英夫力西治療炎癥性腸病與腸道菌群改變的相關性研究

梅晨雪，王恩銘揚，孫 妍，林連捷，譚 悅，王東旭，鄭長青*

英夫力西治療炎癥性腸病與腸道菌群改變的相關性研究

梅晨雪1，王恩銘揚2，孫 妍1，林連捷1，譚 悅1，王東旭1，鄭長青1*

目的 探討使用英夫力西(IFX)治療炎癥性腸病與腸道菌群改變的關系。方法 收集104例炎癥性腸病患者，其中潰瘍性結腸炎(UC)52例，克羅恩病(CD)52例，使用英夫力西治療前后測定腸道菌群數量。另取30例健康志愿者新鮮糞便，定量培養進行菌群分析，同時測定三組C反應蛋白、血沉兩項數據結果,分析其與腸道細菌組成變化的相關性。結果 治療后，UC組酵母菌(1.09±0.17)、腸球菌(5.01±0.36)和消化球菌(3.99±0.23)的數量顯著下降，乳酸桿菌(7.95±0.69)的數量顯著上升(P<0.01)；CD組酵母菌(1.06±0.19)、腸球菌(4.91±0.37)和消化球菌(3.90±0.19)的數量顯著下降，乳酸桿菌(8.07±0.76)的數量顯著上升(P<0.01)。治療后，UC組CRP(10.33±4.64)、ESR(9.10±4.11)水平降低(P<0.01);CD組CRP(7.31±4.68)、ESR(9.27±3.13)水平降低(P<0.01)。結論 使用英夫力西治療炎癥性腸病患者后，酵母菌、腸球菌和消化球菌數量顯著降低，乳酸桿菌數量顯著增加，恢復到正常水平，炎癥指標CRP和ESR下降，臨床癥狀得到有效緩解。

英夫力西；炎癥性腸病；腸道菌群；炎性指標

0 引言

炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease，IBD)是生活環境、遺傳易感性、感染及免疫等因素共同作用下引發的一組慢性非特異性腸道炎癥性疾病，主要包括潰瘍性結腸炎(Ulcerative colitis,UC)和克羅恩病(Crohn′s disease,CD)[1]。其中，潰瘍性結腸炎的主要病變區在黏膜下層和腸黏膜；克羅恩病的病變部位以回腸末端和結腸為主，多呈節段性、非對稱性分布[2-3]。目前，IBD的治療仍然以藥物為主，但一些激素類的藥物對于難治性結腸病沒有很好的療效，甚至出現激素依賴[4-5]。近年來，生物分子靶向藥物的成功研制，特別是英夫力西的應用已經成為IBD患者避免切除腸管的挽救性治療方法之一[6]。腸道菌群與IBD的發生發展密切相關，成為研究熱點之一[7-9]。研究IBD患者腸道菌群的改變情況，可以為英夫力西的療效提供佐證，并為后續的治療策略和進行預后評估提供參考。本研究選取104例IBD患者作為研究對象，分析英夫力西的治療效果和腸道菌群改變的相關性。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年5月-2015年5月我院收治的IBD患者104例，均符合中華醫學會消化病學分會炎癥性腸病協作組在2012年制定的診斷標準[10]。排除標準：①嚴重心腦血管疾病；②入組前4周服用益生菌制劑、抗生素以及3個月內服用過與本次治療相同藥物的患者；③自身免疫性疾病；④患有腸道腫瘤疾病。其中UC患者52例，男35例，女17例，平均年齡(38.92±9.71)歲，平均患病時間(3.52±0.98)年；CD患者52例，男37例，女15例，平均年齡(40.33±6.49)歲，平均患病時間(3.42±0.96)年。另選擇30例健康志愿者，男19例，女11例，內鏡及其他檢查均正常，并滿足4周內未服用過益生菌或其他相似的藥物。

1.2 腸道菌群檢測 于治療前1天及治療后40周檢測患者的腸道菌群指標。①采樣：將無菌條件下獲得的新鮮糞便(約5 g)迅速置入厭氧罐內送檢；②培養基：酵母菌和腸球菌屬于需氧型細菌，使用SB和EC培養基；乳酸桿菌和消化球菌屬于厭氧性細菌，使用LC和PS培養基；③檢測方法：采用日本光岡法檢測[11]，并應用細菌三級鑒定法將細菌鑒定到屬的水平，在37 ℃培養72 h后，計算菌群數量(CFU/g)，菌落數據結果以對數方式表示。

1.3 治療方案 UC組和CD組給予英夫力西5 mg/kg，0、2、6時每8 h靜點1次，于2～4周檢測血象和肝、腎功能。于用藥前1周和用藥治療40周后進行CRP和ESR檢測。

1.4 統計學分析 所有數據均采用SPSS 19.0統計分析軟件處理，治療前腸道菌群數據資料的比較采用單因素方差分析；治療前后，同組腸道菌群和炎癥指標數據變化應用配對樣本t檢驗；炎癥指標數據資料的比較采用獨立樣本t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。相關系數r<0.4為弱相關關系，0.4≤r<0.7為中等相關關系，r≥0.7為強相關關系。

2 結果

2.1 治療前菌群數量差異 如表1所示，與對照組相比，UC組酵母菌(2.30±0.13)、腸球菌(6.75±0.10)和消化球菌(6.33±0.11)數量顯著增加(P<0.05)，乳酸桿菌(5.56±0.72)數量顯著減少(P<0.05)；與對照組相比，CD組酵母菌(2.71±0.19)、腸球菌(6.94±0.11)和消化球菌(6.32±0.10)數量顯著增加(P<0.05)，乳酸桿菌(4.56±0.75)數量顯著減少(P<0.05)。

表1 英夫力西治療前各組腸道菌群數量比較

2.2 治療前炎癥指標組間差異 如表2所示，與對照組相比，UC組CRP(13.44±4.63)和ESR(22.75±6.99)顯著升高(P<0.05)；CD組CRP(12.88±4.71)和ESR(23.6±5.94)顯著升高(P<0.05)。

表2 英夫力西治療前各組炎癥指標比較

2.3 治療后菌群數量變化 如表3所示，治療后，UC組酵母菌(1.09±0.17)、腸球菌(5.01±0.36)和消化球菌(3.99±0.23)的數量顯著下降，乳酸桿菌(7.95±0.7)的數量顯著上升(P<0.01)；在CD組中，酵母菌(1.06±0.19)、腸球菌(4.91±0.37)和消化球菌(3.9±0.19)的數量顯著下降，乳酸桿菌(8.07±0.76)的數量顯著上升(P<0.01)。此外，應用英夫力前后，腸道菌群數量的變化存在顯著相關關系。且UC組和CD組患者在應用英夫力西治療后，腸道菌群數量與對照組間差異無統計學意義(P>0.05)。

2.4 治療后炎癥指標的變化 如表4所示，治療后，UC組中CRP(10.33±4.64)、ESR(9.1±4.11)水平顯著降低(P<0.01);CD組CRP(7.31±4.68)、ESR(9.27±3.13)水平后顯著降低(P<0.01)。且治療后的數值均與對照組比較差異無統計學意義。此外，應用英夫力西和CRP以及ESR數值下降之間，存在顯著相關關系(r>0.7)。

3 討論

IBD是一種慢性非特異性炎癥性疾病,雖然其患病機制尚不明確,但多項研究表明，遺傳、環境、腸道菌群穩定性的改變和免疫應答異常等多種因素相互作用可導致IBD的發生[12-13]。

表3 英夫力西治療后腸道菌群數量變化

表4 應用英夫力西治療后各組炎癥指標比較

英夫力西作為IBD治療的有效手段越來越得到臨床工作者的重視，Rutgeerts等[14]研究表明，英夫力西治療UC和CD的療效無顯著差異，與本研究一致。近年來，國外學者相繼發表了多篇英夫力西有效治療IBD的報道[15-17]。目前，關于英夫力西的臨床治療數據顯示，英夫力西具有較好的安全性以及較為平穩的不良反應率，且無嚴重的不良反應發生[18-20]。為了減少不良反應，在英夫力西治療之前，應避免對過敏體質或腎功能障礙的患者用藥；同時要注意對活動性肝炎和結核病患者的篩查，根據血藥濃度調整用藥劑量。

本研究所檢測的4種細菌中，酵母菌、腸球菌和消化球菌屬于條件致病菌，乳酸桿菌屬于益生菌。從菌群數量的角度可以發現，與對照組相比，UC組患者酵母菌、腸球菌和消化球菌數量顯著增加，乳酸桿菌數量顯著減少；CD組呈現相同趨勢。腸道的菌群組成與健康的對照組相比發生了很大的變化，其中酵母菌、腸球菌和消化球菌條件致病菌的增多，使得機體的免疫功能下降，腸黏膜的屏障功能減弱，并破壞了腸道原有的平衡。而乳酸桿菌的減少，更使得腸黏膜的屏蔽和恢復功能減弱，此結果同國外的一些研究結果一致[21-22]。因此，腸道細菌組成的改變對機體免疫功能和能量代謝有著重要的作用，有研究者用正常志愿者的腸道菌群移植到重癥腸病患者的腸道內來解決腸道菌群紊亂的問題，取得了良好的效果[23]。

本研究采用CRP和ESR作為評估IBD病情的指標[24]，用藥前的炎癥指標結果顯示，IBD患者酵母菌、腸球菌等致病菌數量較健康組有顯著增加，過多的致病菌會產生大量的代謝產物和累積過多的毒素，導致上皮細胞受損，腸黏膜屏蔽功能減弱，引起機體的炎癥反應。

從應用英夫力西、炎癥指標和菌群數量的相關性來看，三者普遍相關性較強，相關系數r均>0.7。使用英夫力西治療IBD后，酵母菌、腸球菌和消化球菌數量顯著降低，乳酸桿菌數量顯著增加，與健康的對照組比較差異無統計學意義，炎癥指標CRP和ESR顯著下降，臨床癥狀得到有效的緩解。

Danese[25]等的研究結果表明，IBD治療的理想目標是使臨床癥狀得到有效和快速的緩解，完全治愈不復發，恢復正常的生理功能。近年來，英夫力西等分子靶向藥物在難治性IBD的治療中取得了理想的治療效果，但由于價格和不良反應等因素，部分患者無法使用。本研究顯示，英夫力西對于腸道菌群紊亂有良好的治療效果，同時可以降低炎癥反應，未來可以進一步擴大樣本量進行研究，并探索其不良反應的發生規律。

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Correlation between changes of intestinal flora and infliximab as therapy in patients with inflammatory bowel disease

MEI Chen-xue1，WANG En-ming-yang2，SUN Yan1，LIN Lian-jie1，TAN Yue1，WANG Dong-xu1，ZHENG Chang-qing1*

(1. Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110022,China;2.Basic Medical College of China Medical University,Shenyang 110112,China)

Objective To investigate the correlation between infliximab treatment for inflammatory bowel disease (IBD) with the changes in intestinal flora.Methods We collected 104 IBD patients (including 52 cases with ulcerative colitis and 52 cases with Crohn′s disease) and 30 healthy volunteers.The intestinal flora was analyzed.The levels of CRP and ESR were detected to assess the correlation between intestinal flora and inflammatory markers.Results After treatment, the number ofSaccharomyces(1.09±0.17),Enterrococcus(5.01±0.36) andPeptococcus(3.99±0.23) decreased significantly, while that ofLactobacillus(7.95±0.69) increased markedly in patients with UC (P<0.01); the number ofSaccharomyces(1.06±0.19),Enterrococcus(4.91±0.37) andPeptococcus(3.90±0.19) decreased significantly,while that ofLactobacillus(8.07±0.76) increased markedly in patients with CD (P<0.01).The levels of CRP and ESR decreased significantly in UC patients(10.33±4.64,9.10±4.11,P<0.01) and CD patients (7.31±4.68, 9.27±3.13,P<0.01).Conclusion Infliximab therapy can decrease the number ofSaccharomyces,EnterrococcusandPeptococcus,while increase the number ofLactobacillusin patients with IBD,and decreased the levels of CRP and ESR,thus relieving the clinical symptoms effectively.

Infliximab;Inflammatory bowel disease;Intestinal flora;Inflammatory markers

2016-09-21

1.中國醫科大學附屬盛京醫院，沈陽 110022；2.中國醫科大學基礎醫學院，沈陽 110122

遼寧省自然科學基金(2014021083)

10.14053/j.cnki.ppcr.201704008

*通信作者