cellular premature senescence at physiological oxygen levels by regulating DNA damage response signaling during DNA replication[J]. Cell Cycle, 2014, 13(6):1015-1029.

[32]Choi J, Nannenga B, Demidov ON, et al. Mice deficient for the wild-type p53-induced phosphatase gene (Wip1) exhibit defects in reproductive organs, immune function, and cell cycle control[J]. Mol Cell Biol, 2001, 22(4):1094-1105.

[33]Schito ML, Demidov ON, Saito S, et al. Wip1 phosphatase-deficient mice exhibit defective T cell maturation due to sustained p53 activation[J]. J Immunol, 2006, 176(8):4818-4825.

[34]Liu G, Hu X, Sun B, et al. Phosphatase Wip1 negatively regulates neutrophil development through p38 MAPK-STAT1[J]. Blood, 2012, 121(3):519-529.

[35]Yi W, Hu X, Chen Z, et al. Phosphatase Wip1 controls antigen-independent B cell development in a p53-depen-dent manner[J]. Blood, 2015, 126(5):620-628.

[36]Sun B, Hu X, Liu G, et al. Phosphatase Wip1 negatively regulates neutrophil migration and inflammation[J]. J Immunol, 2014, 192(3):1184-1195.

[37]Hu X, Wang P, Du J, et al. Phosphatase Wip1 masters IL-17-producing neutrophil-mediated colitis in mice[J]. Inflamm Bowel Dis, 2016, 22(6):1316-1325.

[38]Tan X, Zhang J, Jin W, et al. Wip1 phosphatase involved in lipopolysaccharide-induced neuroinflammation[J]. J Mol Neurosci, 2013, 51(3):959-966.

[39]Le Guezennec X, Brichkina A, Huang YF, et al. Wip1-dependent regulation of autophagy, obesity, and atherosclerosis[J]. Cell Metab, 2012, 16(1):68-80.

[40]Armata HL, Chamberland S, Watts L, et al. Deficiency of the tumor promoter genewip1 induces insulin resistance[J]. Mol Endocrinol, 2014, 29(1):28-39.

(責任編輯： 林白霜， 羅 森)

Progress in the role of Wip1

LIU Ke-mei, YAN Hong-bing

(NationalCenterforCardiovascularDiseases,FuwaiHospital,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalCollege,Beijing100037,China.E-mail:hbyanfuwai@aliyun.com)

Wildtype p53-induced phosphatase 1 (Wip1) is a serine/threonine protein phosphatase of 605 amino acids, which is expressed at high levels in many organs and tissues. As Wip1 is overexpressed in human tumors, analysis of Wip1 has focused primarily on its role in tumorigenesis. In recent years, it has also been shown that Wip1 plays an important role in several physiological processes including adult neurogenesis, senescence, immunodeficiency and metabolic diseases. This review addresses how Wip1 participates in physiological and pathological conditions at cellular and molecular levels.

Wip1; Tumor; Senescence; Immune; Inflammation; Metabolism

1000- 4718(2017)03- 0562- 05

2016- 09- 18

2016- 10- 14

國家自然科學基金資助項目(No. 81270288； No. 81541095)

△通訊作者 Tel: 010-88322281； E-mail: hbyanfuwai@aliyun.com

R363

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10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.03.031