新型精液保護劑對種雞精液質(zhì)量的影響

劉詩柱++韓慶彬++王寶玉++江善祥

摘要：種公雞攜帶病原體傳遞給后代的問題由來已久，作為垂直傳播的一個途徑其危害不容小視，可致雛雞死亡率高、后代生長不良、疫病代代相傳、生產(chǎn)力低下，甚至給環(huán)境保護、可持續(xù)發(fā)展帶來挑戰(zhàn)。試驗對新研發(fā)的一種精液保護劑進行了評價。①通過兩種稀釋比例、經(jīng)過4個不同時間點，檢測了新型精液保護劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌的殺滅率，結(jié)果表明，新型精液保護劑對三種細菌的殺滅率分別達到99.99%、99.99%和100.00%；②對加入新型精液保護劑后的種雞精液在不同時間點進行精子活力測定，結(jié)果各時間點的精子活力均明顯高于空白試驗組。綜合表明，該新型精液保護劑不但可殺滅精液中的病原體，而且可以提高精子活力。

關(guān)鍵詞：新型精液保護劑；種雞精液；質(zhì)量；影響

中圖分類號：S814.3；S831 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2016）09-0009-02

種雞垂直傳播性疾病包括細菌性疾病（雞傷寒、雞白痢、禽波氏桿菌病、禽奇異變形桿菌病等）、病毒性疾病（禽白血病、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥、雞傳染性貧血、病毒性關(guān)節(jié)炎、禽傳染性腦脊髓炎、I型腺病毒感染、產(chǎn)蛋下降綜合征等）、其他微生物感染性疾病（支原體病、衣原體病等）。當種雞感染某一種垂直傳播性疾病時，病原會隨著曾祖代—祖代一父母代一商品代而傳播，并且每只祖代雞會繁殖約70～80套父母代，父母代再將疫病傳播到商品代。種公雞攜帶病原體傳遞給后代的問題尤其嚴重，一只種公雞將病原傳播給其他雞的機會比母雞高得多[1]。作為垂直傳播的一個途徑其危害不容小視，其帶來的后果包括雛雞死亡率高、后代生長不良、疫病代代相傳、生產(chǎn)力低下，甚至給環(huán)境保護、可持續(xù)發(fā)展帶來挑戰(zhàn)。隨著傳代，疫病波及范圍不斷被擴大，影響越來越嚴重。同時，種公雞如果攜帶垂直傳播疫病病原，就會經(jīng)交配或人工授精傳染給母雞。輕者會侵害雞的生殖系統(tǒng)、輸卵管感染、卵泡變性、壞死，造成產(chǎn)蛋率下降、孵化率降低、弱雛增多以及雛雞生長緩慢等一系列的問題；重者造成烈性傳染病的傳播和暴發(fā)，危害巨大。

針對上述情況，南京農(nóng)業(yè)大學藥理實驗室研制了用于種豬場和種雞場的精液保護劑[2]。通過向品質(zhì)合格的精液中添加一定量的精液保護劑，以期達到凈化精液中的病原微生物，切斷疾病垂直傳播，同時延長精子受精能力及時間的目的[3]，從而使人工授精技術(shù)在生產(chǎn)實踐中發(fā)揮更大的作用。

1 材料與方法

1.1 材料設(shè)備

精液保護劑（由南京農(nóng)業(yè)大學藥理實驗室提供）100 mL；大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌標準菌（由商丘職業(yè)技術(shù)學院動物工程系微生物實驗室提供）；恒溫培養(yǎng)箱， 高倍光學顯微鏡，細菌計數(shù)器，新鮮種雞精液（河南省商丘市宣武種雞場提供） 50 mL；低倍顯微鏡等。

1.2 方法步驟

1.2.1 精液保護劑對臨床常見病原菌的抑殺作用 分別取精液保護劑1.0 mL和0.5 mL各3份，各加入純化水200 mL，配成1∶200和1∶400的溶液，貯于6個錐形瓶中；然后從恒溫培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌的試管，用滴管吸取各1 mL，加入上述錐形瓶中；分別于0、1、3、6、12 min時，通過高倍顯微鏡測定細菌數(shù)并計算殺滅率。

1.2.2 精液保護劑對種雞精子活力的影響 將生理鹽水與本品按1 000∶10混合后，再按照4∶1的比例與種雞精液稀釋，取A、B兩試管各加入稀釋后保護劑8 mL、新鮮精液2 mL。于10.5 h后用低倍顯微鏡測定精子活力，以后每1 h測定1次，共測定8次。B試管為重復試驗，設(shè)空白對照組。

2 結(jié)果與分析

2.1 精液保護劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌的殺滅效果

通過1∶200和1∶400兩種稀釋濃度的精液保護劑對三種細菌的抑殺試驗可以看出，從1 min到12 min作用時間均呈現(xiàn)很好的殺菌效果（表1）。1∶400稀釋時，對大腸桿菌的抑殺效果最差，作用1 min時，殺滅率為98.07%；對銅綠假單胞菌效果最好，作用6 min時，殺滅率達到100%。1∶200稀釋時，對金黃色葡萄球菌抑殺效果最差，1 min時殺滅率為99.94%；對銅綠假單胞菌效果最好，作用1 min時殺滅率就達到100%。1∶200稀釋作用12 min時，對三種細菌的殺滅率均達到99.99%以上。

2.2 精液保護劑不同時間點對精子活力的影響

從加入精液保護劑10.5 h后每次間隔1 h、連續(xù)8次的測定結(jié)果來看，精液保護劑對精子有一定的保護作用（表2）。作用10.5 h時，加入精液保護劑的平均活率為0.925，比空白對照組的0.900高2.78%；之后5次測定，分別比對照組高20.6%、29.8%、31.4%、50.0%和67.5%。最后兩次因活率太低，利用的意義不大。

3 討論

（1）精液保護劑在本試驗中對三種病原菌的抑殺作用均較為理想，但是還不能說明對所有的病原體都有理想的殺滅作用。畢竟精液中可能污染的病原有很多種，如正粘病毒、副粘病毒、皰疹病毒、呼腸孤病毒、白血病病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒等，還有沙門氏菌、支原體、衣原體等，有待進一步探討。

（2）精液保護劑對精子活力影響的試驗。本試驗從精子形態(tài)、活動性兩方面鑒定了該精液保護劑對精子非但沒有抑殺作用，還有一定的保護作用。但是最后的評定還要看其對孵化率、健雛率的影響，甚至要看對后代生長發(fā)育和繁殖有無影響。

（3）具有殺滅病原體作用的精液保護劑目前尚屬首例，研發(fā)雖然難度很大，但鑒于其在畜牧生產(chǎn)上的巨大作用，其意義重大。疫病垂直傳播的普遍性及其巨大危害目前仍是世界難題，精液保護劑從種公雞入手，是斬斷垂直傳播的一條重要途徑，一旦研發(fā)成功會給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大財富。

參考文獻：

[1] 李 湛.公雞精液品質(zhì)的鑒定及注意事項[J].今日畜牧獸醫(yī)，2011（11）：38

[2] 張兆旺.雞精液稀釋液設(shè)計及篩選方法學研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學，2005.

[3] 王欣榮，李彥強.保存條件對雞精子形態(tài)及畸形率的影響[J].黑龍江動物繁殖，2009，17（6）：5-6.