動物源性食品中獸藥殘留快速檢測技術研究進展

陳小聰

（廣西-東盟食品藥品安全檢驗檢測中心，廣西南寧530001）

動物源性食品中獸藥殘留快速檢測技術研究進展

陳小聰

（廣西-東盟食品藥品安全檢驗檢測中心，廣西南寧530001）

對動物源性食品中獸藥殘留快速檢測方法中的酶聯免疫技術、生物芯片技術、生物傳感器技術、拉曼光譜檢測技術等的研究進展進行了綜述，并對其發展前景進行了展望和建議。

動物源性食品；快速檢測；獸藥殘留

0 引言

隨著畜牧業規?；彤a業化，為了防止群體染病事件的發生，同時為了追求利益的最大化，養殖過程中獸藥的使用量和使用范圍逐漸被擴大化，國家對于獸藥的安全使用有很多規定，但因為養殖者對法律法規及相關標準的不了解或受到利益的驅動，濫用、誤用獸藥，極易造成獸藥殘留超標。食品安全監控體系不斷發展完善，但獸藥殘留依然是動物源性食品中安全監管的重點和熱點。我國國家標準中獸藥殘留的檢測方法有氣相色譜法、液相色譜法、薄層色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜聯用法等[1]，但是這些方法存在預處理復雜、需要配備昂貴的大型儀器、操作繁瑣、對人員素質要求高、試驗成本高等缺點，不利于進行食品安全監管的現場快速檢測；而一些快檢技術（如免疫技術、生物傳感器技術、拉曼光譜檢測技術）具有快捷、簡便、成本低等特點，被廣泛運用。對近幾年動物源性食品中獸藥殘留快速檢測技術進行綜述，重點介紹了酶聯免疫技術、生物芯片技術、生物傳感器技術、拉曼光譜檢測技術等快速檢測技術，并對快速檢測技術在食品分析領域中，尤其是動物源性食品中獸藥殘留的應用前景進行了展望。

1 免疫技術

1.1 酶聯免疫技術

酶聯免疫技術是由免疫技術與現代測試手段相結合而建立的一種超微量測定技術[2]，對于獸藥殘留的檢測一般采用3種競爭分析模式，即抗體包被直接競爭、抗原包被直接競爭和間接競爭[3]。Wang L等人[4]進行膠體金吸附和酶聯免疫吸附交叉試驗，這2種方法獲得良好的相關性，可以快速測試動物源食品中14種磺胺殘留。王忠斌等人[5]建立了氨基糖苷類抗生素多殘留的直接競爭ELISA分析方法，快速檢測新霉素、卡那霉素、慶大霉素、鏈霉素等獸藥中常用的氨基糖苷類抗生素。王自良等人[6]研制的苯巴比妥ELISA試劑盒，線性檢測范圍廣，達1.0～81.0 ng/mL，靈敏度高，檢測限低。王選年等人[7]研制的鹽酸克倫特羅ELISA試劑盒，線性檢測范圍為0.5～128.0 ng/mL，與腎上腺素、去甲腎上腺素、萊克多巴胺及多種抗生素均無交叉反應性。

1.2 膠體金免疫技術

膠體金免疫技術起步于20世紀70年代，具有體積較小、操作簡單、出具結果快等特點。近年來，膠體金免疫層析技術發展很快，已應用在小分子物質的檢測上。Zhu Y等人[8]研制出檢測12種喹諾酮類藥物在雞肉和雞肝中殘留的免疫層析試紙條，在能識別氟喹諾酮藥物的單克隆抗體基礎上，成功研制出了可以同時檢測12種氟喹諾酮類藥物的膠體金快速檢測試紙條。諾氟沙星及培氟沙星在雞肉和雞肝中的檢測限為25 ng/L，恩諾沙星、環丙沙星、氟甲喹、氧氟沙星、依諾沙星、洛美沙星、達氟沙星、氨氟沙星、惡喹酸及麻保沙星在雞肉和雞肝中的檢測限達到50 μg/kg，整個過程在10 min之內完成。劉烜等人[9]采用免疫競爭法研制出一種快速檢測喹諾酮類藥物殘留的免疫層析法，在檢測肌肉等組織樣品時，靈敏度最低值為10 ng/mL，只需3～5 min，與類似物無交叉反應。

1.3 化學發光微粒子免疫技術

化學發光微粒子免疫技術是近年來發展較快的新型檢測技術。克倫特羅也稱“瘦肉精”，快檢方法多為酶聯免疫法。牛治存等人[10]應用化學發光微粒子免疫分析技術研發克倫特羅化學發光快速檢測試劑盒，采用直接競爭CMIA方法，配合貴州勤邦食品安全科學技術有限公司研制的磁免疫全自動化學發光檢測儀，用光子計數儀測定光子計數的強度與克倫特羅藥物濃度負相關得出克倫特羅的含量。黨娟等人[11]運用化學發光微粒子免疫法對牛肝、牛肉樣品中阿維菌素類藥物殘留進行檢測，結果表明檢測靈敏度與可測范圍遠遠高于酶聯免疫法，且兼具了ELISA法的簡便操作和短時反應等性能。

2 生物芯片技術

生物芯片技術使用了微光技術，根據分子間特異性相互作用的原理，將不連續的分析過程集成于硅芯片、玻璃芯片等，進入計算機系統，以實現對細胞、蛋白質、基因及其他生物組分的檢測[12]。分別為基因芯片、蛋白質芯片、細胞芯片等，其中以蛋白芯片發展最為迅速。陳愛亮等人[13]開發了獸藥殘留蛋白芯片檢測系統，該系統可用于豬肉、豬肝、雞肉、雞肝、牛奶中磺胺二甲基嘧啶、磺胺喹惡啉、磺胺甲惡唑、磺胺異惡唑、磺胺間甲氧嘧啶、鏈霉素、雙氫鏈霉素、恩諾沙星、氯霉索的定量檢測，可同時分析多種樣品的多種獸藥殘留。劉楠等人[14]以常用的氯霉素、克倫特羅、雌二醇和泰樂菌素4種獸藥為靶標物，基于間接競爭法的免疫學檢測原理，改進了常規懸浮芯片技術在微球上固定抗體的方法，根據待測靶標物靈活自由組合，同時檢出上述4種獸藥殘留靶標物，整個檢測過程僅耗時1～2 h。因生物芯片技術通量高、特異性強、靈敏快速等特點，使其在獸藥殘留的檢測領域得到更多運用者的關注。

3 生物傳感器技術

生物傳感器是由化酶或電化學或物理傳感器組成的一種能測定溶液中某種或某一類化學物質的傳感裝置[15]。生物傳感器技術，也已經應用于獸藥殘留的快速檢測。李瑩等人[16]利用自行研制的便攜式表面等離子體共振（SPR）生物傳感器，根據免疫反應的特異性，研究克倫特羅抗原、抗體的相互作用，分析動力學反應過程，建立標準曲線，并提出克倫特羅的連續檢測法和快速檢測法。李會芹等人[17]提出了一種新穎、無標記、快速的內嵌式TsPRlK23生物傳感器的光學表面等離子共振（SPR）鹽酸克倫特羅測定方法，測定裝置由集成光學SPR生物傳感器、微流通池、便捷更換芯片的夾具、觸電屏，USB接口板度光電轉換電路板組成。在光學SPR芯片金膜表面固定鹽酸克倫特羅抗原，在標準樣品中分別添加鹽酸克倫特羅抗原，采用競爭免疫反應方法建立的鹽酸克倫特羅測定標準曲線，相關系數0.997，相對標準偏差6.5%。

4 拉曼光譜檢測技術

隨著光電技術的發展，拉曼技術也有長足的發展，結合納米技術，拉曼光譜技術向表面增強拉曼光譜邁進。陳蓓蓓等人[18]借助便攜式激光拉曼光譜儀和相應的納米試劑，實現了利用表面增強拉曼光譜技術來完成食品中多種化學物的快速檢測，并進行了定量分析，選擇的檢測項目主要涉及食品中非法添加物、食品濫用添加劑、農獸藥殘留等，獲得了較好的檢測效果。表面增強拉曼光譜（SERS）技術基于拉曼散射效應，可將信號強度明顯提高，以高出常規拉曼技術104～107的靈敏度實現對痕量物質的檢測。吳輝陽[19]采用表面增強拉曼光譜（SERS）技術對常見的獸藥殘留檢測方法進行研究與開發，對氟喹諾酮類、硝基呋喃類等獸藥具有很好的檢出效果。

5 展望

目前，能進行現場快速檢測獸藥殘留的快速檢測技術主要有免疫技術、生物傳感器技術、拉曼光譜檢測技術，其中酶聯免疫技術較為成熟，是國內外獸藥殘留檢測的重要方法之一。膠體金免疫技術雖然幾分鐘能出結果，但是檢測限較高、靈敏度差，容易出現假陽性、假陰性。生物芯片技術檢測獸藥殘留具有通量高、特異性強、靈敏度高等特點，備受各界關注，發展迅猛。拉曼光譜技術簡單、快速、靈敏，可進行無損檢測也有一定的發展前景。其他技術（如生物傳感器等）仍是發展的方向，有著較為廣闊的前景。上述快速檢測方法雖然與大型儀器法相比檢測耗時短、成本低，但由于缺乏統一的快速檢測設備、耗材的生產標準，市場上的快速檢測產品質量不一，有關權威部門應盡早制定標準化的

食品安全快速檢測產品復核性驗證規程，對快速檢測產品進行確認認可，有利于規范快速檢測產品的市場，更好地為食品安全監管服務。

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Advances in Application of Rapid Detection for Detection of Veterinary Drug Residues in Animal-Derived Foods

CHEN Xiaocong
（Guangxi-ASEAN Food and Drug Safety Inspection and Testing Center，Nanning，Guangxi 530001，China）

This paper focuses on the developments of rapid detection in the field of veterinary drugresidue analysis，such as enzyme linked immunosorbent assay，bio-chip technology，biosensor and Raman spectrum technology.Finally，its applications are also analyzed and put forward.

animal-derived foods；rapid detection；veterinary drug residues

S859.84

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2017.08.022

1671-9646（2017）08a-0070-03

2017-06-01

陳小聰（1974—），女，本科，高級工程師，研究方向為食品安全檢測。