TRPC6在IL-1β誘導類風濕關節炎成纖維細胞樣滑膜細胞增殖中的作用*

劉貴旺， 徐大為， 張瑋瓊， 許錦煌， 鄭沛中， 葉 培， 李建華， 黃建榮△

(1中山大學孫逸仙紀念醫院骨科， 廣東 廣州 510235； 2廣州醫科大學生理教研室， 廣東 廣州 511436； 3廣州市增城區人民醫院骨科， 廣東 廣州 511300； 4佛山市南海區人民醫院骨科， 廣東 佛山 528200)

TRPC6在IL-1β誘導類風濕關節炎成纖維細胞樣滑膜細胞增殖中的作用*

劉貴旺1， 徐大為1， 張瑋瓊3， 許錦煌3， 鄭沛中3， 葉 培4， 李建華2△， 黃建榮1△

(1中山大學孫逸仙紀念醫院骨科， 廣東 廣州 510235；2廣州醫科大學生理教研室， 廣東 廣州 511436；3廣州市增城區人民醫院骨科， 廣東 廣州 511300；4佛山市南海區人民醫院骨科， 廣東 佛山 528200)

目的： 應用RNA干擾技術研究瞬時受體電位通道6(TRPC6)對IL-1β誘導的類風濕關節炎(RA)成纖維細胞樣滑膜細胞(RA-FLS)增殖的影響。方法: RT-qPCR法檢測RA和骨關節炎(OA)患者滑膜組織中TRPC6 mRNA的表達水平。組織塊聯合酶消化法培養RA-FLS。流式細胞術鑒定RA-FLS。將不同濃度(0、0.25、0.5、1、2、4、8、16 μg/L)的重組人 IL-1β與 RA-FLS共培養36 h，CCK-8法檢測細胞活力的改變；16 μg/L的IL-1β作用RA-FLS不同時間(12、24、36、48、60、72 h)，CCK-8法檢測細胞活力的改變。特異性TRPC6-siRNA轉染RA-FLS后，采用RT-qPCR和Western blotting 檢測沉默效率。在IL-1β存在和不存在的條件下，CCK-8法、EdU標記法和流式細胞術檢測TRPC6干擾組與對照組的細胞活力、EdU陽性細胞比率和(G2/M+S)期比率的差異。結果: RA患者滑膜組織中TRPC6的mRNA表達水平相對于OA患者明顯增加(P<0.05)。TRPC6-siRNA能顯著降低RA-FLS中TRPC6 mRNA和蛋白的表達(P<0.05)。IL-1β能誘導RA-FLS增殖(P<0.05)。沉默TRPC6后，在IL-1β的誘導環境下，特異性干擾組RA-FLS 的活力、EdU陽性細胞比率和(G2/M+S)期比率與空白組和對照組相比均明顯降低(P<0.05)，而在不含IL-1β的條件下，干擾組與空白組和對照組相比差異均無統計學顯著性。結論: TRPC6參與IL-1β誘導的RA-FLS增殖過程，沉默TRPC6能降低IL-1β誘導的RA-FLS增殖水平。

瞬時受體電位通道6； 類風濕關節炎； 滑膜細胞； 細胞增殖

類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種以慢性多關節滑膜炎、骨及軟骨破壞為主要特征的全身性自身免疫性疾病[1]。比較公認的基本病理機制為滑膜細胞的激活，分泌大量炎癥因子、趨化因子，導致炎癥細胞激活并募集于滑膜襯下間質。而炎癥細胞所分泌的炎癥因子又能反饋促進滑膜細胞的激活。如此級聯反應，使得滑膜細胞快速活化，爆發增殖，形成血管翳，侵入并破壞毗鄰軟骨及骨骼。因此研究成纖維樣滑膜細胞的增殖作用及機制十分必要。

鈣離子(Ca2+)是細胞信號轉導過程中重要的第二信使，參與細胞內信息傳遞并調控遞質釋放、細胞增殖、基因轉錄和細胞死亡等一系列生命過程[2]。瞬時受體電位通道6(transient receptor potential channel 6, TRPC6)作為參與調控細胞內鈣離子濃度媒介。TRPC6基因突變或過表達能引起胞內鈣離子信號通路異常，影響細胞內鈣濃度，進而使細胞的多種病理生理過程發生變化[3]。一項關于RA的全基因組關聯分析(genome- wide association study，GWAS)發現RA病人中TRPC6基因存在突變，并且與RA疾病進展具有相關性[4]。IL-1β是一種重要的促炎因子，參與多種慢性炎癥性疾病的病理過程。它能加重RA患者滑膜炎癥的進展，并在RA病理機制中發揮重要作用。有文獻報道，IL-1β能促進類風濕關節炎成纖維細胞樣滑膜細胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes，RA-FLS)的DNA合成，加快其增殖[5]。結合本課題組前期的實驗結果顯示TRPC6在RA-FLS中的表達量較骨性關節炎(osteoarthritis，OA)成纖維細胞樣滑膜細胞中的表達量增加。是否TRPC6在RA-FLS增殖行為中起重要作用呢？本文擬通過RNAi技術，在IL-1β誘導下對該問題進行了初步探討，以期闡明TRPC6 在IL-1β誘導RA-FLS增殖中的作用。

材 料 和 方 法

1 主要試劑及儀器

DMEM 高糖培養基、胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)、DPBS磷酸鹽緩沖液、含EDTA的0.25%胰酶溶液和Opti-MEM培養基購自于Gibco；抗CD90-PE和CD68-APC抗體購自于BD；IL-1β購自于Peprotech；Lipofectamine RNAiMAX 購自于Invitrogen；CCK-8試劑盒購于Dojindo；Cell-Light EdU Apollo 567 DNA試劑盒購于廣州銳博。碘化丙啶、RNA酶和II型膠原酶購于Sigma。TRPC6兔抗多克隆抗體購于Alomone；GAPDH鼠抗單克隆抗體和辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔及山羊抗小鼠Ⅱ抗購于Bioworld；PrimeScriptTMRT Master Mix (Perfect Real Time) 試劑盒和SYBR? Premix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)試劑盒購于TaKaRa。其它化合物均為分析級，購于廣州化學試劑廠。所用引物由Invitrogen根據設計合成，見表1。所用siRNA由蘇州吉瑪公司根據設計合成，見表2。

表1 引物序列

表2 siRNA序列

多功能酶標儀、StepOnePlusTM實時熒光定量PCR儀和EVOS FL熒光顯微鏡(Thermo Fisher)； 化學發光成像儀(Bio-Rad);流式細胞儀(BD FACS Calibur)。

2 主要方法

2.1 RT-qPCR檢測RA和OA滑膜組織TRPC6 mRNA表達水平 滑膜組織來自中山大學孫逸仙紀念醫院行膝關節置換術或關節鏡下滑膜清理術的RA和OA患者。該項目通過了中山大學孫逸仙紀念醫院倫理委員會審查。所有RA及OA患者的診斷分別符合美國風濕病學會類風濕關節炎和骨性關節炎診斷標準。TRIzol法提取2組滑膜組織總RNA，按照PrimeScriptTMRT Master Mix(Perfect Real Time)試劑盒說明書合成cDNA。然后按照SYBR? Premix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)試劑盒說明書，在Thermo Fisher的StepOnePlusTM實時定量PCR儀上進行PCR擴增反應。以GAPDH為內參照，2-ΔΔCt法計算RA組與OA組滑膜組織TRPC6 mRNA的相對表達量。

2.2 原代細胞培養與鑒定 取出滑膜組織后，充分剪碎，加入2 g/L的II型膠原酶溶液，于37 ℃培養箱中消化4 h，濾過未消化組織，離心2 000 r/min、5 min，PBS重懸后離心2 000 r/min、5 min，重復2次；加入適量含15% FBS的完全培養基，培養箱中培養4 d后，換液除去未貼壁細胞，隨后每2～3 d換液。原代培養第3代后通過2種方法進行細胞鑒定：光學相差顯微鏡下觀察細胞形態以及通過流式細胞術檢測培養細胞的CD68和CD90抗原陽性率。

2.3 siRNA沉默RA-FLS細胞TRPC6基因 取經過鑒定的第3～6代RA-FLS用于實驗，將RA-FLS以1×107cells/L的密度接種于6 孔板，每孔加入2 mL 含15% FBS完全培養基，當細胞融合度達到60%～80%時，采用Lipofectamine RNAiMAX介導TRPC6-siRNA轉染細胞。設置RA-FLS TRPC6-siRNA轉染組(TRPC6-siRNA組)、RA-FLS陰性對照(negative control, NC)siRNA轉染組(NC-siRNA組)和RA-FLS對照組(control組)。在轉染8 h后，先用DPBS洗滌細胞3 次，洗脫殘留在培養基及細胞表面的攜帶FAM基團的siRNA，以降低熒光背景。熒光顯微鏡觀察，初步估計轉染效率。

2.4 RT-qPCR檢測TRPC6的mRNA表達 TRIzol法提取各組細胞總RNA，按照PrimeScriptTMRT Master Mix(Perfect Real Time)試劑盒說明書合成cDNA。然后按照SYBR? Premix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)試劑盒說明書，在Thermo Fisher的StepOnePlusTM實時定量PCR儀上進行PCR擴增反應。以GAPDH為內參照，2-ΔΔCt法計算TRPC6-siRNA組與兩對照組TRPC6的mRNA相對表達量。

2.5 Western blotting 檢測TRPC6蛋白的表達 轉染72 h后收集各組細胞、提取總蛋白，采用BCA 法蛋白定量后，各組取80 μg蛋白上樣。經SDS-PAGE分離后轉膜，BSA封閉液室溫孵育2 h，孵育后TBST洗膜，然后將膜分別放入抗TRPC6和GAPDH的 I 抗稀釋緩沖液中，4 ℃平緩搖動過夜。再次TBST洗膜3次，每次5 min；放入牛奶稀釋過的辣根過氧化物酶標記的 II 抗，室溫搖床孵育1 h； TBST洗膜3次，每次5 min，最后于化學發光成像儀曝光，用ImageJ軟件進行分析，比較各組蛋白的相對表達量。

2.6 CCK-8法檢測細胞活力 (1)將RA-FLS接種于96孔板中，細胞密度為1×107cells/L。當細胞生長融合至60%時，給予不同濃度(0、0.25、0.5、1、2、4、8、16 μg/L) IL-1β處理36 h或一定濃度IL-1β處理不同時間(12、24、36、48、60、72 h)，在處理結束后，棄去板內的培養基，用DPBS清洗1 次后，每孔加入1∶10稀釋過的CCK-8溶液100 μL，37 ℃孵育3 h，酶標儀讀取各孔在450 nm 波長處的吸光度(A)值，取其平均值。(2)將TRPC6-siRNA 組、NC-siRNA 組和control組的RA-FLS分別接種于96孔板中，又分別將其分為IL-β處理和不處理亞組。60 h后，棄去板內的培養基，用DPBS清洗1 次后，每孔加入1∶10稀釋過的CCK-8溶液100 μL，37 ℃孵育3 h，酶標儀讀取各孔在450 nm 波長處的吸光度(A)值，取其平均值。

2.7 EdU標記法檢測細胞DNA合成 將TRPC6-siRNA 組、NC-siRNA 組和control組的RA-FLS分別接種于96孔板中，又分別將其分為IL-1β處理和不處理亞組。36 h處理或不處理后，按照Cell-Light EdU Apollo 567 DNA試劑盒說明書進行操作。于熒光顯微鏡拍攝獲得圖片。EdU陽性細胞率通過10個隨機視野下計數獲得。

2.8 流式細胞術檢測細胞周期的變化 將TRPC6-siRNA 組、NC-siRNA 組和control組的RA-FLS分別接種于25 cm2培養瓶中，又將其分為IL-1β處理和不處理亞組。60 h后，胰酶消化，離心去除培養基。用DPBS重懸后，1 000 r/min 離心5 min，取不少于3×105～5×105個細胞，用0.2 mL DPBS重懸，然后用70%冰乙醇2 mL固定細胞，混勻后，封口4 ℃過夜。取固定過夜的細胞，1 000 r/min 離心5 min ，棄固定液，2 mL DPBS重懸細胞，1 000 r/min離心5 min ，再次棄上清。細胞沉淀加50 μL RNA酶和450 μL碘化丙啶，避光孵育30 min后，行流式細胞儀檢測。檢測結果使用相關分析軟件分析。細胞增殖活性用增殖指數(proliferation index，PI)進行量化，PI 值越大，細胞處于增殖期的越多，增殖越明顯。PI=100%×(G2/M+S)期細胞數/(G2/M+S+G0+G1)期細胞數。

4 統計學處理

采用SPSS 22.0 統計軟件進行統計學分析, 數據以均數±標準誤(mean±SEM)表示。 兩組間比較采用獨立樣本資料t檢驗。雙因素多組間資料用雙因素方差分析, 多重比較用Bonferroni法檢驗。單因素多組間資料用單因素方差分析，多重比較用Bonferroni法檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 RA和OA患者滑膜組織中TRPC6 mRNA表達水平

RT-qPCR結果顯示，RA患者滑膜組織中TRPC6的mRNA表達水平相對于OA患者明顯增加(P<0.05)，見圖1。

Figure 1.Expression of TRPC6 mRNA in synovial tissues from OA patients and RA patients. Mean±SEM.n=4.*P<0.05vsOA group．

圖1 RA和OA患者滑膜組織中TRPC6 mRNA表達水平

2 RA-FLS的培養及鑒定

用組織塊聯合酶消化法培養細胞，培養第4天即可見少量細胞，第10天可見細胞融合。胰酶消化進行傳代。光學顯微鏡下原代細胞呈細長紡錘形，與成纖維細胞形態相符，見圖2A。流式細胞術檢測第3代細胞表面CD90和CD68陽性表達率，分別為93.55%和0.53%，提示大多數細胞為RA-FLS，見圖2B。

Figure 2.Identification of primarily cultured RA-FLS. A: RA-FLS under light microscope at 4 d, 6 d, 8 d and 10 d; B: the expression of CD90 and CD68 in the RA-FLS at passage 3 detected by flow cytometry．

圖2 RA-FLS的培養與鑒定

3 IL-1β誘導RA-FLS增殖

不同濃度IL-1β作用36 h 后，8 μg/L 和16 μg/L組RA-FLS的A值與對照組相比顯著升高(P<0.05)，見圖3A; 16 μg/L IL-1β作用不同時間后，36～72 h組RA-FLS的A值與相應對照組相比均顯著升高(P<0.05)，見圖3B。

Figure 3.The viability of RA-FLS induced by IL-1β. A: the cells were treated with 0.25～16 μg/L IL-1β for 36 h; B: the cells were treated with 16 μg/L IL-1β for 12 h～72 h. The cell viability was measured by CCK-8 assay. Mean±SEM.n=4.*P<0.05,**P<0.01vscontrol group．

圖3 IL-1β誘導RA-FLS細胞活力增強

4 轉染TRPC6-siRNA對RA-FLS 中 TRPC6 mRNA和蛋白表達的影響

RT-qPCR結果顯示，TRPC6-siRNA轉染RA-FLS后，TRPC6的mRNA表達相對于空白對照組及陰性對照組均明顯降低(P<0.05)，而空白對照組與陰性對照組相比mRNA的表達無明顯差異，見圖4A。Western blotting檢測結果顯示TRPC6-siRNA轉染組的TRPC6 蛋白表達相對于空白對照組及陰性對照組明顯降低(P<0.05)，而空白對照組與陰性對照組相比蛋白表達未見明顯差異，見圖4B。

Figure 4.The interference efficiency of TRPC6-siRNA. A: the mRNA expression of TRPC6 at 24 h after transfection detected by RT-qPCR; B: the protein expression of TRPC6 at 72 h after transfection detected by Western blotting. Mean±SEM.n=4.*P<0.05vscontrol;#P<0.05vsNC-siRNA.

圖4 RA-FLS中TRPC6-siRNA沉默效率

5 沉默TRPC6對IL-1β誘導的RA-FLS增殖作用的影響

TRPC6-siRNA轉染RA-FLS后，在IL-1β誘導和不誘導的條件下，采用 CCK-8法檢測細胞活力，結果發現在IL-1β誘導的環境下，TRPC6-siRNA干擾組與空白對照組和陰性對照組相比細胞活力水平明顯降低(P<0.05)；而在IL-1β不進行誘導的條件下，TRPC6-siRNA干擾組與空白對照組和陰性對照組相比活力水平差異不顯著，見圖5。EdU實驗結果表明，沉默TRPC6后，在IL-1β誘導的環境下，TRPC6-siRNA干擾組與空白對照組和陰性對照組相比DNA合成水平明顯降低(P<0.05);而在IL-1β不進行誘導的條件下，TRPC6-siRNA干擾組與空白對照組和陰性對照組相比DNA合成水平差異不顯著，見圖6。

6 沉默TRPC6對IL-1β誘導的RA-FLS細胞周期的影響

應用流式細胞術分析沉默TRPC6對IL-1β誘導的RA-FLS細胞周期的變化。結果顯示在IL-1β誘導的環境下，TRPC6-siRNA干擾組與空白對照組和陰性對照組相比S期和G2/M期的細胞比例減少，G0/G1期增加(P<0.05)；而在IL-1β不進行誘導的條件下，TRPC6-siRNA干擾組與空白對照組和陰性對照組相比S期和G2/M期以及G0/G1期的細胞比例變化不明顯，見圖7。

討 論

RA是一種以慢性多關節滑膜炎、骨及軟骨破壞為主要特征的全身性自身免疫性疾病，可發生于任何年齡，持續性反復發作，致殘率極高。在歐美發達國家中，RA的患病率約為0.5%～1.0%[1]。我國的流行病學調查顯示RA的患病率為0.41%，男女比約為1∶6[6]。RA的主要病理特征為滑膜襯里細胞增生，間質內炎性細胞大量浸潤，微血管增生，血管翳形成，軟骨和骨組織破壞，關節功能障礙。然而，RA的發病機制依然不全明了。比較公認的基本病理機制為滑膜細胞的激活，然后炎癥細胞激活并募集于滑膜組織，形成血管翳，侵入并破壞毗鄰軟骨及骨骼[1]。特別是RA-FLS功能異常在RA患者關節炎癥和組織破壞過程中發揮關鍵作用。因此，研究RA-FLS的生物學功能，探尋RA發病機制中新的干預靶點，成為RA相關研究的熱點。

Figure 5.CCK-8 assay for determining the effect ofTRPC6 silencing on the viability of RA-FLS induced by IL-1β. Mean±SEM.n=4.*P<0.05vscontrol;#P<0.05vsNC-siRNA．

圖5 沉默TRPC6對IL-1β誘導的RA-FLS細胞活力的影響

Figure 6.EdU assay for determining the effect ofTRPC6 silencing on the proliferation of RA-FLS induced by IL-1β. Mean±SEM.n=4.*P<0.05vscontrol;#P<0.05vsNC-siRNA.

圖6 沉默TRPC6對IL-1β誘導的RA-FLS細胞增殖的影響

Ca2+是細胞信號轉導過程中重要的第二信使，在細胞內傳遞信息并調控遞質釋放、細胞增殖、基因轉錄和細胞死亡等一系列生命過程。Berridge等[7]發現Ca2+信號在細胞增殖中起到重要作用。鈣依賴和鈣調素途徑均可以影響相關細胞細胞周期的轉變[8]。越來越多實驗證明，激活Ca2+信號通路能影響腫瘤細胞的增殖[9]。那么，RA-FLS作為一種類腫瘤細胞，是否Ca2+信號在其增殖中也起到重要作用呢?

TRPC通道是TRP通道的一個非選擇性陽離子通道亞家族[10]。它包括7個成員，TRPC1～TRPC7，主要參與細胞Ca2+轉運[11]。有研究表明，TRPC通道在氣道平滑肌細胞[12]和幾種腫瘤細胞[13-14]的增殖能力中起作用。而TRPC6作為TRPC通道一員，也參與體內許多重要的生理和病理調節過程。TRPC6基因突變或過表達所引起的胞內鈣離子信號通路異常，會通過改變細胞內Ca2+濃度而影響細胞的多種病理生理過程。那么，TRPC6是否在RA-FLS的增殖作用中起重要作用呢？

炎性滑膜炎導致的關節破壞是RA的典型病理過程。IL-1β可通過誘導RA-FLS增殖參與該過程[15]。此外，IL-1β也是RA炎性微環境的主要成分。因此，本實驗利用IL-1β為增殖誘導物，發現沉默TRPC6能減緩IL-1β誘導的RA-FLS增殖，并且減少細胞向G2/M期轉變。

Figure 7.Flow cytometry for analyzing the effect ofTRPC6 silencing on the cell cycle of RA-FLS stimulated with IL-1β. Mean±SEM.n=4.*P<0.05vscontrol;#P<0.05vsNC-siRNA.

圖7 沉默TRPC6對IL-1β誘導的RA-FLS細胞周期的影響

眾所周知，細胞增殖需要Ca2+的參與，因此我們推測，TRPC6可能通過調控Ca2+參與RA-FLS的增殖作用。本實驗由于缺少TRPC6調控Ca2+的直接證據，所以不能完全證明上述觀點。因此下一步實驗，我們將通過實時鈣測定和膜片鉗技術證明TRPC6調控RA-FLS的胞內Ca2+濃度。此外，本實驗也缺少過表達TRPC6的反向實驗。最后，TRPC6是否有聯合TRPC通道亞家族的其它成員，共同參與RA-FLS的增殖作用調控，也有待進一步研究。

總之，結合本實驗結果及相關文獻，TRPC6可能是通過調控胞內Ca2+濃度，控制細胞向G2/M期轉變，從而影響RA-FLS的增殖。因此，TRPC6可能在RA的疾病發生發展中發揮重要作用。進一步探討TRPC6在RA中的作用及機制，有助于為以TRPC6為靶點的RA臨床干預提供初步的理論依據。

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(責任編輯： 林白霜， 羅 森)

Effect of TRPC6 on IL-1β-induced proliferation of rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes

LIU Gui-wang1, XU Da-wei1, ZHANG Wei-qiong3, XU Jin-huang3, ZHENG Pei-zhong3, YE Pei4, LI Jian-hua2, HUANG Jian-rong1

(1DepartmentofOrthopaedics,SunYat-senMemorialHospital,SunYat-senUniversity,Guangzhou510235,China;2DepartmentofPhysiology,GuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou511436,China;3DepartmentofOrthopaedics,ZengchengDistrictPeople’sHospitalofGuangzhou,Guangzhou511300,China;4DepartmentofOrthopaedics,NanhaiDistrictPeople’sHospitalofFoshan,Foshan528200,China.E-mail:guke16@163.com;lijianh@hotmail.com)

AIM: To investigate the effects of transient receptor potential channel 6 (TRPC6) on the proliferation of rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes (RA-FLS) induced by IL-1β. METHODS: The mRNA expression of TRPC6 in synovial tissues from RA or OA patients was studied by RT-qPCR. RA-FLS were cultured by enzyme digestion and tissue adhesion methods. The method of flow cytometry was applied to identify the RA-FLS. RA-FLS were treated with different concentrations (0, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 and 16 μg/L) of IL-1β for 36 h. The cell viability was examined by CCK-8 assay. RA-FLS were incubated with IL-1β (16 μg/L) for different time (12, 24, 36, 48, 60 and 72 h), and the cell viability was measured by CCK-8 assay. The interference efficiency of TRPC6-siRNA was determined by RT-qPCR and Western blotting. After incubation in the presence or absence of IL-1β medium, the cell viability, the percentage of EdU-positive cells and the percentage of (G2/M+S) phase were measured by CCK-8 assay, EdU labeling assay and flow cytometry, respectively. RESULTS: The mRNA expression of TRPC6 was found in synovial tissue with higher levels in RA patients than that in OA patients. TRPC6-siRNA significantly decreased the mRNA and protein expression of TRPC6 (P<0.05). When RA-FLS were treated with IL-1β, the proliferation of RA-FLS was increased (P<0.05). The differences of the cell viability, the percentage of EdU-positive cells and the (G2/M+S) phase percentage between TRPC6-siRNA group and blank control group or NC-siRNA group were significant, in the presence of IL-1β (P<0.05). However, they were not significant in the absence of IL-1β. CONCLUSION: TRPC6 is involved in the proliferation of RA-FLS induced by IL-1β. Silencing ofTRPC6 gene inhibits the growth of RA-FLS induced by IL-1β．

Transient receptor potential channel 6; Rheumatoid arthritis; Synoviocytes; Cell proliferation

1000- 4718(2017)04- 0627- 08

2016- 11- 17

2017- 01- 20

國家自然科學基金資助項目(No. 81470205)；廣州市屬高校科研計劃(No. 2012C043)

R363.2; R593.22

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.04.009

△通訊作者 黃建榮 Tel: 020-82725271; E-mail: guke16@163.com； 李建華 Tel: 020-37103061; E-mail: lijianh@hotmail.com