王娟玲
(海南醫學院病理學教研室,海南 海口 570102)
病理技術HE染色在病理診斷中價值的分析
王娟玲
(海南醫學院病理學教研室,海南 海口 570102)
目的 探究病理技術HE染色在病理診斷中的價值。方法 選取我院2015年5月21日~2016年5月21日病理科收治的石蠟片120片作為本次的研究對象,并采用顯微鏡進行石蠟片染色處理。結果 改進病理技術后,染色標準率相比改進前均明顯較高,差異有統計學意義(P<0.05)。結論 病理診斷技術是臨床上的金標準,在HE染色技術中的意義重大,需要不斷將HE染色技術提高,從而獲得更加可靠的切片質量。
病理診斷;HE染色;病理技術;診斷
病理診斷是目前臨床上的金標準診斷方式,其準確率較高,但是對其準確率造成影響的主要原因在于制片過程中組織標本的處理質量(脫水情況、切片質量、試劑濃度、染色效果)、醫師診斷的水平等,若上述任何一方面存在問題,均會降低病理診斷價值,導致準確率受到一定的影響。目前關于病理檢查方式存在一定的弊端,包括不按照規范固定標本、組織脫水不足、試劑濃度等,使得降低了制片的質量,導致診斷難度增加[1]。為此,需要不斷改進制片過程,本次研究將120片石蠟片作為診斷對象,現報告如下。
1.1 一般資料
選取我院2015年5月21日~2016年5月21日病理科收治的石蠟片120片作為本次的研究對象,石蠟片標本類型包括脂肪、骨、胃腸,均在相關的操作標準下進行HE染色處理。
采取計算機隨機分組方案,其中60片石蠟片為染色改進之前的標本,另外60片為改進之后的標本。改進之前的60片標本中,子宮內膜17片,脂肪組織9片,肝膽胃腸6片,胃鏡活體檢查20片,骨組織8片。
1.2 方法
HE染色:選擇手術室標本,操作人員應精準取材,對不同組織制片的脫水時間、有效固定時間、染色效果等進行明確,將制片的質量提高,利于操作的準確性。在進行標本制片時,應盡量縮短標本的脫水與固定時間,并盡量延長脂肪組織標本的固定時間。
對新的切片應給予硬組織切片模式,采取人工染色技術,先去除蠟,每次持續5 min,加入蒸餾水清洗,之后進行蘇木精染色3~5 min,采用酸性酒精(1%)分化5~10 s,給予蒸餾水清洗2 min。對細胞核的染色深度進行密切觀察,若出現顏色深度不足情況,應進行再次分化、染色處理。給予伊紅液進行染色30秒,適當對操作時間進行調整,給予85%的乙醇20 s,90%的乙醇與95%的乙醇分別持續30 s與1 min,2次無水乙醇分鐘,3次二苯甲透明2 min,之后進行封片(給予中性樹膠)。
HE染色改進措施:若標本的大小不同,可采取分別進行脫水、固定、染色等一系列處理措施,并依照標本的特點進行操作。使得細胞核可以被染成藍色。其中粉紅色或者桃紅色為細胞間質,保持膠原纖維為淡粉紅色,嗜酸性顆粒為鮮紅色,彈力纖維為亮粉紅色,紅血球為橘紅色,蛋白性液體為粉紅色。給予脂肪組織與骨組織烤片處理后,將其溫度降低至室溫并染色處理,不易于造成組織的脫落。之后染色處理時由于多次稀釋導致改變了PH,因此,可將染色架經水瀝干后20 s將蘇木精加入,之后將冰醋酸(兩滴)加入,使得其染色處于一致性。
1.3 評價指標
對比HE染色改進前與改進后的的染色標準率。
1.4 統計學方法
采用SPSS 20.0統計學軟件對數據進行分析,以P<0.05為差異有統計學意義。
HE染色顯示子宮內膜15片(88.24%),脂肪組織8片(88.89%),肝膽胃腸5片(83.33%),胃鏡活體檢查18片(90.00%),骨組織7片(87.50%)。
HE染色改進后,子宮內膜16片(94.12%),脂肪組織9片(100.00%),肝膽胃腸6片(100.00%),胃鏡活體檢查19片(95.00%),骨組織8片(100.00%),說明改進病理技術后,染色標準率相比改進前均明顯較高,差異有統計學意義(P<0.05)。
臨床上進行病理檢查時,進行組織染色的質量對于診斷結果來說具有十分重大的影響,還可影響到疾病治療的方案。實際進行臨床操作時,染色質量與細胞核的染色質量聯系十分緊密,其是在化學與物理的共同作用下完成的,且多數的組織內部存在較多的細孔,進行染料滲透后,將會出現溶解與擴散現象[2]。
分析細胞與組織HE染色的質量與取材操作、質量、時間等因素息息相關[3],因此,進行組織染色時,應依照標本的類型采取相關的措施,便于改變組織結構。此外,需要送檢的組織標本應進行妥善固定,便于有效保障組織與活體成分、形態,以免制片時發生自溶現象。當組織原有結構受到破壞或者消失后,將會嚴重影響到制片的質量[4]。本次研究結果顯示,改進病理技術后,染色標準率相比改進前均明顯較高。
綜上可知,病理診斷技術是臨床上的金標準,在HE染色技術中的意義重大,需要不斷將HE染色技術提高,從而獲得更加可靠的切片質量。
[1] 鄭 葉,曾 東,童海濤,等.特殊染色技術在艾滋病合并真菌病理診斷中的應用[J].中華臨床感染病雜志,2014,7(3):207-211.
[2] 趙 兵,羅 波,袁靜萍,等.影響淋巴結HE制片因素的探討[J].臨床與實驗病理學雜志,2012,28(2):220-221.
[3] 常 峰.病理組織漂烘儀在快速冷凍切片染色中的應用[J].臨床與實驗病理學雜志,2016,32(4):468-469.
[4] 劉 勇,盧少芳,周 虹,等.染色后干片是影響蘇木精-伊紅染色質量的重要因素[J].中華病理學雜志,2013,42(4):271-272.
本文編輯:趙小龍
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ISSN.2095-8242.2017.037.7273.01