槲寄生水煎液治療更年期女性干眼癥的臨床療效

余 靜 葉鱗泓 裴重剛 姜 楠 徐 丹 葉 蕾 高桂平 邵 毅

(南昌大學第一附屬醫院眼科，江西 南昌 330006)

槲寄生水煎液治療更年期女性干眼癥的臨床療效

余 靜1葉鱗泓 裴重剛 姜 楠 徐 丹 葉 蕾 高桂平 邵 毅

(南昌大學第一附屬醫院眼科，江西 南昌 330006)

目的 探討槲寄生水煎液治療更年期女性干眼癥的臨床效果。方法 60例(60眼)女性干眼癥患者(45～55歲)被隨機分為兩組：實驗組30例口服槲寄生水煎液和對照組30例口服安慰劑維生素C片。兩組均加用羥糖甘滴眼液滴眼治療；分別在治療前和治療后1 w，1、2個月各時間點檢測并評定患者干眼眼表疾病指數(OSDI)、淚膜 4 項、淚液蛋白，觀察治療前后角膜共聚焦顯微鏡下情況。結果 治療前，兩組患者各檢測指標之間差異無統計學意義(P>0.05)；治療1 w、1、2個月后，試驗組患者OSDI、淚膜破裂時間(BUT)、淚液分泌實驗(SIT)、淚河高度及角膜災光素染色(FL)均有顯著變化(均P<0.05)；淚液蛋白(TP)，乳鐵蛋白(LF)，溶菌酶(LZM)，分泌型免疫球蛋白(sIgA)均有不同程度改變，但差異無統計學意義(均P>0.05)；對照組治療1 w、1個月后，OSDI均有變化(均P<0.05)；至治療后第2個月時患者的OSDI、BUT、SIT、淚河高度及FL均無明顯變化(均P>0.05)。經過治療2個月后，試驗組上皮朗格漢細胞和炎癥細胞密度分別為(8±4)cells/mm2和(52±22)cells/mm2，而對照組上皮朗格漢細胞和炎癥細胞密度分別為(51±24)cells/mm2和(251±66)cells/mm2，兩組比較差異均有統計學意義(均P<0.05)。結論 槲寄生水煎液可有效減輕更年期女性干眼癥的癥狀和體征，具有一定的臨床意義。

槲寄生水煎液；干眼癥

絕經后婦女和老年男性雄激素水平下降常常會誘發干眼〔1〕。槲寄生為桑寄生科，味苦、性平，歸肝、腎經，具祛風濕、補肝腎、強筋骨、安胎的功效，為歷版藥典所收載。槲寄生主要含有黃酮類物質，可與性激素受體結合而發揮作用，其化學結構與雄激素類似可以起到擬雄激素的作用，但不會像雄激素引起女性男性化、粉刺等多種并發癥，具有明顯的優勢，并能有效地縮短病程，達到治本的目的〔2〕。

1 資料與方法

1.1 對象 2014年10月至2015年10月在南昌大學第一附屬醫院眼科確診為干眼癥的60例更年期女性。(1)更年期女性的納入標準：①年齡45～55歲的女性，除月經失調外，潮熱多汗為典型癥狀，或伴有易怒、心悸、精神、神經癥狀表現異常，記憶力減退，腰酸背痛等；②內分泌水平測定：雌二醇(E2)降低，促卵泡激素(FSH)、促黃體生成激素(LH)增高；③排除心血管疾病，精神、神經性疾病，甲狀腺功能異常等。(2)干眼的納入標準〔2〕：①主要癥狀(必需)：干澀感、異物感、疲勞感、各種不適癥狀；②淚膜不穩定(必需)：通過淚膜破裂實驗，測淚膜破裂時間(BUT)陽性<10 s；③淚液分泌實驗(SIT)及淚河高度測驗提示淚液分泌減少；④淚液乳鐵蛋白(LF)減少或滲透壓增加(加強診斷)；⑤出現眼表損害(加強診斷)：角膜熒光素染色(FL)淚液滲透壓增加。排除其他原因時，具有①+②(≤5 s)或①+(5 s<②≤10 s)+③或⑤可確診。④⑤兩項為加強診斷。本研究按照赫爾辛基宣言的原則進行，根據兩家醫院倫理委員會的要求，向每一例患者對于研究的方法及內容做了詳盡的解釋，并獲得患者同意簽署了知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 槲寄生水煎液的調制方法 槲寄生20 g，清洗后加水至200 ml，煎煮前在砂鍋內用水浸泡約30 min，采用直火煎煮法煮沸3 min后去火調制而成。

1.2.2 實驗分組 為確保實驗組與對照組間具有最大程度的可比性，最大限度地減少非實驗因素的影響，如年齡、病程等，按不平衡指數最小的分配原則將60例入選者(60眼)隨機分成兩組：試驗組30例口服槲寄生水煎液350 ml/次，2次/d；對照組30例口服安慰劑維生素C片50 mg/次，2次/d；連續服用2個月，兩組均加用羥糖甘滴眼液滴眼治療。根據“80%把握度下每組樣本例數公式n=15.6R+1.6，確定本研究兩組樣本量30例〔3〕。

1.3 眼表疾病指數(OSDI)問卷調查表 被廣泛應用于評估眼表面疾病，如眼部不適的癥狀：干眼及干眼相關疾病。受試者回答表中的問題并進行評分，最終匯總分值判斷有無干眼癥。但在評估其他并存的眼部疾病時，應注意這份問卷的多維性。總分計算使用方程：12.5×〔(個人問題分數之和)/(回答問題)〕，產生總得分從0～100分不等。按嚴重程度分類：正常=0～12分，輕度=13～22分，中度=23～32分，嚴重=33～100分。除了總OSDI得分，相同的公式用于計算兩個部分的得分：OSDI 視覺相關分數和OSDI眼相關不適分數。OSDI 視覺相關分數評估了眼部表面疾病對視覺功能的影響(視力模糊、視力不良、閱讀，開車，使用電腦及看電視的限制)。OSDI眼相關不適分數評估有關刺激癥狀或不適(光感性；異物感或疼痛/酸痛；在風中、干燥或空調環境的不適)〔4〕。

1.4 淚膜四項〔5〕BUT：熒光素鈉染色后囑患者做瞬目運動，從最后一次瞬目后睜眼至角膜出現一個黑斑的時間。FL：將眼科測試紙貼近患者眼球，主要檢查角膜的情況。正常角膜上皮在用熒光素鈉染色后，裂隙燈下觀察不染色，若角膜上皮受損則會被染色。SIT：用一條濾紙并將一端折彎置眼內，其余部分懸垂于皮膚表面，輕閉雙眼，5 min后測量濾紙被淚水滲濕的長度，<5 mm提示干眼。淚河高度測量：采用裂隙燈檢查法觀察在角結膜表面的光帶和下瞼瞼緣光帶的交界處淚液的液平高度。

1.5 淚液中蛋白質 淚中含有多種抗微生物蛋白質，de Souza等〔6〕研究已發現淚液中含有491種不同的蛋白質，目前最主要的蛋白包括淚液蛋白(TP)、LF、溶菌酶(LZM)和分泌型免疫球蛋白(sIg)A。從上午9點至11點收集所有淚液，采用Brandford法測量TP的含量，采用放射免疫法測定了LF濃度。最后，用濁度計測定LZM濃度。

1.6 角膜共聚焦顯微鏡檢查 操作方法參考文獻〔7〕，將病人眼表麻醉后，頭固定在顯微鏡下，囑他們眼睛直視前方。慢慢地向前推鏡頭觀察選擇有價值的圖片和視頻保存，計算角膜上皮朗格漢細胞和炎癥細胞的密度。

1.8 統計學方法 應用SPSS16.0軟件行t檢驗、秩和檢驗。

2 結 果

2.1 兩組患者治療前后眼表癥狀評分和淚膜情況比較 兩組治療前的OSDI、BUT、SIT、淚河高度及FL相比差異均無顯著性差異(tOSDI=0.491，tBUT=0.729，t淚河高度=0.913，tSIT=0.734，tFL=0.813，均P>0.05)；治療后1 w及1個月兩組患者SIT、淚河高度及FL相比差異均有統計學意義(tSIT=4.539，t淚河高度=5.124，tFL=9.329，均P<0.05)，兩組患者OSDI 、BUT相比差異無統計學意義(tOSDI=1.012，tBUT=0.924；tOSDI=1.537，tBUT=0.849，均P>0.05)；治療后2個月兩組患者的OSDI、BUT、SIT、FL及淚河高度相比差異均有統計學意義(tOSDI=9.522，tBUT=10.324，t淚河高度=8.721，tSIT=6.329，tFL=5.743，P均<0.05)。試驗組患者治療后，OSDI、BUT、SIT、淚河高度在術后1 w和1個月也均有變化(1 w：tOSDI=8.323，tBUT=4.515，t淚河高度=6.301，tSIT=10.419；1個月：tOSDI=6.831，t淚河高度=9.226，tSIT=7.133，均P<0.05)，至治療后2個月時患者OSDI、BUT、SIT、淚河高度及FL也均有變化，差異有統計學意義(分別為tOSDI=13.516，tBUT=12.552，t淚河高度=16.378，tSIT=12.247，tFL=9.417，均P<0.05)；對照組患者治療后1 w和1個月OSDI均有變化，差異有統計學意義 (tOSDI=10.532，13.929；均P<0.05)，至治療后第2個月時患者的OSDI、BUT、SIT、淚河高度及FL均無明顯變化，差異無統計學意義(tOSDI=0.641，tBUT=0.956，t淚河高度=0.428，tSIT=0.685，tFL=0.367，均P>0.05)。見表1。

2.2 治療前后兩組間各時間點TP對比 見表2。治療前，兩組患者淚液TP，LF，LZM，sIgA差異無統計學意義(tTP=0.774，tLZM=0.532，tLF=0.758，tslgA=0.537，均P>0.05)；治療后1 w，兩組患者TP，LF，LZM，sIgA較治療前均有不同程度下降，但兩組在不同時間段比較差異無統計學意義(均P>0.05)；治療后1個月及2個月，兩組患者淚液TP，LF，LZM，sIgA較治療前均有不同程度提高，但兩組在不同時間段比較差異無統計學意義(均P>0.05)。

組別時間OSDIBUT(s)SIT(mm)淚河高度(mm)2%FL試驗組 術前43.22±10.132.58±3.123.12±1.120.18±0.229.02±2.46 術后1w37.13±9.862)3.82±2.642)4.36±2.591)2)0.26±0.271)8.54±2.281) 術后1個月28.24±11.852)6.84±3.762)10.67±4.221)2)0.69±0.211)3.89±2.351) 術后2個月21.12±10.431)2)9.15±2.871)2)11.88±6.591)2)0.76±0.151)2)2.71±2.611)2)對照組 術前44.83±12.252.39±3.543.24±1.070.19±0.248.97±2.58 術后1w38.89±18.522)2.71±2.663.66±1.310.24±0.318.36±2.19 術后1個月34.32±14.962)3.51±3.973.82±2.120.28±0.298.52±1.97 術后2個月34.67±11.593.69±3.823.89±2.380.31±0.228.43±2.12

與對照組相比：1)P<0.05；與術前相比：2)P<0.05

組別TPLZMLFsIgA試驗組術前12.23±2.861.25±0.881.33±0.36139.79±10.96術后1w11.39±2.561.39±0.621.42±0.39142.01±15.19術后1個月14.84±1.812.37±1.261.61±0.34150.18±16.82術后2個月15.79±2.932.29±1.611.68±0.49154.19±18.94對照組術前11.73±2.911.26±0.921.38±0.29137.81±12.61術后1w10.09±1.771.43±0.571.45±0.21139.79±19.28術后1個月13.52±2.262.29±1.121.51±0.33148.56±16.74術后2個月13.74±2.182.42±1.261.69±0.28147.20±18.69

2.3 兩組治療前后角膜共聚焦顯微鏡結果 正常角膜上皮細胞為光暗均勻細胞體，細胞邊界較輕；治療前角膜上皮層間可見炎癥細胞和朗格漢細胞明顯增加；試驗組1個月角膜上皮層可見極少數的炎性細胞浸潤和朗格漢細胞，上皮細胞密度較治療前明顯增加；對照組1個月后，角膜上皮細胞體積縮小，角膜上皮層可見有大量的呈亮光樣炎性細胞和形體彎曲的朗格漢細胞，上皮基底細胞密度明顯減少。見圖1。治療2個月后，試驗組上皮朗格漢細胞和炎癥細胞密度分別為(8±4)cells/mm2和(52±22)cells/mm2，而對照組上皮朗格漢細胞和炎癥細胞密度分別為(51±24)cells/mm2和(251±66)cells/mm2，兩組比較差異顯著(tBC=6.256，tIC=8.732，均P<0.05)。

圖1 治療前后兩組角膜共聚焦顯微鏡結果

3 討 論

干眼癥包括眼睛干澀、有異物感、視力模糊、刺激和眼痛。對于干眼，各種損傷可能會導致眼表面的損害，包括感染、炎癥、創傷、眼部解剖結構異常和高淚液滲透壓等。干眼分為淚液生成不足型、蒸發過強型兩種類型〔8〕。目前，干眼多是以局部對癥治療為主，包括人工淚液、糖皮質激素及免疫抑制劑等眼液滴眼以及行淚道栓塞治療。若選用人工淚液，需注意藥物應不含有抗生素，并且需藥內所含的保存劑對角膜結膜影響極小或沒有影響。若患者需長期使用人工淚液制劑，應首選不含防腐劑或所含的防腐劑對角膜影響小的人工淚液。目前雄激素替代療法是治療此類干眼的主要方法，但長期雄激素的使用會產生很多嚴重的副作用。尋找雄激素替代藥物勢在必行。近年來已有研究表明，密蒙花茶、鬼針草不僅在動物實驗上能用于治療兔雌/雄激素下降導致的干眼模型〔9〕，可明顯減輕中重度更年期干眼女性的癥狀和體征，具有一定的臨床價值。其中的黃酮類化合物結構因與雄激素類似，所以可以發揮功效〔10〕。但密蒙花味較甜，不適合糖尿病患者；鬼針草苦，味道不佳，患者依從性下降。

有學者從槲寄生中分離出36個黃酮類化合物，間接或可能直接產生擬雄激素活性作用，淚腺等眼表組織有雄激素受體〔11〕，與雄激素結合而發揮作用，治療雄激素水平下降引起的淚液分泌功能失調綜合征。槲寄生中的甲基鼠李素用于抗新生血管、抗感染和抗腫瘤，能通過抑制血管內皮生長因子受體2(VEGFR2)信號通道而發揮抑制新生血管、抗感染和抗腫瘤作用，而干眼本身就是一種眼部炎癥，對干眼抗炎發揮一定的作用〔12〕。槲寄生中含有茶堿，常常引起患者流淚，可起到防止干眼患者干眼癥狀繼續惡化的作用。Deeni等〔13〕研究發現，槲寄生有著廣譜的抗菌活性，對某些多重耐藥細菌和真菌均有效果。同時槲寄生中含有凝集素、磷脂成分可促進機體的免疫力，提高抑菌能力。

本研究結果表明槲寄生水煎液可以明顯改善干眼癥狀，可能因為槲寄生水煎液中的黃酮類化合物發揮擬雄激素的作用；治療后1 w，兩組患者TP、LF、LZM、sIgA較治療前下降，而治療后1個月及2個月提高，可能是因為開始時淚液分泌增多、各成分稀釋，微環境恢復后蛋白分泌恢復正常；對照組治療效果不明顯。此外，本文還發現槲寄生水煎液能有效減少雄激素失調性干眼癥的炎癥細胞和朗格漢細胞浸潤，減少炎癥反應；且經槲寄生水煎液治療干眼后無明顯眼部和全身反應。

1 Azcarate PM，Venincasa VD，Feuer W，etal.Androgen deficiency and dry eye syndrome in the aging male〔J〕.Invest Ophthalmol Vis Sci，2014；55(8)：5046-53.

2 劉祖國，彭 娟.干眼的診斷與治療規范〔J〕.眼科研究，2008；26(3)：161-4.

3 方積乾.生物醫學研究的統計方法〔M〕.北京：高等教育出版社，2007：285.

4 Miller KL，Walt JG，Mink DR，etal.Minimal clinically important difference for the ocular surface disease index〔J〕.Arch Ophthalmol，2010；128(1)：94-101.

5 邵 毅，余 瑤，黃國棟，等.鬼針草治療絕經期女性中重度干眼癥臨床初探〔J〕.中國實用眼科雜志，2012；30(7)：805-10.

6 de Souza GA，Godoy LM,Mann M.Identification of 491 proteins in the tear fluid proteome reveals a large number of proteases and protease inhibitors〔J〕.Genome Biol，2006；7(8)：72.

7 Chen W，Li Z，Hu J，etal.Corneal alternations induced by topical application of benzalkonium chloride in rabbit〔J〕.PLoS One，2011；6(10)：e26103.

8 Galor A，Levitt RC，Felix ER，etal.Neuropathic ocular pain：an important yet underevaluated feature of dry eye〔J〕.Eye (Lond)，2015；29(3)：301-12.

9 邵 毅，余 瑤，王 樂，等.鬼針草滴眼液治療去勢雄兔干眼癥的實驗研究〔J〕.中國現代醫學雜志，2015；25(21)：21-5.

10 邵 毅，余 瑤，裴重剛，等.密蒙花茶治療絕經期女性中重度干眼的臨床研究〔J〕.中華中醫藥雜志，2012；27(12)：3243-4.

11 Fuchsjager-Mayrl G，Nepp J，Schneeberger C，etal.Identification of estrogen and progesterone receptor mRNA expression in the conjunctiva of premenopausal women〔J〕.Invest Ophthalmol Vis Sci，2002；43(9)：2841-4.

12 Yu Y,Cai W,Pei CG,etal.Rhamnazin,a novel inhibitor of VEGFR2 signaling with potent antiangiogenic activity and antitumor efficacy〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2015；458(4)：913-9.

13 Deeni YY，Sadiq NM.Antimicrobial properties and phytochemical constituents of the leaves of African mistletoe (Tapinanthus dodoneifolius (DC)Danser)(Loranthaceae)：an ethnomedicinal plant of Hausaland，Northern Nigeria〔J〕.J Ethnopharmacol，2002；83(3)：235-40.

〔2016-05-17修回〕

(編輯 郭 菁)

國家自然科學基金資助(81160118，81400372)；江西省遠航工程(2014022)；江西省學位與研究生教育教學改革研究項目(2015)；江西省科技平臺建設項目(2013116)；江西省青年科學基金(20151BAB215016)；江西省科技支撐計劃項目(20151BBG70223)；江西省衛計委科技計劃項目(20155154)；贛江學者計劃(2015)

1 杭州市中醫藥針灸科

邵 毅(1982-)，男，副主任醫師，副教授，主要從事干眼癥研究。

余 靜(1989-)，女，住院醫師，主要從事干眼癥研究。

R320.37

A

1005-9202(2017)07-1710-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.07.061