肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移與PI3K-Akt-PAK1通路的相關(guān)性研究

張雷，王林，耿智敏，萬(wàn)永，孟凡迪，孟憲魁

肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移與PI3K-Akt-PAK1通路的相關(guān)性研究

張雷，王林，耿智敏，萬(wàn)永，孟凡迪，孟憲魁

目的研究肝細(xì)胞癌（HCC）組織PI3K/Akt/p21活化蛋白激酶1（PAK1）信號(hào)通路的表達(dá)對(duì)于HCC發(fā)生及轉(zhuǎn)移的重要性，以期為HCC的預(yù)防和預(yù)后提供一個(gè)有效的分子標(biāo)志，并為HCC的治療提供一定的理論基礎(chǔ)。方法自NCBI中GEO數(shù)據(jù)庫(kù)中的GES364數(shù)據(jù)集提取數(shù)據(jù)，對(duì)PI3K/Akt/PAK1信號(hào)通路基因的表達(dá)量進(jìn)行分析。結(jié)果將數(shù)據(jù)庫(kù)中HCC組織分為肝內(nèi)擴(kuò)散組（PS）、肝外轉(zhuǎn)移組（PM）、無(wú)轉(zhuǎn)移組（PN）和正常肝對(duì)照組（H）。分析發(fā)現(xiàn)PS組和PM組PAK1和MMP-9表達(dá)量明顯高于H組和PN組（P＜0.0001）；PS組、PM組和PN組AKT（1/2）和Girdin表達(dá)量明顯高于H組（P＜0.05），PS組和PM組AKT2和Girdin表達(dá)量也明顯高于PN組（P＜0.05）；在PM組，AKT2與PAK1表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.5679，P=0.0013）。結(jié)論P(yáng)AK1和MMP-9高表達(dá)可以促進(jìn)HCC的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，而AKT的表達(dá)和活性對(duì)于HCC的轉(zhuǎn)移也是至關(guān)重要的，提示PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路與HCC轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

肝細(xì)胞癌；轉(zhuǎn)移；PAK1；AKT

HCC是一種占全球癌癥發(fā)病率第五和癌癥致死率第三的常見(jiàn)腫瘤[1]，每年引起大約60萬(wàn)人死亡[2]。HCC的發(fā)生與乙型肝炎（hepatitis B）和丙型肝炎（hepatitis C）病毒感染、肝硬化和黃曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）的攝取等密切相關(guān)[3]。然而，HCC發(fā)生發(fā)展的具體分子機(jī)制仍然未被闡明。關(guān)于HCC發(fā)病機(jī)理的研究表明，HCC發(fā)生的分子機(jī)制存在高度的異質(zhì)性，一些蛋白在這一過(guò)程中所發(fā)揮的具體作用仍不清楚[4-6]。盡管有些分子標(biāo)志，如血管上皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、骨橋蛋白（osteopontin）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor β，TGF-β）等可能參與了HCC的發(fā)生，但是大量的臨床和基礎(chǔ)研究表明，現(xiàn)有的分子標(biāo)志仍不足以精確地預(yù)測(cè)HCC患者的預(yù)后和生存[7]。由于缺乏特異性的靶向治療，晚期HCC患者的預(yù)后都很差[8]。p21活化蛋白激酶（p21-activated protein kinases，PAKs）是一種很早就被鑒定的絲氨酸/蘇氨酸激酶，能夠被p21 GTPases、GTP-Cdc42和GTP-Rac等活化。每一個(gè)PAKs都包含有一個(gè)高度保守的氨基末端的Cdc42/Rac結(jié)合結(jié)構(gòu)域和一個(gè)羧基末端的激酶結(jié)構(gòu)域[9-12]。以往研究表明，PAKs參與多種細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)，包括細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)、細(xì)胞生存、細(xì)胞凋亡、激素信號(hào)和基因轉(zhuǎn)錄，并且能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖[13-17]。哺乳動(dòng)物體內(nèi)的PAKs家族包含有6個(gè)成員，根據(jù)其序列、結(jié)構(gòu)和功能的不同可分為兩組，分別為組I（PAK1-3）和組II（PAK4-6）[16，18-20]。眾多研究表明，PAKs家族成員在多種惡性腫瘤中明顯上調(diào)，尤其是PAK1在結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）、乳腺癌（breast cancer）、卵巢癌（ovarian cancer）和HCC中都表現(xiàn)出明顯的上調(diào)[21-24]。此外，在CRC腫瘤細(xì)胞向淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的過(guò)程中，PAK1的表達(dá)顯著性增加[21]。在生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的乳腺癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，PAK1也是必需的調(diào)節(jié)因子[25，26]。PAK1過(guò)表達(dá)不僅增加卵巢癌細(xì)胞的遷移和浸潤(rùn)[23]，而且在HCC的轉(zhuǎn)移過(guò)程中也發(fā)揮重要的作用[24]，而PAK1過(guò)表達(dá)與多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的活化具有密切的關(guān)系。

PI3K/Akt信號(hào)通路參與包括細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、腫瘤發(fā)生發(fā)展和血管生成等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動(dòng)[27，28]。有研究表明，PAK1可以協(xié)同PI3K/ Akt信號(hào)通路，促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[29]。PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路對(duì)于乳腺癌的發(fā)展也發(fā)揮著重要的作用[30]。這些都暗示PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路對(duì)于HCC的發(fā)展和轉(zhuǎn)移有著重要的作用，但其具體的作用機(jī)制仍有待于進(jìn)一步的研究。本研究通過(guò)對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)中HCC患者相關(guān)基因和信號(hào)分子的表達(dá)量和相關(guān)性的分析，揭示了PI3K/Akt/PAK1信號(hào)通路對(duì)于HCC發(fā)生及轉(zhuǎn)移的重要性，明確了該信號(hào)通路及其部分調(diào)控的靶基因?qū)CC轉(zhuǎn)移的正向調(diào)控作用，以期為HCC的預(yù)防和預(yù)后預(yù)測(cè)提供一個(gè)有效的分子標(biāo)志，并為HCC的治療提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 研究材料通過(guò)NCBI GEO Home入口檢索GSE364數(shù)據(jù)集關(guān)于HCC的相關(guān)資料，最近更新時(shí)間為2012年2月23日，根據(jù)獲得樣本的特性，具體分組信息如表1。

表1 GSE364數(shù)據(jù)集樣本分組情況

1.2 基因表達(dá)量分析基于數(shù)據(jù)庫(kù)特定研究樣本數(shù)據(jù)集中特定目標(biāo)基因表達(dá)量的相對(duì)值進(jìn)行表達(dá)量分析，所有數(shù)據(jù)都經(jīng)過(guò)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換和中位數(shù)中心化處理。根據(jù)表達(dá)量處理后數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類和差異分析。文中比較差異分析圖由GraphPad Prism 5軟件制作（P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001均表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。

1.3 相關(guān)性分析基于數(shù)據(jù)庫(kù)特定研究樣本數(shù)據(jù)集中特定目標(biāo)基因表達(dá)量的相對(duì)值進(jìn)行相關(guān)性分析，所有數(shù)據(jù)都經(jīng)過(guò)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換和中位數(shù)中心化處理。文中相關(guān)性分析圖由GraphPad Prism 5軟件制作（P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，r＜0表示負(fù)相關(guān)，r＞0表示正相關(guān)）。

2 結(jié)果

2.1 PAK1及其相關(guān)基因表達(dá)分析為了評(píng)估PAK1及活性與HCC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，我們選取了PAK1及其下游靶基因MMP-9作為分析對(duì)象。據(jù)以往的相關(guān)研究表明，活化的PAK1可以促進(jìn)MMP-9的表達(dá)，所以MMP-9表達(dá)量的增加不僅可以反映肝癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程的惡化，同時(shí)也可以在一定程度上反映PAK1的活性。據(jù)此，我們根據(jù)HCC的擴(kuò)散轉(zhuǎn)移情況，將NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)GSE364數(shù)據(jù)集中的HCC和正常標(biāo)本進(jìn)行分類（表1），然后對(duì)分類樣本進(jìn)行了PAK1和MMP-9的表達(dá)分析。結(jié)果表明，與正常對(duì)照組（H）相比，PAK1在PS、PM和PN中均存在不同程度的高表達(dá)（P＜0.0001，P＜0.0001，P=0.0026），與H組相比，MMP-9在PS組和PM組中均存在不同程度的高表達(dá)（P＜0.0001，P＜0.0001），而其在PN組中的表達(dá)與H組無(wú)明顯差異（P=0.6371）。此外，與PN組相比，PAK1和MMP-9在PS組和PM組中均存在不同程度的高表達(dá)（P＜0.0001，P＜0.0001），說(shuō)明在擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移過(guò)程中癌細(xì)胞需要PAK1和MMP-9的參與，即PAK1和MMP-9的高表達(dá)可以促進(jìn)HCC的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，這也與以往的一些研究結(jié)果相一致。除此之外，與PS組比，PAK1和MMP-9在惡性化程度更高的PM組中也表現(xiàn)為高表達(dá)（P＜0.0001，P=0.001），更說(shuō)明PAK1的表達(dá)和活性及MMP-9的表達(dá)對(duì)于HCC的轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的（圖1）。

圖1 各肝癌組織PAK1及其靶基因MMP-9表達(dá)差異比較

2.2 PI3K/AKT及其相關(guān)基因的表達(dá)量分析據(jù)以往的研究，PI3K/AKT信號(hào)通路對(duì)于HCC患者的發(fā)生發(fā)展都具有重要作用，而且PAK1也會(huì)協(xié)同活化PI3K/AKT信號(hào)通路以促進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移和浸潤(rùn)。所以，鑒于上述的研究，為了進(jìn)一步探究PI3K/AKT信號(hào)通路與HCC發(fā)生和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，我們選取了AKT（1/2）及其下游靶基因Girdin和FAK作為分析對(duì)象。據(jù)以往的相關(guān)研究，活化的AKT（pAKT）可以促進(jìn)FAK的活化和Girdin的表達(dá)。所以，Girdin表達(dá)量的增加不僅可以反映肝癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程的惡化，同時(shí)也可以在一定程度上反映AKT的活性。據(jù)此，我們對(duì)分類樣本中AKT（1/2）、FAK和Girdin表達(dá)進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，與H組比，PS組、PM組和PN組AKT（1/2）和Girdin存在不同程度的高表達(dá)（AKT1：P=0.0005，P=0.0002，P=0.0018；AKT2：P=0.0007，P=0.0008，P= 0.0915；Girdin:P＜0.0001，P＜0.0001，P=0.025），而各組FAK表達(dá)量均無(wú)明顯的差異，可能是因?yàn)榧幢闶菍?duì)于正常細(xì)胞FAK也發(fā)揮著重要的作用，所以其表達(dá)量相對(duì)恒定，體現(xiàn)在HCC轉(zhuǎn)移過(guò)程中信號(hào)的增加可能是由于其活性的增強(qiáng)，而非表達(dá)量的變化。此外，與PN組比，PS組和PM組AKT2和Girdin存在不同程度的高表達(dá)（AKT2:P=0.01，P＜0.0068；Girdin:P＜0.0001，P＜0.0001），說(shuō)明在擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移過(guò)程中HCC要比無(wú)轉(zhuǎn)移的HCC更需要AKT2和Girdin的參與，即AKT2和Girdin的高表達(dá)可以促進(jìn)HCC的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。除此之外，惡性程度更高的PM組Girdin比PS組有更高的表達(dá)（P＜0.0001），也說(shuō)明Girdin表達(dá)和AKT活性對(duì)于HCC的轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的（圖2）。

圖2 各組肝癌組織AKT及其相關(guān)靶基因表達(dá)差異比較

2.3 PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路及其靶基因相關(guān)性分析在上述的研究中，我們對(duì)PAK1及其靶基因MMP-9和AKT，及其后者的靶基因Girdin在各組HCC樣本和正常對(duì)照樣本中的表達(dá)分別進(jìn)行了比較分析。為了進(jìn)一步確定PAK1和AKT激酶的表達(dá)量和活性的同步變化，我們對(duì)PAK1和AKT2及其各自的靶基因的表達(dá)量進(jìn)行了相關(guān)性分析。結(jié)果表明，HCC組織AKT2與其靶基因Girdin表達(dá)呈明顯的正相關(guān)（r=0.6708，P＜0.0001），PAK1與其靶基因MMP-9表達(dá)也呈明顯的正相關(guān)（r=0.6458，P＜0.0001，圖3）。

圖3 PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路及其相關(guān)基因的表達(dá)相關(guān)性分析

2.4 PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路與HCC轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析在上述研究中，我們分析了PAK1及其靶基因MMP-9和AKT及其靶基因Girdin在不同HCC樣本和正常對(duì)照樣本中的表達(dá)，并對(duì)其差異進(jìn)行了比較分析。已有研究表明，PAK1與PI3K/AKT信號(hào)通路有協(xié)同作用，為了進(jìn)一步研究其在HCC發(fā)生及轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用，我們分析了PM組HCC組織PAK1和PI3K/AKT表達(dá)量，結(jié)果表明，AKT2與PAK1表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.5679，P=0.0013，圖4），說(shuō)明PAK1與PI3K/AKT信號(hào)通路在HCC轉(zhuǎn)移過(guò)程中是有關(guān)聯(lián)的，而且這一關(guān)聯(lián)對(duì)于HCC的發(fā)展和惡化有著密切的關(guān)系，很可能PI3K/AKT/PAK1形成一條正向擴(kuò)大的信號(hào)通路，從而促進(jìn)早期HCC向惡性的可轉(zhuǎn)移的方向發(fā)展，并影響患者的生存及預(yù)后。

圖4 PM組HCC組織AKT2與PAK1表達(dá)呈正相關(guān)

3 討論

在近十年，對(duì)于肝癌發(fā)生的分子機(jī)制的研究取得了巨大的進(jìn)展。許多關(guān)鍵的信號(hào)通路都被證明在HCC發(fā)生和發(fā)展的過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，而且這些信號(hào)通路相關(guān)分子的異常表達(dá)以及它們之間的交互作用更是促進(jìn)了HCC的發(fā)展及惡化，尤其是PI3K/AKT/PAK1信號(hào)通路在此過(guò)程中的作用越來(lái)越受到人們的關(guān)注。

研究表明，在HepG2肝癌細(xì)胞敲除PAK1會(huì)導(dǎo)致pERK和pAKT表達(dá)量減少[31，32]，結(jié)合本研究中PAK1和AKT的相關(guān)性分析表明，在HCC組織PAK1不僅可以增加AKT的磷酸化水平，促使其活化，而且還有可能促進(jìn)AKT表達(dá)量的增加，這樣使得PI3K/AKT信號(hào)通路進(jìn)一步活化，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移。

我們的研究分析表明，與H組比，PS組、PM組和PN組PAK1存在不同程度的高表達(dá)，PS組和PM組MMP-9也存在不同程度的高表達(dá)，與PN組比，PS組和PM組PAK1和MMP-9均存在高表達(dá)。與PS組比，惡性化程度更高的PM組PAK1和MMP-9也表現(xiàn)為高表達(dá)，這些結(jié)果說(shuō)明PAK1和MMP-9高表達(dá)可以促進(jìn)HCC的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，也進(jìn)一步說(shuō)明了PAK1表達(dá)和活性對(duì)于HCC的轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的。鑒于此，我們也對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路及其相關(guān)基因的表達(dá)水平進(jìn)行了分析，其結(jié)果與PAK1相似，說(shuō)明癌細(xì)胞在擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，需要AKT2和Girdin的參與。與PS組比，PM組Girdin呈高表達(dá)，也說(shuō)明Girdin的表達(dá)和AKT的活性對(duì)于HCC的轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的。最后，通過(guò)對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路和PAK1在HCC轉(zhuǎn)移樣本中的相關(guān)性分析，我們發(fā)現(xiàn)，PAK1與PI3K/AKT信號(hào)通路在HCC轉(zhuǎn)移的過(guò)程中是有關(guān)聯(lián)的，而且其對(duì)于HCC的轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系，PI3K/AKT/PAK1可能形成一條促癌的信號(hào)通路，從而促進(jìn)早期HCC的轉(zhuǎn)移。

通過(guò)對(duì)本研究結(jié)果的分析討論，我們提出了PAK1和AKT信號(hào)在HCC轉(zhuǎn)移過(guò)程中不僅表達(dá)量增多，而且其活性也有明顯的增強(qiáng)。此外，PI3K/AKT信號(hào)通路和PAK1信號(hào)密切相關(guān)，鑒于以往的一些研究結(jié)果，PI3K/AKT信號(hào)通路很可能協(xié)同PAK1信號(hào)形成共同的促癌信號(hào)，協(xié)同調(diào)控HCC的惡化轉(zhuǎn)移。本研究不僅揭示了這一相關(guān)性的存在，而且也為預(yù)防及治療HCC，防止其惡化轉(zhuǎn)移提供了一個(gè)新的切入點(diǎn)。

[1]LlovetJM，BurroughsA，BruixJ.Hepatocellularcarcinoma. Lancet，2003，362:1907.

[2]Parkin DM，Bray F，F(xiàn)erlay J，et al.Global cancer statistics，2002. CA Cancer J Clin，2005，55:74.

[3]Chen CJ，Yu MW，Liaw YF.Epidemiological characteristics and risk factors of hepatocellular carcinoma.J Gastroenterol Hepatol，1997，12:S294.

[4]Thorgeirsson SS，Grisham JW.Molecular pathogenesis of human hepatocellular carcinoma.Nat Genet，2002，31:339.

[5]Bruix J，Boix L，Sala M，et al.Focus on hepatocellular carcinoma.Cancer Cell，2004，5:215.

[6]Laurent-Puig P，Legoix P，Bluteau O，et al.Genetic alterations associated with hepatocellular carcinomas define distinct pathways of hepatocarcinogenesis.Gastroenterology，2001，120:1763.

[7]Wang XM，Yang LY，Guo L，et al.p53-induced RINGH2 protein，a novel marker for poor survival in hepatocellular carcinoma after hepatic resection.Cancer，2009，115:4554.

[8]Lau WY，Lai EC.Hepatocellular carcinoma:current management and recent advances.Hepatobiliary Pancreat Dis Int，2008，7:237.

[9]Manser E，Leung T，Salihuddin H，et al.A brain serine/threonine protein kinase activated by Cdc42 and Rac1.Nature，1994，367:40.

[10]Knaus UG，Morris S，DongHJ，etal.Regulationofhuman leukocyte p21-activated kinases through G proteinecoupled receptors.Science，1995，269:221.

[11]Martin GA，Bollag G，McCormick F，et al.A novel serine kinase activated by rac1/CDC42Hs-dependent autophosphorylation is related to PAK65 and STE20.EMBO J，1995，14:1970.

[12]Bagrodia S，Taylor SJ，Jordon KA，et al.A novel regulator of p21-activated kinases.J Biol Chem，1998，273:23633.

[13]Kumar R，Vadlamudi RK.Emerging functions of p21-activated kinases in human cancer cells.J Cell Physiol，2002，193:133.

[14]Bokoch GM.Biology of the p21-activated kinases.Annu Rev Biochem，2003，72:743.

[15]Hofmann C，Shepelev M，Chernoff J.The genetics of Pak.J Cell Sci，2004，117:4343.

[16]Kumar R，Gururaj AE，Barnes CJ.p21-activated kinases in cancer.Nat Rev Cancer，2006，6:459.

[17]Wells CM，Jones GE.The emerging importance of group II PAKs.Biochem J，2010，425:465.

[18]Jaffer ZM，Chernoff J.p21-activated kinases:three more join the Pak.Int J Biochem Cell Biol，2002，34:713.

[19]Zhao ZS，Manser E.PAK and other Rho-associated kinaseseef fectorswithsurprisinglydiversemechanismsofregulation. Biochem J，2005，386:201.

[20]Arias-Romero LE，Chernoff J.A tale of two Paks.Biol Cell，2008，100:97.

[21]Carter JH，Douglass LE，Deddens JA，et al.Pak-1 expression increases with progression of colorectal carcinomas to metastasis. Clin Cancer Res，2004，10:3448.

[22]Bekri S，Adelaide J，Merscher S，et al.Detailed map of a region commonly amplified at 11q13＞q14 in human breast carcinoma. Cytogenet Cell Genet，1997，79:125.

[23]Siu MK，Wong ES，Chan HY，et al.Differential expression and phosphorylation of Pak1 and Pak2 in ovarian cancer:effects on prognosis and cell invasion.Int J Cancer，2010，127:21.

[24]Ching YP，Leong VY，Lee MF，et al.P21-activated protein kinase is overexpressed in hepatocellular carcinoma and enhances cancer metastasis involving c-Jun NH2-terminal kinase activation and paxillin phosphorylation.Cancer Res，2007，67:3601.

[25]Vadlamudi RK，Adam L，Wang RA，et al.Regulatable expression of p21-activated kinase-1 promotes anchorageindependent growth andabnormalorganizationofmitoticspindlesinhuman epithelial breast cancer cells.J Biol Chem，2000，275:36238.

[26]Adam L，Vadlamudi R，Mandal M，et al.Regulation of microfilament reorganization and invasiveness of breast cancer cells bykinasedeadp21-activatedkinase-1.JBiolChem，2000，275:12041.

[27]Engelman JA，Luo J，Cantley LC.The evolution of phosphatidylinositol 3-kinases as regulators of growth and metabolism.Nat Rev Genet，2006，7（8）:606-619.

[28]Bellacosa A，Kumar CC，Cristofano AD，et al.Activation of AKT kinasesincancer:implicationsfortherapeutictargeting.Adv Cancer Res，2005，94:29-86.

[29]Iyer SC，Gopal A，Halagowder D.Myricetin induces apoptosis by inhibiting P21 activated kinase 1（PAK1）signaling cascade in hepatocellular carcinoma.Mol Cell Biochem，2015，407（1-2）: 223-237.

[30]Li YY，Li J，Chen L.Axl as a downstream effector of TGF-β1 via PI3K/Akt-PAK1 signaling pathway promotes tumor invasion and chemoresistance in breast carcinoma.Tumour Biol，2014，35（4）:3809-3817.

[31]Huynh N，Kevin HL，Baldwin GS，et al.P21-activated kinase 1 stimulates colon cancer cell growth and migration/invasion via ERK-andAKT-dependent pathways.Biochim Biophys Acta，2010，1803:1106-1113.

[32]Balmanno K，Chell SD，Gillings AS，et al.Intrinsic resistance to the MEK1/2 inhibitorAZD6244（ARRY-142886）is associated with weak ERK1/2 signalling and/or strong PI3K signalling incolorectalcancercelllines.IntJCancer，2009，125: 2332-2341.

（收稿：2016-09-10）

（本文編輯：陳從新）

Expression of PI3K-Akt-PAK1 pathway in the process of metastasis of hepatocellular carcinoma

Zhang Lei，Wang Lin，Geng Zhimin，et al.Department of Elderly Surgery，F(xiàn)irst Affiliated Hospital，Jiaotong University，Xi'an 710061，Shaanxi Province

ObjectiveBased on relevant database data，we tried to explore the importance of PI3K/Akt/ PAK1 signaling pathway to HCC metastasis and provide an effective molecular marker for the prevention of HCC. MethodsFrom GES364 data sets of GEO in the NCBI database，we searched the materials about the PI3K/Akt/ PAK1 expression in intrahepatic spread（IHS），entrahepatic metastasis（EHM），non-metastasis（NM）and normal livers（N）.ResultsThe expression of PAK1 and MMP-9 were up-regulated in IHS and EHM group（P<0.0001）as compared with those in normal liver and NM group;the expression of AKT（1/2）and Girdin were upregulated in the IHS，EHM and NM group（P<0.05）as compared with in normal liver；in the EHM group，the expression of AKT2 was positively correlated to PAKI（r=0.5679，P=0.0013）.ConclusionsThe up-regulation of PAK1 and MMP-9 could promote the spread and metastasis of HCC cells，the increased expression and activities of AKT are crucial for metastasis of liver cancer，and the PI3K/AKT/PAK1 signaling pathway is closely related to the development and metastasis in patients with HCC.

Hepatocellular carcinoma；Metastasis；PAK1；AKT

10.3969/j.issn.1672-5069.2017.03.013

710061西安市西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年外科

張雷，男，43歲，醫(yī)學(xué)博士，副主任醫(yī)師。主要從事膽道和肝臟外科疾病診治研究。E-mail:zhanglei723d@126.com