p16蛋白、細胞分化抑制因子-1(Id-1)、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216在宮頸癌組織中的表達及其意義

董云虹

遼寧省遼陽市中心醫院婦產科 (遼陽 111000)

p16蛋白、細胞分化抑制因子-1(Id-1)、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216在宮頸癌組織中的表達及其意義

董云虹

遼寧省遼陽市中心醫院婦產科 (遼陽 111000)

目的：探討p16蛋白、細胞分化抑制因子-1(Id-1)、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216表達水平在宮頸癌組織中的表達及其意義。方法：以我院接收治療的30例無淋巴轉移及30例淋巴轉移宮頸癌患者為研究對象。應用統計學方法對兩組宮頸癌變組織間各項指標表達差異進行分析處理。結果：兩組患者各項指標表達水平具有顯著統計學差異，且與淋巴轉移及病理分級密切相關，淋巴結轉移陽性癌組織p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9表達顯著高于淋巴結轉移陰性患者，而p-GSK3β Tyr216表達水平正好相反。結論：p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216的表達與宮頸癌發生發展的全過程密切相關，這一結論在宮頸癌的早期診斷、預防、治療等過程中均具有很好的臨床應用價值。

宮頸癌是一種婦科常見腫瘤疾病，復發率極高，嚴重威脅著婦女生命健康[1]。近年來隨著環境的惡化、人們生活壓力的不斷增大、生活節奏的不斷加快，宮頸癌的發病率呈現出了逐年上升的趨勢[2]。宮頸癌從癌前病變到發展為癌癥一般需要十余年的時間，因此應用基因組學知識，提高對宮頸癌的臨床診斷、檢測水平，能夠在宮頸癌變前或者是癌癥早期發現病情，及時給予治療，提高宮頸癌臨床治愈率[3]。本文以對照實驗探討基因表達水平與宮頸癌的關系，進而尋找一種精確的診斷、檢測宮頸癌發生發展的臨床新技術。

資料與方法

1 一般資料 以我院2013年1月至2015年6月接收治療的30例無淋巴轉移及30例淋巴轉移宮頸癌患者為研究對象。兩組患者除病理分級、淋巴結轉移具有顯著差異外，年齡、文化程度均不具有顯著差異。兩組研究對象年齡均介于32～56歲之間，實驗組所有患者均在我院經反復組織病理學明確診斷，且臨床數據資料完整。

2 試劑與方法 應用免疫組織化學法分別檢測兩組宮頸癌組織切片各項實驗指標表達水平的差異。需要的制劑有鼠抗人單克隆抗體(p16蛋白、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216)、DAP顯色劑及廣譜試劑盒購于北京中山生物技術有限公司，兔抗人Id-1多克隆抗體Cav3.1、Cav3.2由美國SantaCruz公司生產二氨基聯苯胺(DAB)顯色試劑盒、APES、磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液購于福州邁新生物技術有限公司。首先取實驗組宮頸癌組織及對照組正常宮頸組織制備生物標本，然后應用免疫組織化學法進行表達水平測定。

3 顯著性判斷方法 由兩位經驗豐富的病理科主任醫師同時會診，根據組織切片染色后各組織表達蛋白染色不同，在高倍鏡下鏡檢技術結果，對p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216表達水平差異進行統計學分析。

4 統計學方法 以統計學軟件SPSS 22.0對兩組患者p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216的表達水平進行統計學分析研究，以t檢驗或χ2檢驗表示組間差異，P<0.05表示組間差異顯著。

結 果

兩組患者間p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216的表達水平具有顯著統計學差異，其中p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9的表達水平與淋巴結轉移及病理分級密切相關，晚期癌癥患者表達水平最高，早期癌癥表達水平最低，而p-GSK3β Tyr216表達水平正好相反。以上統計結果均具有顯著統計學差異,見表1～3。

討 論

宮頸癌為婦科常見癌癥之一，早期宮頸癌患者接受盆腔清掃術以及術后5年存活率高達90.00%以上[4]。人類基因組計劃實施以來，精準治療的概念已經在多國提出，精準治療的本質是一種基因水平上的個體化治療方案，以基因組學、蛋白質組學知識為依據，對疾病進行更加精細的分類和更加精準的治療，能夠達到對疾病的早期預防、診斷、治療[5]。

表1 各組患者p16蛋白、Cav3.1、Cav3.2表達水平對比[例(%)]

注：兩組各項比較P均<0.05

表2 實驗組、對照組Id-1陽性表達水平對比[例(%)]

注：正常人宮頸組織Id-1陽性表達率為0，兩組比較*P<0.05

表3 實驗組、對照組p-GSK3βser9和p-GSK3βTyr216的表達水平對比[例(%)]

注：兩組各項比較,P均<0.05

P16蛋白是直接參與細胞周期調控的抑癌基因，當機體某些組織發生癌變后，該基因被激活，并抑制癌癥的發生發展[6]。Id-1在宮頸癌組織中的表達與宮頸癌臨床分期以及病理分級等密切相關，近年來國內外研究表明，Id-1在宮頸癌中的表達與原癌基因受到物理、化學等因素影響激活后，癌細胞的無限繁殖呈正相關[7]。一般晚期宮頸癌患者Id-1基因表達水平顯著高于早、中期未發生淋巴轉移患者[8]。現代腫瘤醫學研究認為，癌癥與分子以及基因的改變密切相關，與此同時在細胞發生癌變后離子通道也會發生顯著生物學改變。T-型鈣通道有其獨特的激活、失活特性。相關文獻報道T-型鈣通道Cav3.1、Cav3.2在調節細胞增殖過程中具有重要意義，組織發生癌變后其表達水平顯著增高[9]。宮頸癌組織中糖原合成酶激酶3β具有一定的生物學功能，能夠調節細胞表面糖蛋白，與癌細胞的淋巴轉移具有密切關系。研究表明GSK3β的磷酸化與宮頸癌臨床病理分級以及癌擴散轉移具有一定的相關性，即磷酸化位點的活化是GSK3β活性調節的主要方式[10]。其中，ser9位點磷酸化能夠抑制GSK3β基因表達，使GSK3β功能性失活，因此晚期癌癥患者p-GSK3βser9增高，而Tyr216位點磷酸化可激活GSK3β活性，因此在早期患者體內表達水平較高。

本次研究結果表明，早期宮頸癌患者p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9的表達水平均低于晚期宮頸癌患者，而p-GSK3β Tyr216表達水平較晚期宮頸癌患者高。綜上所述，p16蛋白、Id-1、Cav3.1、Cav3.2、p-GSK3βser9、p-GSK3β Tyr216表達水平在宮頸癌疾病的早期診斷、預防、治療中具有十分重要的臨床應用價值。

[1] 朱素英.CK19和CK20mRNA在宮頸癌患者外周血中的表達及臨床意義[J].陜西醫學雜志,2012,41(2):142-143.

[2] 胡尚英,鄭榮壽,趙方輝,等.1989至2008年中國女性子宮頸癌發病和死亡趨勢分析[J].中國醫學利學院學報,2014,36(2):119-125.

[3] 江 濤,李隆玉,潘玫曾,等.p16在宮頸癌組織中的表達及其意義[J].實用癌癥雜志,2005,20(6):581-583.

[4] 胡云峰,雷 俠,趙 紅.多西他賽與順鉑配伍放療治療中晚期宮頸癌68例對比觀察[J],陜西醫學雜志,2012,41(5):605-607.

[5] 錢其軍,吳孟超.腫瘤精準細胞免疫治療:夢想照進現實[J].中國腫瘤生物治療雜志,2015,22(2):151-158.

[6] 郭瑞霞.hTERC基因和P16蛋白在子宮頸組織的表達及其意義[J].中國婦產科臨床雜志,2012,13(4):278-281.

[7] 馬莉娟,何金彩,柴澤英.細胞分化抑制因子-1與細胞增殖核抗原Ki - 67在宮頸癌中的表達及相關性研究[J].中國臨床藥理學雜志,2015,31(8):627-630.

[8] 孫大偉,冷 雙,李荷蓮,等.分化抑制因子-1在宮頸癌組織中表達及其與微血管密度的關系[J].中國實用婦科與產科雜志,2012,28(1):38-40.

[9] 張彬彬,李 威,張淑蘭.Cav3.1、Cav3.2在宮頸癌組織中的表達及其意義[J].中國婦幼保健,2014,29(32):5296-5298.

[10] 陳良鳳,張 穎,王仲奇,等.Gsk3β、p-GSK3βser9和p-GSK3β Tyr216在宮頸癌組織中的表達及臨床意義[J].中國婦幼健康研究,2015,26(5):934-937.

(收稿：2016-11-02)

子宮頸腫瘤 基因, p16 @細胞分化抑制因子-1

R737.33

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.04.037