輻照紅細胞輸注對急性淋巴細胞白血病化學治療患者血清IL-10、IL-6、TNF-α及IFN-γ的影響

王 坤，趙學濤，任曉亮，魏媛媛

輻照紅細胞輸注對急性淋巴細胞白血病化學治療患者血清IL-10、IL-6、TNF-α及IFN-γ的影響

王 坤，趙學濤，任曉亮，魏媛媛

目的 觀察急性淋巴細胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患者化學治療(化療)期間輸注輻照紅細胞對血清白細胞介素-10(IL-10)、白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及干擾素-γ(IFN-γ)的影響。方法 收集2013年1月—2015年6月在河北醫科大學第四醫院血液科治療的初治誘導緩解治療階段的ALL 60例，隨機分為觀察組和對照組，每組30例。兩組均在常規化療同時輸注去白懸浮紅細胞2單位，觀察組給予經137Cs輻照去白懸浮紅細胞，對照組給予未經輻照去白懸浮紅細胞。輸血前及輸血后1、7 d檢測比較兩組血清IL-10、IL-6、TNF-α及IFN-γ水平。結果 觀察組輸血前后各觀察指標比較差異均無統計學意義(P>0.05)。對照組輸血后1、7 d IL-10、IL-6水平較輸血前有顯著上升(P<0.01)；輸血后1 d TNF-α水平較輸血前顯著下降(P<0. 01)，輸血后7 d恢復至輸血前水平；輸血后1、7 d IFN-γ水平較輸血前明顯下降(P<0.01)。觀察組輸血后1、7 d IL-10和IL-6水平均低于對照組相同時點，TNF-α和IFN-γ水平高于對照組相同時點，差異均有統計學意義(P<0.01)。結論 輻照紅細胞輸注對ALL患者免疫功能抑制較輕，有助于改善患者免疫調節能力，減少化療相關并發癥發生。

紅細胞輸注;γ射線；前體細胞淋巴母細胞白血病淋巴瘤；貧血

急性淋巴細胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)是造血干細胞再分化過程中于某一階段發生分化、阻滯、凋亡障礙的惡性增殖性疾病[1-2]，由于其正常造血系統功能受到了抑制，常伴發貧血。ALL多采用化學治療(化療)，化療藥物在抗腫瘤治療期間亦會對正常細胞造成損傷，從而進一步加重貧血[3]，因而紅細胞輸注成為本病重要的輔助治療措施。有研究顯示，輸血能使機體抗腫瘤免疫系統主要為T淋巴細胞及某些細胞因子受到抑制，而應用γ射線照射血液制品可滅活血液中殘存的少量具有免疫活性的淋巴細胞，避免其在受血者體內增殖，并對血細胞功能不產生影響[4-7]。本研究旨在觀察ALL并貧血患者化療期間輸注輻照紅細胞對患者免疫功能的影響，以期為輻照血臨床應用提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集河北醫科大學第四醫院血液科2013年1月—2015年6月確診的初治誘導緩解治療階段的ALL 60例，所有患者均經骨髓、免疫組織化學免疫染色及病理等檢查確診。所有患者均行常規化療，化療前有頭暈、乏力及胸悶等貧血癥狀，查血紅蛋白呈中度貧血。將60例采用隨機數字表法隨機分為觀察組和對照組兩組各30例。兩組性別及年齡等一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，見表1，具有可比性。

1.2 治療方法 觀察組在化療同時輸注經137Cs照射去白懸浮紅細胞2單位，采用德國Biobem GM 2000輻照儀，輻照劑量為25 Gy，輻照時間12 min；對照組在化療同時輸注未經輻照去白懸浮紅細胞2單位。血液制品均來源于河北省血液中心。

1.3 觀察指標 2組均于輸血前及輸血后1、7 d采取外周靜脈血2 ml，3500 r/min離心5 min后取上清液2 ml。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清白細胞介素-10(IL-10)、白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及γ-干擾素(IFN-γ)含量，并對兩組進行比較。檢測試劑為深圳晶美生物公司產品，操作步驟按試劑說明書進行。

表1 化學治療期間輸注不同紅細胞的急性淋巴細胞白血病2組一般資料比較(±s)

注：觀察組為化學治療期間輸注輻照紅細胞的急性淋巴細胞白血病患者，對照組為化學治療期間輸注未經輻照紅細胞的急性淋巴細胞白血病患者

2 結果

輸血前2組各觀察指標比較差異無統計學意義(P>0.05)。觀察組輸血前后各觀察指標比較差異亦無統計學意義(P>0.05)。對照組輸血后1、7 d IL-10、IL-6水平較輸血前有顯著上升(P<0.01)；輸血后1 d TNF-α水平較輸血前顯著下降(P<0. 01)，輸血后7 d恢復至輸血前水平；輸血后1、7 d IFN-γ水平較輸血前明顯下降(P<0.01)。觀察組輸血后1、7 d IL-10和IL-6水平均低于對照組相同時點，TNF-α和IFN-γ水平高于對照組相同時點，差異均有統計學意義(P<0.01)。見表2。

表2 化學治療期間輸注不同紅細胞的急性淋巴細胞白血病2組輸血前后各觀察指標比較(±s,pg/L)

注：觀察組為化學治療期間輸注輻照紅細胞的急性淋巴細胞白血病患者，對照組為化學治療期間輸注未經輻照紅細胞的急性淋巴細胞白血病患者；與本組輸血前比較，bP<0.01；與對照組相同時點同一指標比較，dP<0.01

3 討論

3.1 異體血輸注對ALL患者免疫功能影響 盡管紅細胞輸注可緩解ALL患者貧血癥狀，但輸血亦會給受血者帶來免疫調節方面影響。近年腫瘤患者化療期間輸血受到較高重視，輸血與免疫功能關系越來越引起關注。目前血液輸注以成分輸血為主，紅細胞輸注以去白懸浮紅細胞為主，輸注過濾掉白細胞的血液制品能極大降低受血者的致病風險[8]。去白懸浮紅細胞液中淋巴細胞去除率為99.9%，但仍有一小部分淋巴細胞殘存并對受血者的免疫反應起抑制作用[9]。既往研究經過臨床試驗及基礎科學實驗證實，異體血輸注對研究對象免疫系統有著重要的影響，包括炎癥反應及固有免疫失調，導致機體對微生物易感性增加及受血者細胞(T細胞及自然殺傷細胞)對腫瘤防御能力下調，并能引起癌癥的復發及術后并發癥的發生[10-11]。接受骨髓移植后患者在輸注普通去白懸浮紅細胞后并發癥、細菌感染、移植物抗宿主反應均增加[12]。

血液制品引起免疫抑制機制比較復雜，輸入去白懸浮紅細胞后會引發IL-6、IL-10及TNF-α的釋放，且降低脂多糖誘發TNF-α釋放，并導致調節性T細胞(regulatory cell, Treg)活化[13]。Treg可以抑制抗腫瘤免疫反應，從而發揮促癌作用。正常人體內Treg細胞約占CD4+T細胞總量的5%～10%，CD4+T輔助細胞與高濃度白細胞介素-2(IL-2)受體共表達，阻斷IL-2產生，并導致輔助性T淋巴細胞(Th)1功能障礙。非特異性抗原如脂多糖可激活Treg細胞，并使之活化，通過Toll樣受體4信號通路使機體產生免疫抑制。除殘存淋巴細胞以及生物活性細胞因子外，普通的去白懸浮紅細胞液中還包含非極性脂肪酸、類花生酸、促炎性溶血磷脂酰膽堿等物質，這類物質可調整自然殺傷細胞(NK細胞)與T細胞活性，并起著NK細胞趨化因子的作用。NK細胞為正向免疫調節的淋巴樣細胞，可殺傷腫瘤細胞[14-15]。IFN-γ可通過多種途徑直接或間接增加NK及巨噬細胞的殺傷毒性[16]，且供血者的免疫系統內包括IgE在內的免疫球蛋白抗體會隨著血液進入受血者體內，IgE可與機體嗜堿粒細胞及肥大細胞等結合，并進一步引起相應的變態反應[17]。

同種異體血輸入，受血者以Th2免疫應答為主，相應的Th1免疫應答進一步下調，進而受血者的細胞免疫受到抑制。輸血可抑制Th1細胞增生，使Th1類細胞因子的合成下降，免疫活性被抑制[18]。INF-γ、TNF-α細胞因子由Th1細胞產生，介導抗腫瘤免疫反應。IL-10及IL-6細胞因子由Th2細胞產生，是一類具有多樣活性的細胞因子，由淋巴細胞以及單核-巨噬細胞等產生，可進一步誘導B型淋巴細胞進行分化，進而參與機體的免疫應激過程[19]，促進腫瘤生長。有研究顯示，IL-10及IL-6細胞因子表達與組織損傷程度呈正相關，是組織損傷早期較為敏感的標志物，與臨床繼發的嚴重并發癥密切相關[20]。本研究結果提示，對照組輸注未經輻照的紅細胞后，血清中IL-10及IL-6水平均有所上升，而抑制腫瘤生長的INF-γ及TNF-α水平有所下降。提示ALL患者化療同時輸注異體未輻照紅細胞對機體抗腫瘤免疫反應可能產生負性調節作用。

3.2 輻照紅細胞輸注治療原理 輻照紅細胞是利用放射性同位素137Cs在衰變過程中產生的γ射線，穿透有核細胞，使細胞核產生不可逆的DNA損傷，并干預其正常修復，進而使淋巴細胞有絲分裂的活性喪失，停止增殖。γ射線輻照作用在瞬間發生，輻照后殺傷作用消失，血液成分并無放射活性，因此對受血體無任何放射殺傷作用。本研究中所用的輻照紅細胞經γ射線照射，對血液中殘存的淋巴細胞進行滅活，受血者不會對其產生進一步免疫排斥。本研究結果顯示，觀察組輸血前后血清IL-10、IL-6、INF-γ及TNF-α水平無明顯改變，說明輻照紅細胞輸注對ALL患者免疫功能影響較小。輻照血輸注已在國外得到廣泛應用，但在我國尚未得到普及。臨床上對造血干細胞、實體器官移植以及惡性腫瘤、免疫缺陷、年齡偏大或幼小等體弱患者進行血液輸注時均應考慮輸注經輻照后的血液[21]。

總之，輻照紅細胞輸注對ALL患者免疫功能抑制較輕，有助于改善患者免疫調節能力，減少化療相關并發癥發生。

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河北省衛生廳課題(ZD20140345)

050000 石家莊，河北醫科大學第四醫院輸血科

R457.1

B

1002-3429(2017)02-0102-04

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.02.030

2016-09-22 修回時間：2016-10-21)