太子參均一多糖的分離與表征

楊斌++龐文生++胡娟

【摘要】目的：對太子參抗二型糖尿病多糖活性部位（PF40），進行分離純化得到均一多糖并對其進行結構表征。方法：太子參粉碎后，通過水提醇沉法（40%乙醇）得到太子參粗多糖，采用DEAE-纖維素、葡聚糖凝膠柱對其分離純化，得到一種均一多糖，采用高效凝膠滲透色譜法測定分子量，1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）-柱前衍生高效液相色譜法分析單糖組成。結果：分離得到一種均一多糖，由葡萄糖組成，分子量為18400Da，命名為HPh-1-1。結論：太子參均一多糖HPh-1-1是一種葡聚糖。

【關鍵詞】太子參均一多糖；分子量；單糖組成

【中圖分類號】R248.2【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）04-0011-02

Isolation and Characterization of Pseudostellaria heterophylla polysaccharideYANG Bin1PANG Wensheng1HU Juan1，2*

1.The college of Pharmacy， FuJian University of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 350122，China；

2.Fujian Academy of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 350003， ChinaAbstract：ObjectiveTo further purified and characterized of Pseudostellaria heterophylla polysaccharide. Methods After crushing Radix Pseudostellariae， the polysaccharide was extracted by water and ethanol precipitation method（40% ethanol）. The column of Cellulose DE-52 and Sephacryl S-300HR was used to separate and purify it. High performance gel permeation chromatography（HPGPC） was used to analyze the average molecular weight， high performance liquid chromatography（HPLC） of 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone（PMP） pre-column derivatization was used to analyze its monosaccharide components. ResultsA novel homogeneous polysaccharide， named as H-1-1， was obtained. The mean molecular weight of HPh-1-1 was 18400Da and it was only composed of glucose. ConclusionThe Pseudostellaria heterophylla homogeneous polysaccharide HPh-1-1 was a kind of dextran.

Keywords：Pseudostellaria Heterophylla Polysaccharide；Molecular Weigh；Monosaccharide Components

太子參為石竹科植物孩兒參Pseudostellaria heterophylla（Miq）Pax ex Pax et Hoffm.的干燥塊根，具有益氣健脾、生津潤肺作用[1]。多糖是太子參重要活性成分之一，研究表明，太子參多糖具有降低血糖、血脂[2～3]、改善胰島素抵抗[4]等功效。課題組前期對太子參粗多糖以40%的乙醇沉淀，經藥理實驗驗證，得到其抗二型糖尿病活性部位（PF40）[5]。本研究采用DEAE-纖維素、葡聚糖凝膠柱層析方法，對PF40進行分離純化，得到均一多糖；并分析其分子量及單糖組成，為進一步探討太子參多糖的化學組成及藥理相關性研究奠定基礎。

1儀器與材料

11儀器Ultimate 3000高效液相色譜儀（Dionex公司）；UV-3200型紫外分光光度計（上海美譜達儀器有限公司）；MOKULYOD-230型冷凍干燥儀（Thermo Fisher公司）；層析柱（上海錦華層析設備廠）；HL-2D定時數顯恒流泵；DBS-100電腦全自動部分收集器（上海滬西分析儀器廠有限公司）；AE240S型電子分析天平（梅特勒-托利多有限公司）；BC-R501B旋轉蒸發器（上海生物化工設備有限公司）；HH-4型恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）；DHG-9140A型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）。

12材料太子參（福建柘參種業有限公司）；Cellulose DE-52（Whatman公司，批號：1030A024）；Sephacryl S-300HR（GE公司，批號：10222040）；葡聚糖分子量標準套（中國食品藥品鑒定研究院，批號，201203）；D-葡萄糖、D-甘露糖（分析純，國藥集團化學試劑有限公司，批號：20140117）；L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-半乳糖、D-阿拉伯糖（分析純，Sigma公司，批號：20120203），乙腈（色譜純，Merck公司，批號：608000203），1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）、氯化鈉、硝酸鈉、無水乙醇、丙酮、濃硫酸、苯酚、濃鹽酸、氫氧化鈉（分析純，國藥集團化學試劑有限公司，批號：20140617）。

2方法與結果

21太子參均一多糖的提取與分離干燥太子參粉碎后過40目篩，經90%乙醇回流提取3次；藥渣經水提3次，每次2h，過濾，濾液經減壓蒸餾濃縮至原體積1/20；Sevage法脫蛋白，溶液經90%乙醇沉淀，離心；沉淀用蒸餾水溶解，以終濃度40%的乙醇沉淀；離心，沉淀經無水乙醇、丙酮反復洗滌后冷凍干燥，得PF40多糖。經Cellulose DE-52柱和Sephacryl S-300HR柱進一步分離純化，用苯酚-硫酸法跟蹤檢測，收集水洗脫餾分，經濃縮、透析后冷凍干燥，得到1種均一多糖組分，命名為HPh-1-1，分離流程見圖1。

3討論

近年來，太子參多糖的研究在化學成分、藥理等各方面都不斷深入。本研究采用DEAE-纖維素、葡聚糖凝膠柱聯合應用對太子參多糖進一步分離提純切實可行。分離出一種均一多糖HPh-1-1，通過高效滲透色譜法測得其分子量為18400Da，PMP-柱前衍生高效液相色譜分析表明HPh-1-1是一種葡聚糖。為太子參多糖化學結構和藥理相關性進一步研究奠定了基礎。參考文獻

[1]王文凱，賈靜，丁仁偉，等.太子參近年研究概況[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（12）：264-267.

[2] 姚先梅，段賢春，吳健，等.太子參多糖對實驗性糖尿病大鼠血糖、血脂代謝和腎臟病理的影響[J].安徽醫藥，2014（1）：23-26.

[3] 徐錦龍，徐愛仁，應景艷，等.太子參多糖對實驗性糖尿病大鼠血糖及胰島素的影響[J].中華中醫藥學刊，2012（2）：423-424.

[4] 王琪，柴單單，吳曉華，等.太子參多糖減輕高脂誘導的小鼠肝臟胰島素抵抗[J].中國病理生理雜志，2015，31（4）：685-689.

[5] Juan Hu，Wensheng Pang，Jinlong Chen，et al.Hypoglycemic effect of polysaccharides with different molecular weight of Pseudostellaria heterophylla [J].BMC Complementary And Alternative Medicine，2013，13（1）：267.

（收稿日期：2016-12-02編輯：梁志慶）

參考文獻：按GB/T 7714-2015《信息與文獻 參考文獻著錄規則》中的順序編碼制著錄，依照其在文中出現的先后順序用阿拉伯數字加方括號角標標出，并將序號置于方括號中，排列于文末。綜述類文章參考文獻應盡量在25條/篇以上。

基金項目：遼寧省大學生創新訓練項目（NO：201410160005）