山楂葉總黃酮對2型糖尿病大鼠熱痛閾的影響①

陳熠飛，齊淑芳，陳 虹，張明月

(1.佳木斯中心醫院，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯大學基礎醫學院生理教研室，黑龍江 佳木斯 154007)

山楂葉總黃酮對2型糖尿病大鼠熱痛閾的影響①

陳熠飛1，齊淑芳2，陳 虹1，張明月2

(1.佳木斯中心醫院，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯大學基礎醫學院生理教研室，黑龍江 佳木斯 154007)

目的： 本實驗旨在觀察山楂葉總黃酮(hawthornleavesflavonoids,HLF)對鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)致2型糖尿病大鼠在熱痛閾方面的作用。方法：共需60例研究對象，通過隨機分組，得正常對照組、模型組、HLF高、中、低劑量三個治療組、彌可保組共6組，每組研究例數相等。HLF低中高劑量治療組分別給予山楂葉總黃酮(HLF)70mg、140mg、210mg/kg·d，以此物質進行灌胃處理，彌可保組灌胃劑量為1.97mg/kg·d。結果：在模型組，所有研究對象普遍發生甩尾溫度上升現象，即熱痛閾升高(P<0.01),而HLF中高劑量治療組熱痛閾改變明顯低于模型組(P<0.01)，與正常組比較無顯著差異。結論：山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠周圍神經病變引起的熱痛閾的改變具有良好的治療作用，對痛覺靈敏度具有明顯的保留及改善作用。

山楂葉總黃酮；熱痛閾；2型糖尿病大鼠

糖尿病周圍神經病變的英文全稱為(diabeticperipheralneuropathy)，簡寫為DPN。在2型糖尿病群體中，此并發癥具有很高的發生率,也是病人致殘的一個主要誘因。DPN傷害范圍會波及至多個神經系統，其中主要有感覺神經系統、自主神經系統以及運動神經系統。其中，發生率最高的為感覺神經病變[1]，通常患者最先出現雙下肢異樣感覺，感覺不靈敏或缺失，隨病情的進展可引起足部潰瘍、壞疽等病變，甚至導致截肢[2]。目前對糖尿病周圍神經病變所導致的痛溫覺感覺異常的發病機制和治療取得了一定的進展，但臨床上對此尚缺乏有效的防治方法。本文以2型糖尿病大鼠為對象，旨在觀察HLF對2型糖尿病大鼠熱痛閾的影響，為臨床合理使用HLF早期治療DPN所致的感覺異常，感覺不靈敏，提供一定的理論參考依據。

1 研究對象與方法

1.1 動物分組及模型的建立

采用3周齡，體重100～120g雄性大鼠70只，通過隨機分組，確定為正常對照組(10例)、模型組(60例)兩組。在模型組中，實施7d適應性喂養，接著實施28d高脂高糖飲食，然后模型組禁食1d后加STZ(50mg/kg)，通過一次性腹腔注射，構建2型糖尿病模型，經過3d，對空腹血糖值進行檢測，若其在>11. 1mmol/L之上，表明順利完成模型[3]。將構建造模成功的模型組研究對象進行隨機分組，按照例數均分原則，得到模型組、HLF高、中、低劑量治療組、彌可保組共5組。HLF低中高劑量治療組按體表面積折算不同物種動物間等效劑量的方法[4]分別給予70mg、140mg、210mg/kg的HLF，至于彌可保組，灌胃藥物為彌可保，計量為1.97mg/kg·d，共進行6周。

1.2 觀察指標及方法

1.2.1 一般情況觀察：詳細記錄全部研究對象的生理特性(毛色、神態)、相關指標(體重)，以及飲食狀況、尿量與行為舉止等狀況。

1.2.2 體重：造模成功后，每兩周記錄一次體重。

1.2.3 空腹血糖測定：造模成功后，每兩周檢測一次。取尾部末梢血1滴用血糖試紙配指尖血糖儀檢查血糖。

1.2.4 熱痛閾測定：通過搖尾試驗進行檢測。藥物治療6周后，借助改良熱痛閾測量法，將大鼠固定，同時使鼠尾外露,將尾尖置于恒溫水浴箱中，其中水位2cm,剛開始溫度控制在36℃,之后，不斷增加水溫，保持2℃/min速度，當發現鼠尾露出水面時，記錄當時溫度，后者即為熱痛閾值。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 一般情況觀察

造模前各組動物毛發光滑，毛色以及飲食無異常，反應與行為正常，無遲滯表現。大鼠完成造模后，有若干癥狀表現出來：飲、食以及尿量均增多、體重慢慢降低、體毛變枯變黃且脫落明顯、大便不成形、意志低沉、反應能力差，行動緩慢等，整體較正常對照組狀態差。低劑量HLF治療組大鼠同樣發生毛發稍枯、體重變化微弱、飲食與活動頻率降低。中高劑量HLF治療組大鼠表現為：整體狀態慢慢轉良，并且體重增加。彌可保組大鼠表現較好,但整體狀態不如中高劑量HLF治療組。

2.2 各組大鼠治療前后體重變化

經過4周高脂高糖喂養，所有研究對象體重值上升，參比正常對照組，均存在明顯差異。模型組大鼠體重減輕，“三多一少”癥狀突出，參比正常對照組，存在明顯差異(P<0.05)。高中劑量HLF治療組大鼠體重在治療第4周前均表現為下降,給藥4周后,體重出現增長態勢,經過42d的給藥干預,體重值明顯上升，參比模型組，存在顯著差異(P<0.01)。見表1。

表1 治療后各組大鼠體重變化±s，g)

以正常組為參比，△P<0.05，△△P<0.01；以模型組為參比，*P<0.05，**P<0.01；以彌可保組為參比，#P<0.05，##P<0.01。

2.3 各組大鼠治療前后空腹血糖變化

模型組大鼠空腹血糖明顯升高。隨HLF治療時間變化，HLF治療組大鼠各組空腹血糖值均降低，其劑量水平直接關系到降血糖效果，兩者表現出量效關系。整個治療過程中，彌可保組空腹血糖與模型組比較無差異。見表2。

表2 治療后各組研究對象空腹血糖變化±s，mmol/L)

以正常組為參比，△P<0.05，△△P<0.01；以模型組為參比，*P<0.05，**P<0.01；以彌可保組為參比，#P<0.05，##P<0.01。

2.4 治療后每組研究對象熱痛閾值的變化

經過42d治療，就熱痛閾值方面，參比正常組，模型組顯著升高，即；參比模型組，4個治療組研究對象均發生下降，，差異顯著。其中HLF高、中劑量組與彌可保組之間不存在顯著差異。見表3。

表3 經42d治療后各組研究對象熱痛 閾值的變化

以正常組為參比，△P<0.05，△△P<0.01；以模型組為參比，*P<0.05，**P<0.01；以彌可保組為參比，#P<0.05，##P<0.01。

3 討論

作為一類代謝異常綜合征，糖尿病具高發病率，其致病主因為遺傳以及環境兩方面因素的協同作用,在現今人類生活方式影響下，此病的發生率上升速度加快。糖尿病所導致的長期高糖狀態能夠使多個系統器官受累,引起組織器官的功能障礙甚至衰竭，糖尿病致死的主要原因也在于此。糖尿病患者常會出現痛溫覺感覺異常,其原因多為糖尿病導致的DPN,對DPN的治療成為了棘手問題，由DPN所導致的疼痛作為一種神經病理性疼痛甚至表現出對阿片類藥物的抵抗[5]。DPN病人的生活質量嚴重下降，若干感覺異常表現頻繁出現在病人身上，諸如疼痛、麻木以及發熱等[6]。臨床上常以改善神經功能，有效控制血糖視為治療的主要目標[7]，同時，幫助患者養成富有科學性與規律性的飲食習慣，保持運動與飲食的合理化，對必要營養元素進行及時補充，起到應用的輔助治療效果。

抗氧化、調節血脂、抗腦組織和心肌缺血等特點作為HLF藥理學活性已經被多項研究證明[8]，在本實驗中，進行高脂高糖飲食同STZ腹腔注射聯合處理，誘導構建2型糖尿病大鼠模型[9]，接著，經過6周山楂葉總黃酮治療，低中高劑量HLF治療組空腹血糖測定發現都出現下降，同時恢復了一定的體重，尤其在高劑量治療組，表現更為顯著。表明HLF可以劑量依賴性恢復胰島胰島素分泌功能，有助于空腹血糖值的下降，同時對糖尿病癥狀加以有效緩解。各個治療組均有改善熱痛覺遲鈍的作用，HLF中高劑量治療組的效果更為明顯(P<0.01)。本實驗通過對STZ誘導的2型糖尿病大鼠經HLF治療后血糖水平、生物行為學以及熱痛閾值的研究表明， 針對2型糖尿病大鼠，HLF有助于其血糖值的降低，體重的上升，同時在這些研究對象DPN引發的熱痛閾值上升方面，起到積極緩解作用，改善2型糖尿病大鼠DPN所致的熱痛覺遲鈍現象。

[1]LlewelynJG.Thediabeticneuropathies:types,diagnosisandmanagement[J].NeurosurgeonPsychiatry，2003, 74：15

[2]張國艷, 田寶文，李長紅, 等.依那普利葉酸片對早期糖尿病腎病的腎臟保護作用[J].黑龍江醫藥科學,2013,36(6):56-57

[3]李偉, 張紅,殷松樓,等.不同劑量鏈脲佐菌素誘導SD大鼠糖尿病腎病模型的研究[J].徐州醫學院學報,2006,26(1):52-55

[4]趙偉,孫國志.不同種實驗動物間用藥量換算[J].畜牧獸醫科技信息,2010，(5):52-53

[5]萬麗,羅愛林,田玉科.連續小劑量嗎啡腹腔注射對CCI大鼠抗傷害效應的實驗研究[J].華中科技大學學報(醫學版) ,2005,34(2):232-235

[6]孫蕊,劉世超.α-硫辛酸聯合甲鈷胺治療糖尿病周圍神經病變37例[J].中國醫藥導報,2010,(33):156-157

[7]賈竹敏．α-硫辛酸聯合甲鈷胺治療糖尿病周圍神經病變的臨床觀察[J]．中國現代藥物應用,2010,3(13):143-144

[8]于棟華,包順茹,于純淼,等. 山楂葉總黃酮藥理作用研究進展[J]. 遼寧中醫藥大學學報,2013,3(15):174-177

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黑龍江省教育廳科研項目，編號：11551471。

陳熠飛(1991～)男，黑龍江佳木斯人，在讀碩士研究生。

齊淑芳(1972～)女，黑龍江密山人，碩士，副教授，碩士研究生導師。E-mail:qishufang666@163.com。

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1008-0104(2017)02-0016-02

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