蛹蟲草的規范化栽培技術

肖淑媛+胡長生

摘 要：蛹蟲草又稱蛹草、北蟲草、北冬蟲夏草等，在真菌分類中與冬蟲夏草隸屬于子囊菌亞門、核菌綱、麥角菌目、麥角菌科、蟲草屬，是一種蟲或蛹與菌的結合體。蛹蟲草與冬蟲夏草一樣，具有很高的營養價值和藥用價值。由于天然蟲草資源的不夠，為了保護生態環境，許多學者進行了人工培栽培蟲草的試驗研究。其中，尤以蛹蟲草的研究和應用最多。本文從品種的選擇、栽培與管理等方面，介紹蛹蟲草的規范化栽培技術。

關鍵詞：蛹蟲草；規范化；栽培技術

蟲草通常有兩種含義，一種含義是指：蟲草屬中最為著名的冬蟲夏草；另一種含義是指：蟲草是指蟲草屬中所有的真菌，如冬蟲夏草、蛹蟲草、古尼蟲草、蟬花蟲草等。

蟲草屬菌類，是真菌在冬天寄生在昆蟲的幼蟲、蛹、成蟲體內，在蟲體內生長繁殖，讓蟲體成為充滿菌絲的僵蟲，次年環境適宜時蟲體長出有柄的頭狀或棒狀子座，是蟲與草的復合體。

蟲草種類較多，據報道全世界大約有400多種。在蟲草屬中蛹蟲草是這個屬中專化性不強的種，能廣泛侵染鱗翅目、鞘翅目等2000多種昆蟲的幼蟲、蛹、成蟲，以蛹較為常見。同時，也可以在人工培養基上生長，如大米培養基。因此，蛹蟲草的人工栽培既可以用大米培養基進行，其產品為蛹蟲草的子座；也可用柞蠶、桑蠶的蛹和馬尾松毛蟲的成蟲和幼蟲等進行，能獲得包括寄主在內的蛹蟲草子實體（下次介紹）。

蛹蟲草原為野生，主要產于高海拔地區及樹木叢生的深山老林，產量少，遠不能滿足人們的消費需求。我國于1986年開始人工栽培，以大米培養基為主的栽培技術，已在全國許多地方試驗成功，這為蛹蟲草的規范化生產奠定了技術基礎。筆者擬就介紹多年來從事蛹蟲草栽培的一些經驗和體會，以同各界朋友交流，共同提高蛹蟲草的規范化栽培技術及產品品質。

一、菌種選育與復壯

人們在蛹蟲草栽培中遇到的難題，是蛹蟲草菌種的退化顯著，優良性狀不能穩定遺傳。筆者選育的一個較好菌株，使用得好的話，可保持一到兩年優質高產；否則，使用半年左右，甚至是轉種幾代后菌種就嚴重退化，其特征為不長子實體或只長出極少量子實體，而且質量極差。因此，掌握成熟的菌種選育與復壯技術，是實現蛹蟲草規范化栽培的前提條件。

1.菌種選育

一般采用組織分離法進行菌種選育，此法具有操作方便，菌絲萌發快，能保持原菌種的優良種性等特點。

（1）選優良菌株。從野外或者室內選生長健壯、大小適中、無病蟲害八成熟的、第一批優良蛹蟲草菌株。

（2）消毒。將鮮蛹蟲草用清水洗去外表泥土，用75%酒精浸泡3～5秒鐘，無菌水沖洗2～3次，再用0.1%升汞水溶液消毒l～3分鐘，用無菌水沖洗3～5次，洗凈后進行分離。從室內選的菌株僅需酒精消毒，無菌水沖洗即可。

（3）分離。縱剖有龜背狀花紋的蛹蟲草頂端組織子實體，用尖頭鑷子取內部白色組織塊，取綠豆粒大的組織接種到已消毒的斜面培養基中部。

（4）培養。把已接種的斜面培養基放在培養室培養，培養室殺菌消毒，避光，保持培養室的溫度25℃左右，空氣濕度60%左，經常檢查，把污染的去除，培養5～10天，菌種已培養好，挑選性狀優良的菌種作為母種。

（5）優良菌種標準。白色菌絲粗壯濃密，且緊貼培養基匍匐狀生長，邊緣整齊，氣生絨毛狀菌絲少，見光后菌絲變為橘黃色。

2.菌種提純

（1）消毒。將優良母種和已消毒的斜面培養基試管放入超凈工作臺內。先用肥皂洗凈雙手，再用75%酒精棉球擦手和菌種管表面，在酒精燈火焰上灼燒消毒。

（2）轉管。轉管時兩手從接種孔伸入超凈工作臺內，75%酒精棉球擦拭接種環。左手持菌種管和斜面管，兩支試管口對齊于火焰上方。右手持接種環，并將其在酒精燈火焰上干熱滅菌，用小指及無名指拔掉棉塞，使棉塞底部朝外。接種環冷卻后伸入菌種管內取黃豆粒大并帶有薄薄培養基的菌絲塊，迅速移入斜面培養基的中部，菌絲朝上。然后，將棉塞在火焰上燒一下，立即塞入試管口，旋緊棉塞。

接種環不要觸碰管口及管壁，以防感染。適溫培養5～10天左右即可。

3.出草實驗

將提純菌種，在無菌條件下接種到培養基上，在培養室培養。在溫度為18～22℃，濕度適宜的條件下培養20～30天，即可形成橙紅色子實體。經鑒定，選優良菌種進行生產。

4.菌種復壯

菌種繁殖應無性繁殖與有性繁殖交替進行，否則菌種性狀易退化，其表現為出草不整齊、畸形，甚至不出草。因此，在生產過程中應及時對菌種進行有性繁殖來提純復壯。

（1）消毒。選取高產、優質、早熟的蛹蟲草子實體消毒。

（2）接種。將消毒的子實體懸掛于裝有PDA培養基的無菌三角瓶內。

（3）培養。接種的三角瓶在25℃左右條件下，在無菌室靜置培養一天，當三角瓶的培養基表面出現大量蛹蟲草的白色菌絲時，在超凈工作臺上挑取單個或多個菌絲，用接種環接種到試管斜面培養基中部進行培養。當蛹蟲草菌絲布滿斜面后再提純。獲得的母種經出草試驗后，選擇優質蛹蟲草子實體再進行組織分離法培養，獲取的母種可以擴繁栽培種。

二、培養基的制作與滅菌

1.液體培養基

液體培養基常見的有采用搖床來生產的搖瓶培養法和采用發酵罐來生產的深層培養法。現介紹搖瓶培養法。

（1）液體培養基的配制與滅菌

①配方。磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂1g，檸檬酸銨1g，葡萄糖30g，蛋白棟3g，維生素B150mg，馬鈴薯營養液200ml定容至1000ml。

②搖瓶振蕩培養。把配好的液體培養基裝入錐形瓶中，每瓶裝150毫升，瓶口用棉塞、牛皮紙密封。

③滅菌。高壓滅菌，把已經裝好營養液體的三角瓶放在高壓滅菌鍋內，當壓力表讀數為0.1～0.15MPa時，即121℃，滅菌15～30min。

④接種。滅菌后的三角瓶在無菌條件下接入2～4塊約1cm2的斜面菌種，于23℃～25℃下靜置培養24h。

⑤培養。菌絲萌發時放置在搖床上振蕩培養，振蕩頻率為每分鐘80～130次。搖床的溫度控制在23℃～25℃，培養時間因菌類不同而異，一般是5天左右。將振蕩好的培養基倒入大容器里，經過擴容后，在無菌條件下安裝通氣管，用輸氧機通入適量氧氣后培養48小時即可。若沒有輸氧機，振蕩培養一周左右也可。

⑥培養結束的標準。營養液清澈透明，其中懸浮著大量小菌絲球，并伴有菌類特有的香味。

2.大米培養基

（1）大米培養基的制作。據試驗，蛹蟲草的培養基，其配方為大米加營養液，以350ml玻璃廣口瓶作為培養瓶，按培養基配方，先稱大米，要求大米新鮮、無霉變、無污染，最好是雜交米，在天平上稱30克大米，倒入培養瓶中，加入35ml左右液體培養基，大米與營養液的比例要適當，不能太干或太濕，適宜的含水量為60%左右。瓶口用透氣的封口膜封好，外用牛皮紙包好。

（2）大米培養基的滅菌。高壓滅菌，當壓力表讀數為0.1～0.15MPa時，即121℃，保持1～1.5小時；常壓滅菌8～10小時，常壓滅菌時必須在3小時以內灶內溫度達到100℃，否則培養基容易酸化變質，影響產量。

三、接種和培養

1.接種

培養基冷卻到30℃以下時，在無菌條件下接種。在超凈工作臺上，將液體菌種接種到培養基上，方法是左手拿培養基，瓶口對酒精燈火焰，右手拿菌種瓶往培養瓶內注射菌種。若大批量生產可以采用專用接種槍，每瓶注射菌種5～10ml，接種完后培養瓶放在培養室的培養。

2.培養

接種后將栽培瓶置清潔避光處培養。發菌初期，為減少雜菌污染，保持室溫15～18℃，待料面布滿菌絲后，將溫度調到20～23℃，空氣相對濕度65%左右，空氣新鮮。經15天左右培養，菌絲長滿料瓶，完成營養生長。

四、出草管理

蛹蟲草的出草對環境條件要求較嚴，環境因子控制得好，出草快，質量好，否則出草慢，甚至不出草。

1.控制好溫度

蛹蟲草是變溫結實性菌類，對變溫菌類而言，溫度是所有環境因素中最重要的因素。蛹蟲草出草的溫度為10～25℃，適宜溫度為18～22℃。出草如遇低溫會產生畸形，影響產量和質量，溫度在23℃以上時生長不良。人工培育過程中應保持恒溫管理，只有在原基分化時期才適宜給較大晝夜溫差刺激，溫差保持在8～10℃左右。

2.適宜的濕度

濕度也是蟲草生長的重要因素之一，它包括培養基濕度和空氣相對濕度，培養基濕度為60%左右。采收第一批子實體后，培養基含水量下降至45%～50%，在轉潮期補足水分，通常用營養液進行補水。子實體生長期間，特別是在中后期，要求空氣相對濕度達到90%～95%，這樣可以延遲蛹蟲草的衰老，提高產量。一般出草到成熟需向瓶中注水3～4次。

3.通風良好

菌絲生長和子實體的發育均需保持良好的通風條件，當瓶子發滿菌后，應立即進行通風，方法是用竹簽在封口膜上刺幾個圓孔通風，直到蟲草成熟，同時每天開窗通風兩次，每次30分鐘。

4.光照適宜

光照是蛹蟲草栽培的又一個重要因素。菌絲長滿瓶后開始見光，但避免太陽光直射。原基形成和子實體生長發育需要較充足的散射光，光照強度保持在100～200勒克斯以上。原基形成時，要求較強的散射光刺激，且每天要求光照時數在10小時以上。但須防止晝夜連續光照，否則子實體將難以分化。室內栽培用日光燈補充光源，燈管距栽培瓶30～50cm。蛹蟲草有較強的趨光性，在子實體形成后，應經常調整光源的方向，以保證子實體直立生長，形成優質的棒狀的子座。當子實體5～8cm時即停止生長，子實體成熟。

五、及時采收

當子實體成熟，頭部出現龜裂狀花紋，表面出現黃色粉末狀物，及時采收。如采收過遲，則子實體枯萎或倒苗腐爛。采收時，用無菌手術鑷子將子實體從培養基上摘下即可。采收后，停水3～4天后在瓶內注入營養液，包扎好瓶口，繼續培養，10～20天左右，又可長出第二批。采后子實體要及時烘干，烘干的產品要存放到密閉的塑料薄膜袋內。

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