ADM及VEGF-C在子宮內膜樣腺癌組織的表達①

楊 微,張 宇,楊 光,司玉霞,王彩霞,王麗新,盧北燕,李梅秀

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科，黑龍江 佳木斯 154003)

ADM及VEGF-C在子宮內膜樣腺癌組織的表達①

楊 微,張 宇,楊 光,司玉霞,王彩霞,王麗新,盧北燕,李梅秀

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：探討腎上腺髓質素(ADM)和血管內皮細胞生長因子-C(VEGF-C)在子宮內膜樣腺癌中的表達情況及臨床意義。方法：運用免疫組化方法測量40例子宮內膜樣腺癌病理標本中ADM、VEGF-C的水平。結果:子宮內膜樣腺癌組中ADM的陽性率是70%，較增生期子宮內膜組、不典型增生組顯著增高(P<0.05)。子宮內膜樣腺癌組中VEGF-C的陽性率是65%，較增生期子宮內膜組、不典型增生組顯著增高(P<0.05)。子宮內膜樣腺癌中兩種蛋白的水平同淋巴遷移聯系緊密，同分化程度無聯系。結論：ADM、VEGF-C協同促進了宮內膜樣腺癌的演化和侵襲，對于臨床治療及判斷預后有重要價值。

子宮內膜樣腺癌；ADM；VEGF-C；轉移

VEGF-C是一種血管通透性因子，可以強烈提高血管內皮細胞的再生，增加微血管壁的通透能力，并能刺激淋巴管內皮細胞增生。VEGFR-2和VEGFR-3是VEGF-C的兩種受體，前者一般散布在血管內皮細胞，由于腫瘤組織生長迅速，造成局部環境缺氧，提高受體與VEGF-C的結合能力，從而增加腫瘤組織微血管內皮通透性，促進腫瘤組織微血管的形成，促使腫瘤的發展與擴散。后者存在于淋巴內皮細胞，與其結合后可以提高淋巴管通透能力，促進腫瘤細胞的淋巴遷移。ADM最初由Kitamura等[1]在人嗜鉻細胞瘤組織提取出的多肽類物質，ADM可以通過促進腫瘤血管及淋巴管的形成，促使腫瘤細胞的生長及遷移。有報道ADM在妊娠期高血壓疾病[2]、胰腺癌[3]、腦膠質細胞瘤[4]、嗜鉻細胞瘤細胞[5]及乳腺癌[6]中呈過表達，且乳腺癌患者血漿組織中ADM的表達與其淋巴結轉移顯著相關。

1 材料和方法

1.1 實驗標本

隨機選取佳木斯大學附屬第一醫院病理科2012～2016年間接收的子宮內膜樣腺癌標本40例，年齡38～70歲，平均55.28歲，其中累及淋巴16例，無淋巴累及24例。根據分化程度分為高分化腺癌組29例，中低分化腺癌組11例，另選取增生期子宮內膜組織20例、不典型增生子宮內膜組織20例作為對照組。所選實驗對象術前均未實施放化療和激素治療等。

1.2 試劑

ADM、VEGF-C抗體均為兔多克隆抗體，ADM購自武漢博士德生物工程有限公司，VEGF-C購自福州邁新生物科技有限公司，DAB試劑盒選自福州邁新生物科技有限公司。

1.3 實驗方法

具體免疫組化過程嚴格按照SP試劑盒產品說明書進行，抗體均以0.1M的PBS緩沖液稀釋,VEGF-C工作濃度為1：100，ADM工作濃度為1:200, 高壓修復法進行抗原修復，DAB試劑顯色，中性樹膠封固 , 光鏡下觀察。

1.4 結果判定

ADM、VEGF-C均表達于胞質或胞膜上，棕黃色或棕褐色顆粒為陽性。依據染色程度進行評分：陰性無顯色(0)；弱陽性顯色為淺黃色(1)；中度陽性顯色為棕黃色(2)；強陽性顯色為深棕黃色(3)。

1.5 統計學方法

采用SPSS19.0 統計軟件,進行卡方檢驗，確定P<0.05有統計學意義，二者相關性用Spearman等級相關分析。

2 結果

2.1 子宮內膜樣腺癌組中ADM、VEGF-C與對照組中的水平分析

ADM在子宮內膜樣腺癌組的陽性表達率為70%，較增生期子宮內膜組、不典型增生組顯著增高(P<0.05)。VEGF-C在子宮內膜樣腺癌組的陽性表達率為65%，較增生期子宮內膜組、不典型增生組顯著增高(P<0.05)。不典型增生組ADM、VEGF-C的陽性率分別為40%、20%，對比增生期組無顯著差異(P>0.05)。見表1。

表1 ADM與VEGF-C在子宮內膜樣腺癌組 與對照組的表達(n=20)

注：檢驗ADM、VEGF-C在各分組中表達差異的方法采用卡方檢驗。ADM組ab比較P=0.025,χ2=5;ac比較P=0.003,χ2=8.688;bc比較P=0.507,χ2=0.440。VEGF-C組ab比較P=0.001,χ2=10.8;ac比較P=0.01,χ2=6.563;bc比較P=0.465,χ2=0.533。

2.2 子宮內膜樣腺癌中ADM、VEGF-C的水平與其參數間的關系

ADM在癌腫累及淋巴結組的陽性表達率為93.7%，較無淋巴結累及組陽性率有顯著增高(P<0.05)；高分化腺癌組中ADM的陽性率為65.5%，較中低分化腺癌組陽性率無顯著差異(P>0.05)。癌腫累及淋巴組VEGF-C的陽性率為92%，較無淋巴累及組陽性率顯著增高(P<0.05)；VEGF-C在高分化腺癌組的陽性率為72.4%，較中低分化腺癌組陽性率無顯著差異(P>0.05)。見表2。

表2 ADM、VEGF-C與子宮內膜樣腺癌臨床病理參數的關系

2.3ADM、VEGF-C在子宮內膜樣腺癌中的相關性分析

本研究顯示，在40例子宮內膜樣腺癌組織中ADM和VEGF-C呈一致性表達共有37例，其中同時陽性表達17例;ADM(+)而VEGF-C(-)11例;ADM(-)而VEGF-C(+)9例;兩者同時陰性表達3例。經Spearman等級相關性分析顯示，ADM與VEGF-C表達呈正相關(P<0. 05)，表明兩者之間存在某種調控作用。見表3。

表3 ADM、VEGF-C在子宮內膜樣腺癌中的相關性分析

注：P<0.05

3 討論

子宮內膜樣腺癌是指起源于內膜腺體的子宮體癌，為雌激素依賴型即I型，發病率呈逐年上升趨勢，侵襲及遷移是影響子宮內膜樣腺癌生存率的主要原因，如何早期診斷，及時系統的治療是降低子宮內膜樣腺癌病死率的關鍵因素。在腫瘤侵襲轉移的過程中，微血管的形成及淋巴遷移是其重要環節。血管內皮生長因子-C(VEGF-C)及腎上腺髓質素(ADM)可加快腫瘤微血管的形成及淋巴遷移，促進腫瘤的轉移及擴散。朱等[7]研究證實，VEGF-C是致使食管鱗癌術后生存率較低的重要因素。Hashimoto等[8]經過RT-PCR得出，VEGF--CmRNA在子宮頸癌組織中顯著高于正常宮頸組織，且與淋巴遷移相干，提示預后較差。Nishida等采用免疫組化法測定80例卵巢癌中VEGF-C的表達，得出VEGF-C的表達與卵巢癌的浸潤密切相關，證實VEGF-C是卵巢癌發生淋巴結遷移的危險因素。ZudaireE等研究發現ADM可以增加腫瘤細胞VEGF的分泌，從而促進腫瘤血管形成。張等[9]在研究ADM及VEGF在肺癌在組織中表達時發現ADM及VEGF均高表達，ADM,VEGF通過自分泌和/或旁分泌形式協同促進和維持腫瘤細胞的生長。

本課題通過對ADM、VEGF-C在子宮內膜樣腺癌的研究中發現，兩種蛋白在子宮內膜樣腺癌的侵襲、遷移等方面擁有重要意義，子宮內膜樣腺癌的淋巴受累組ADM、VEGF-C的陽性率顯著增高，兩種蛋白的表達的不斷增加，致使本病的預后不佳。本實驗研究證實ADM、VEGF-C呈顯著正相關，在促進子宮內膜樣腺癌的演變進程中起協同作用。

綜上所述，ADM、VEGF-C是影響子宮內膜樣腺癌轉歸的重要因素，對于評估子宮內膜樣腺癌的預后有指導意義，臨床可通過滅活兩種蛋白的基因及受體從而延緩子宮內膜樣腺癌的發展，其二者互相作用的分子機制值得深入探討。

[1]KitamuraK,Kangawa，KawamotoM,etal.Adrenomedullin:anovelHypotensivepeptideisolatedfromhumanpheochromocytoma[J].BiochemBiophysResConunun,1993,192：553-560

[2]陳敏秀，王秀梅，劉春雨，等.血漿腎上腺髓質素水平在妊娠期高血壓疾病患者中的影響[J].黑龍江醫藥科學，2008,31(1)：7-9

[3]KelegS,KayedH,JiangX,etal.Adrenomedullinisinducedby坷poxiaandenhancespancreaticcancercellinvasion[J].IntJCancer,2007,121(1):21-32

[4]BoudouresqueF,BerthoisY,MartinPM,etal.Roleofadrenomedullininglioblastomasgrowth[J].BullCancer, 2005, 92(4):317-326

[5]BetchenSA,MusatovS,RobertsJ,etal.PTENinhibitsadrenomedullinexpressionandfunctioninbraintumorcells[J].JNeurooncol, 2006, 79(2):117-123

[6]OehlerMK,FischerDC,Orlowska-VolkM,etal.Tissueandplasmaexpressionoftheangiogenicpeptideadrenomedullininbreastcancer[J].BrJCancer, 2003, 89(10):1927-1933

[7]朱曉峰，王林，戚家峰，等.食管癌患者術前血清HCG、VEGF-C的表達及臨床意義[J]. 黑龍江醫藥科學,2011,34(2):3-5

[8]HashimotoI,KedamaJ,SekiN,eta1.Vaseularendothelialgrowthfactor-Cexpressionanditsrelationshiptopelviclymphnodestatusininvasiveeerviealcancer[J].BrJCancer，2001, 85(1):93-97

[9]張延例，于忠和.ADM與VEGF在肺癌血漿和組織中的表達、相關性及意義[J].山西醫科大學，2010,8(28)：9-17

佳木斯大學基礎研究類(自然類)面上項目，編號：JMSUJCMS2016-036。

楊微(1966～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，主任醫師，碩士研究生導師。

張宇(1989～)女，黑龍江鶴崗人，在讀碩士研究生。E-mail：1172977041@qq.com。

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1008-0104(2017)02-0045-02

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