Versa TREK血培養系統的臨床應用及評價

王慶玲，梁 冰

Versa TREK血培養系統的臨床應用及評價

王慶玲，梁 冰＊

目的 通過Versa TREK血培養系統臨床應用效果評價該系統的相關性能。方法分析筆者所在醫院9800份血培養標本的病原菌檢出率，病原菌構成分布以及儀器判定陽性的報警時間。結果9800份血培養中檢出病原菌共870份，陽性率為8.88%；前五位分別為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和陰溝腸桿菌。24 h內檢出陽性率為70.9%，48 h內檢出率為88.7%，72 h內檢出率為94.9%。結論Versa TREK血培養儀檢出病原菌的范圍廣，敏感性、特異性高，能夠滿足臨床需求。

Versa TREK血培養系統；血培養；病原菌

引起血流感染的病原菌種類廣泛，除醫源性因素越來越突出外，常見于手術并發癥、繼發于組織的微小感染和免疫力低下時的內源性感染。由于血流感染病死率高（高達35%［1］），危害嚴重，快速、早期診斷顯得尤為重要。血液樣本的細菌培養是診斷血流感染的重要手段。目前多數微生物實驗室采用自動化儀器進行血液標本的培養，血培養儀檢測敏感性和特異性對于及時診斷血流感染有重要影響。本文通過9800份血培養樣本的病原菌陽性檢出率，陽性報警時間與菌種分布等指標對現用的Versa TREK血培養系統的實驗性能進行臨床應用的評價。

1 材料與方法

1.1 Versa TREK全自動血培養系統賽默飛世爾科技Versa TREK528全自動血培養儀及其配套血培養瓶（Versa TREKREDOX1需氧培養瓶，Versa TREKREDOX 2厭氧培養瓶）。

1.2 細菌鑒定儀器VITEK-Ⅱ Compact全自動微生物分析儀（法國梅里埃公司）；基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀 （Microflex MALDI-TOF MS）（德國布魯克公司）。

1.3 樣本來源2012年12月1日—2016年6月1日筆者所在醫院住院和門診患者送檢的9800份血培養標本。

1.4 標本采集要求在患者寒戰時或發熱初期，患者接受抗生素治療之前在雙側肘靜脈采集2套，對已使用抗生素無法停止用藥的患者，應在下次用藥前采集。每人每套需氧和厭氧瓶各采集5～10 ml血液，嚴格無菌操作采集的血液立即注入培養瓶內并迅速輕搖使之充分混合，以防血液凝固，標本采集后及時送檢。

1.5 儀器陽性報警的處理程序臨床采集的血液樣本及時送入微生物室放入Versa TREK血培養儀（按照儀器的操作說明書進行）。若儀器陽性報警，首先轉種至哥倫比亞血平板、麥康凱平板、巧克力平板，35℃，5%CO2培養18～24 h，同時轉種沙保羅平板，29℃培養18～120 h，厭氧培養轉至厭氧袋（法國梅里埃公司生產）內。另外采集陽性瓶中的血液進行革蘭染色鏡檢。第二天應用VITEK系統或質譜儀進行細菌和真菌鑒定。

1.6 質量控制按照CLSI－M22－A2標準及REDOX1、REDOX2培養瓶使用說明書要求進行質量控制。按ISO15189 CNAS－CL02文件對血培養儀進行性能驗證：季度回顧分析全自動血培養儀的假陰性率和假陽性率；選用金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC 25922、白假絲酵母菌ATCC90028以及脆弱擬桿菌ATCC25285，對105、104～101等5個不同濃度標準菌株菌懸液模擬常規操作上機測定，觀察血培養瓶陽性報警時間是否適當（＜72 h）。

1.7 統計學分析統計分析軟件采用SPSS 19．0對需氧瓶和厭氧瓶陽性報警時間進行Wilcoxon秩和檢驗，對5類病原菌陽性報警時間進行Kruskal-Wallis檢驗，類間兩兩比較采用LSD-t檢驗，P＜0．05，差異有統計學意義。

2 結果

2.1 質量控制結果質量控制結果見表1。性能驗證結果顯示Versa TREK血培養分析系統假陽性率0．30%，假陰性率0%，結果可靠有效。標準菌株采用配制105、104～101cfu/ml等5個濃度菌懸液，模擬臨床標本（成人需氧10 ml、厭氧10 ml）上機測試，所有培養瓶在＜1 d（24 h）內均報陽性，儀器報陽時間均＜72 h，其敏感度和特異度符合預期要求。

表1 質量控制結果

2.2 病原菌分布9800份血培養標本共檢出病原菌907株，陽性率為8．88%，其中腸桿菌科細菌437株 （48．18%），凝固酶陰性葡萄球菌 129株（14．22%），金黃色葡萄球菌96株（10．58%），腸球菌屬69株（7．61%），非發酵菌屬50株（5．51%），念珠菌屬72株（7．94%），鏈球菌屬32株（3．53%），其他22株（2．43%）。需氧培養和厭氧培養病原菌構成及分布如表2。

2.3 對需氧瓶和厭氧瓶陽性報警時間進行Wilcoxon秩和檢驗P＜0．05差異具有顯著性，需氧培養陽性報警時間中位數為13．0 h，厭氧培養為19．2 h。需氧瓶和厭氧瓶的陽性報警時間分布箱式圖見圖1。

表2 需氧和厭氧條件下病原菌生長的分布（株）

圖1 需氧瓶和厭氧瓶陽性報警時間分布箱式圖

2.4 病原菌的陽性報警時間分布最早陽性報警時間為0．5 h，病原菌位大腸埃希菌。12 h內檢出陽性率為38．3%，24 h內檢出陽性率為70．9%，48 h內檢出率為88．7%，72 h內檢出率為94．9%。907株病原菌的報警時間分布見表3，各菌屬陽性報警時間分布箱式圖見圖2。對5類病原菌陽性報警時間進行Kruskal-Wallis檢驗，P＜0．05差異具有顯著性。各菌屬報警時間中位數見表4。

圖2 各病原菌屬陽性報警時間分布箱式圖

表3 907株病原菌在不同陽性報警時間檢出率

表4 各菌屬報警時間中位數（h）

3 討論

Versa TREK血培養儀是通過氣壓感應技術檢測各種氣體（包括CO2，O2，N2和H2）的產生和消耗連續監測培養瓶內細菌生長情況［2］，可以同時進行血液、無菌體液培養、分枝桿菌培養、結核分枝桿菌藥敏測試的“四合一”培養系統。很多厭氧菌通常不能產生足夠的CO2，但是會產生其他氣體（如N2或H2），因此，該培養系統避免了單一檢測CO2的局限性，使得該培養儀檢測細菌的范圍明顯增大。Versa TREK血培養瓶為80 ml大容量培養基，營養豐富、抗生素充分稀釋，聚茴香腦磺酸鈉的含量低，這些條件都利于病原菌的充分生長。

周庭銀等［3］報道ESP全自動血培養儀的最早報警時間為2 h，顧海彤等［4］報道法國梅里埃BacT/ Alert 3D血培養系統最早報警時間為4 h，本組資料細菌生長陽性的最早報警時間為0.5 h。法國梅里埃BacT/Alert 3D血培養系統和美國BD BACTEC FX血培養系統均是檢測細菌代謝產生的CO2來檢測細菌生長情況［5］。Versa TREK血培養系統的全氣體檢測技術避免了只檢測CO2的局限性，可能是檢測敏感性大大提高的原因。另外，大容量的培養基對于稀釋干擾因素，提高細菌營養儲備，在培養震蕩條件下的充分營養輸送對于提高檢測靈敏度都有很好的幫助。結果顯示，Versa TREK血培養系統最早陽性報警時間明顯早于梅里埃BacT/Alert 3D血培養系統、美國BD BACTEC FX血培養系統［6］和ESP全自動血培養儀［3］，更利于對血流感染病原菌的早期診斷，為臨床的及時診斷及針對性的抗感染治療贏得時間。

引起血流感染的常見細菌有大腸埃希菌及其他腸桿菌科細菌，非發酵革蘭陰性桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、念珠菌及厭氧性細菌等［7］。從本文檢出細菌的構成及分布看，該系統有能力為引起血流感染的主要病原菌提供營養支持并滿足其分離培養條件，菌種覆蓋廣泛，有文獻表明，Versa TREK血培養系統是唯一能夠檢出厭氧消化鏈球菌的系統［8］并且在僅采集0.5～1 ml血液時能夠檢出淋病奈瑟菌［9］，能夠滿足臨床需要。

本組資料經統計學分析顯示，病原菌檢出時間與病原菌的種類有關。各病原菌中陽性報警時間最早的為腸桿菌科細菌，明顯早于非發酵菌屬、葡萄球菌屬和念珠菌屬。腸球菌屬與鏈球菌屬的陽性報警時間差異無統計學意義，與顧海彤等［4］報道一致。腸球菌屬陽性報警時間早于葡萄球菌屬、非發酵菌屬和念珠菌屬，與郭健蓮等［10］報道一致，但有報道［4］腸球菌屬陽性報警時間較晚，其原因尚需進一步分析，可能與抗生素應用、血液中的病原菌原始量等有關，因為血液標本中病原菌的原始量與陽性報警時間呈負相關［11］。

綜上所述，Versa TREK血培養系統陽性報警時間早，分離病原菌種類覆蓋范圍廣，能夠滿足臨床需求，對于血流感染的及時診斷和治療有重要的臨床應用價值。

［1］邵敏偉，梁 艷，周庭銀.4603例血培養病原菌種類分布與耐藥性分析［J］.中國抗生素雜志，2008，12（7）：727-730.

［2］王 浩，蘇苗苗，張文娟，等．Versa trek 240與Bactec 960在分枝桿菌快速培養中的對比分析［J］．中國醫藥導刊，2016（1）：91－92．

［3］周庭銀，趙虎，何銘君．ESP全自動血培養儀的臨床應用及評價［J］．檢驗醫學，2005（1）：46－48．

［4］顧海彤，黃艷飛，孫宇峰，等．不同種類微生物血培養陽性報警時間的臨床意義探討［J］．中國實驗診斷學，2011，11（16）：1882－1884．

［5］王春玉，陳中舉，朱旭慧，等．3種不同全自動血培養儀的臨床應用及評價［J］．檢驗醫學與臨床，2016，7（9）：913－916．

［6］Stefan R，Eisinger SW，Lisa D，et al．Comparison of BD Bactec Plus Aerobic/F medium to Versa TREK Redox 1 blood culture medium for detection of Candida spp．in seeded blood culture specimens containing therapeutic levels of antifungal agents［J］．J Clin Microbiol，2011，49（4）：1524－1529．

［7］孫榮武，王鴻利．臨床實驗診斷學［M］．上海：上海科學技術出版社，2001：469－471．

［8］Schieffer KM，Tan KE，Stamper PD，et al．Multicenter evaluation of the Sepsitper TM extraction kit and MALDI－TOF MS for direct identification of positive blood culture isolates using the BD BACTECTM FX and Versa TREK diagnostic blood culture system［J］．J Appl Microbiol，2014，116（4）：934－941．

［9］Francisco QF，Lourdes IS，Cecilia GS．Comparison of the Versa TREK system and Lowenstein－Jensen medium for the recovery of mycobacteria from clinical specimens［J］．Infect Dis，2008，40（1）：49－53．

［10］郭健蓮，肖斌龍，劉惠娜，等．血培養報陽時間在鑒別血流感染和采血污染中的應用［J］．中國感染控制雜志，2015，12（8）：803－806．

［11］葉智穎，呂火祥，魏取好，等．1550例血培養陽性報警時間與分離菌種類分布的分析［J］．中華醫院感染學雜志，2011，10（20）：2106－2108．

［2016－08－18收稿，2016－09－16修回］

［本文編輯：吳 蓉］

Clinical application and evaluation of Versa TREK blood culture system

WANG Qing-ling①，LIANG Bing.Qingdao University，Qingdao，Shandong 266071，China

ObjectiveTo evaluate the related performance of Versa TREK blood culture system through observing its clinical application.MethodsThe 9800 blood samples obtained from author's hospital were detected by Versa TREK blood culture system，in which positive rate，positive alarm time and the distribution of microorganisms were analyzed.ResultsAmong the 9800 samples 870 were for positive rate（8.88%i.e）detected with positivepathogen，and the top fiveisolateswere Escherichia coli，Klebsiella pneumoniae，Staphylococcus aureus，Staphylococcus epidermidis，Enterobacter cloacae.The positive rate was 70.9%within 24h，88.7%within 48h and 94.9%within 72h.ConclusionVersa TREK blood culture system could detect various microorganisms with higher sensitivity and specificity，which can meet clinical request.

Versa TREK blood culture system；Blood culture；Pathogen

R446.5

A

10.14172/j.issn1671-4008.2017.02.007

266071山東青島，青島大學（王慶玲）；解放軍401醫院檢驗科（梁冰）

梁冰，Email：jyk401@126.com