腹腔鏡闌尾切除術對免疫功能影響分析

周愛華

（武漢大學基礎醫學院，湖北 武漢 430071）

腹腔鏡闌尾切除術對免疫功能影響分析

周愛華

（武漢大學基礎醫學院，湖北 武漢 430071）

目的探討分析腹腔鏡闌尾切除術對免疫功能影響。方法隨機選取2015年8月～2016年5月期間在我市中心醫院接受診治的闌尾疾病患者100例作為本次的研究對象，100例闌尾疾病患者中，50例患者行開腹闌尾切除術，將此分為甲組，50例患者行腹腔鏡闌尾切除術，將此分為乙組，對兩組患者的腹腔的巨噬細胞產生TNFɑ生物學活性和中性粒細胞吞噬功能以及腹腔T細胞亞群CD4+/CD8

+的比值進行檢測。結果兩組T淋巴細胞亞群CD4+/CD8

+比值沒有明顯差異，甲組為0.53，乙組為0.57，差異無統計學意義（P＞0.05）。甲組中性粒細胞化學發光峰值為98，乙組為102。甲組L929細胞0D570值為0.183，乙組為0.152。結論開腹闌尾切除術相對腹腔鏡闌尾切除術來說對腹腔局部免疫特別是細胞免疫有明顯的抑制效應，腹腔鏡闌尾切除術對腹腔局部免疫沒有明顯的抑制作用，開腹闌尾切除術對巨噬細胞功能有明顯的影響。

腹腔鏡闌尾切除術；免疫功能；影響分析

據相關研究證明，現腹腔鏡手術相比開腹手術具有顯著的優點，對全身創傷損傷相對來說較小，不過手術對人體的創傷損傷小會不會對機體的免疫功能影響同樣小呢，在當前還沒有達成一致的結論[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

乙組患者當中，男28例，女22例，年齡范圍區間為20～65歲，平均年齡值為（41.1±1.2）歲。采用CO2氣腹，壓力12～14 mmHg。甲組患者當中，男27例，女23例，年齡范圍區間為24～64歲，平均年齡值為（42.3±0.9）歲。兩組手術時間為40～50 min不等，平均手術時間為40分鐘。兩組患者在一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 中性粒細胞吞噬功能測定

對于中性粒細胞吞噬功能的檢測，本研究研采用發光劑―魯米諾法進行檢測。培養箱溫度為37℃，5%CO2，中性粒細胞懸液混勻置此培養箱當中，取懸液需在60 min以后，最后可取劑量為0.1 mL的懸液，測定管中分別置入魯米諾和血漿活化酵母多糖。測定出化學光峰值，采用LKB 1 250發光儀進行為數3次的測定，單位為V/mv。吞噬功能受損的觀察指標為峰值降低。

1.2.2 TNF-α生物學活性檢測

L929細胞用胰酶消化處理，之后對細胞濃度調整至2×105/mL。于96 孔培養板每孔接種細胞懸液，每孔為100 μL，培養箱溫度為37℃，5%CO，進行為時4 h的培養后，使細胞貼壁。將100μl 4倍稀釋的上清液加入至每孔當中，在此過程中置入陰性，目的是方便對照。培養箱溫度為37℃，5%CO，進行為時24小時的孵育后，將50μL MTT將入每孔當中繼續培養4小時，將上清棄去，同時將150μL DMSO加入每孔當中， 酶標自動分析儀讀取OD值（波長為570 nm）。倘若OD值越，以此說明TNF-α生物學活性越低，同時L929 細胞生長抑制程度就越輕。

1.2.3 T淋巴細胞亞群檢測

采用由美國BD公司生產的CD4 FITC/CD8PE抗體。將10 μL標記抗體加入至各100 μL樣本當中，進行為時20 min的室溫暗處反應后， 加入由美國BD公司生產的劑量為2mL的1×FACS溶血素，進行為時10 min的室溫暗處反應。1000 g離心10分鐘，將上清棄去，加入劑量為2 mL的PBS，同上所述1000 g離心10 min，將上清棄去，加多聚甲醛固定（500 μL 1%），分析采用流式細胞儀進行分析，此操作需在24 h之內完成。分別記錄CD4+胞數與CD4

+/CD8+比值以及CD8

+細胞數。

1.4 統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件對數據處理，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗；計數資料以例（n），百分數（%）表示，采用x2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 巨噬細胞 TNF- α活性比較

應用L929細胞法對巨噬細胞TNF-α活性進行測定。兩組OD值差異明顯，甲組為0.183，乙組為0.152，甲組高于乙組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 兩組中性粒細胞吞噬功能比較

兩組患者應用化學發光法測定其中性粒細胞吞噬功能，經過測定后，甲組98為其平均發光峰值，乙組為102，平均發光峰值兩組差異明顯，甲組低于乙組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.3 淋巴細胞亞群比較

兩組T淋巴細胞亞群CD4+/CD8

+比值沒有明顯差異，甲組為0.53，乙組為0.57，差異無統計學意義（P＞0.05）。

3 討 論

對于手術的一般創傷可以一定程度改變機體的免疫功能，手術損傷的大小和所需時間與免疫功能所發生改變的改變程度兩者之間呈正比的關系。單核- 巨噬細胞、粒細胞、T 淋巴細胞構成機體的細胞免疫。防御感染的主要屏障主要是由中性粒細胞的吞噬功能發揮著巨大作用。

[1] 溫澤霖.急診腹腔鏡闌尾切除術對2型糖尿病患者胰腺內分泌功能的影響[D].重慶醫科大學,2015.

[2] 劉 玲,阮雅文.腹式與腹腔鏡全子宮切除術對患者機體免疫功能影響的臨床對比研究[J].新疆醫科大學學報,2011,12:1379-1383.

[3] 陳 勇,王勝義,查 健.腹腔鏡下闌尾炎切除術對小兒細胞免疫功能的影響[J].吉林醫學,2009,23:2934-2936.

R656.8

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ISSN.2095-8242.2017.049.9544.01

本文編輯：李 豆