3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α在OSAHS合并高血壓檢測中的意義

李英 王秀芳

·論著·

3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α在OSAHS合并高血壓檢測中的意義

李英 王秀芳

目的 觀察3-硝基酪氨酸(3-NT)、缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和8-異前列腺素(8-iso-PGF-2α)在阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)合并高血壓檢測中的意義。方法 選擇2010年1月至2015年12月就診的OSAHS 患者149例，根據是否合并高血壓分為單純OSAHS組(43例)和OSAHS合并高血壓組(106例)。選擇同時期行健康體檢者35例為健康對照組。觀察各組血清3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平，OSAHS合并高血壓患者3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平與呼吸暫停低通氣指數(AHI)的關系，治療后水平的變化及其各指標的相關性分析。結果 OSAHS合并高血壓組和單純OSAHS組3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平明顯高于健康對照組(P<0.01)，而OSAHS合并高血壓組明顯高于單純OSAHS組(P<0.01)。OSAHS合并高血壓患者的3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平隨著AHI升高而升高(P<0.01)，有效治療后機體的3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平較治療前明顯下降(P<0.01)。OSAHS合并高血壓患者的3-NT水平與HIF-1α(r=0.594，P<0.05)和8-iso-PGF-2α(r=0.647，P<0.05)水平呈正相關，HIF-1α與8-iso-PGF-2α水平呈正相關(r=0.781，P<0.05)。結論 3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平參與了OSAHS疾病的發生發展過程，可以作為OSAHS合并高血壓的重要預測因子。

3-硝基酪氨酸；缺氧誘導因子-1α；8-異前列腺素；阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征；高血壓

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)是一種常見的睡眠呼吸疾病，患者睡眠過程中反復出現呼吸暫停導致機體出現一系列反應，導致多系統多臟器損害，OSAHS具有一定潛在危險性，是發病率比較高的慢性疾病，流行病學資料顯示其發病率在2%～4%，與肺動脈高壓，冠心病和高血壓等多種心血管疾病的發生發展具有密切聯系，約有40%～60%的OSAHS患者伴有高血壓，是普通人群的2～3倍[1]。由于OSAHS患者存在反復、慢性的缺氧，導致機體出現低氧血癥以及高碳酸血癥，使機體內產生大量自由基，導致體內的氧化應激狀態發生相應變化[2]。已有大量文獻資料顯示氧化應激與高血壓疾病的發生發展相關性強，是否與OSAHS合并高血壓同樣具有相關性，目前此類報道較少。3-硝基酪氨酸(3-NT)反應機體蛋白質硝基化程度，是氧化應激程度的重要指標[3]。缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)是慢性缺氧狀態下誘導產生，并導致血管反應性增生和血管重塑[4]。8-異前列腺素(8-iso-PGF-2α)是一種具有較強穩定性和特異性的氧化應激產物。本組研究通過聯合檢測OSAHS合并高血壓患者血清3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平，觀察與OSAHS合并高血壓發生發展關系，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至2015年12月我院就診的OSAHS 患者149例，均符合OSAHS的診斷標準。根據是否合并高血壓分為單純OSAHS組(43例)和OSAHS合并高血壓組(106例)。其中單純OSAHS組男39例，女4例；年齡30～65歲，平均年齡(47.08±9.46)歲；體重指數(BMI)(23.7±1.8)kg/m2。OSAHS合并高血壓組男96例，女10例；年齡30～65歲，平均年齡(47.78±10.68)歲；BMI(25.5±2.1)kg/m2。選擇同期在我院行健康體檢者35例為健康對照組，男32例，女3例；年齡30～65歲，平均年齡(47.59±9.74)歲；BMI(22.1±1.3)kg/m2。排除：急性肺炎，肝炎和肺結核等急慢性感染；慢性阻塞性肺病，支氣管哮喘和間質性肺??；嚴重心肝腎等重要臟器功能不全的患者；冠心病，心瓣膜疾病和心肌病等心臟疾??；惡性腫瘤等疾病。3組年齡、性別比和BMI等一般資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 OSAHS和高血壓病的診斷標準:OSAHS參照中華醫學會呼吸分會睡眠學組的標準：根據不同呼吸暫停低通氣指數(AHI)超過5即診斷為OSAHS。AHI 5～15為輕度；16～30為中度；>30為重度。高血壓診斷標準采用2004年中國高血壓防治指南有關高血壓的診斷標準。

1.2.2 治療方法:2組治療包括持續氣道正壓通氣、吸氧、改善血液循環、保護腦細胞等支持對癥治療。對于高血壓患者予以抗高血壓治療主要包括血管緊張素轉化酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑、利尿劑、β-受體阻滯劑和或鈣離子拮抗劑等，根據血壓控制情況調整用藥。

1.2.3 血液標本的抽取和檢測:患者入院時和治療3個月后空腹取肘靜脈血，將標本分別裝與干燥試管中4 ml。干燥試管中的血液標本予以室溫下靜置1 h，以3 000 r/min的速度，離心5 min，離心半徑9 cm，將血清保存在-70℃的冰箱中保存待檢測。采用放射免疫法檢測3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α，所有試劑盒采用配套試劑盒或者上海 BOAT-MAN 生物技術公司試劑盒，嚴格按照試劑盒操作。

1.2.4 觀察指標:觀察3組血清3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α，OSAHS合并高血壓患者的3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平與AHI的關系，治療后水平變化及其各指標的相關性分析。

2 結果

2.1 3組3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平比較 OSAHS合并高血壓組和單純OSAHS組3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平明顯高于健康對照組(P<0.01)，而OSAHS合并高血壓組明顯高于單純OSAHS組(P<0.01)。見表1。

組別3-NTHIF-1α8-iso-PGF-2α健康對照組(n=35)4.67±1.6717.34±6.376.38±2.15單純OSAHS組(n=43)16.98±6.48*31.76±8.91*12.37±3.47*OSAHS合并高血壓組(n=106)31.57±7.62*#59.64±9.47*#16.51±5.99*# F值298.94745.00969.472 P值0.0000.0000.000

注：與對照組比較，*P<0.01；與OSAHS組比較，#P<0.01

2.2 OSAHS合并高血壓患者3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平與AHI的關系 OSAHS合并高血壓患者3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平隨著AHI升高而升高(P<0.01)。見表2。

2.3 OSAHS合并高血壓患者治療前后3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平變化 OSAHS合并高血壓患者治療后，機體3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平較治療前明顯降低(P<0.01)。見表3。

組別3-NTHIF-1α8-iso-PGF-2α輕度(n=26)21.64±6.9445.79±8.6712.17±4.98中度(n=42)30.61±8.19*53.87±9.76*15.99±5.97*重度(n=38)39.43±7.37*#75.49±10.59*#20.05±6.84*#F值42.35982.70813.422P值0.0000.0000.000

注：與輕度比較，*P<0.01；與中度比較，#P<0.01

組別3-NTHIF-1α8-iso-PGF-2α治療前31.57±7.6259.64±9.4716.51±5.99治療后5.66±1.6820.69±6.988.34±2.16t值34.18734.08713.210P值0.0000.0000.000

2.4 OSAHS合并高血壓患者3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α的相互關系 OSAHS合并高血壓患者3-NT水平與HIF-1α(r=0.594，P<0.05)和8-iso-PGF-2α(r=0.647，P<0.05)水平呈正相關，HIF-1α與8-iso-PGF-2α水平呈正相關(r=0.781，P<0.05)。

3 討論

OSAHS是常見病多發病，其患病率逐年增高，男性發病率高于女性，肥胖人群多見，并隨著年齡增高發病率增高，65歲以上老年人群發病率高達20%～40%。OSAHS與高血壓具有顯著的相關性，有資料顯示睡眠狀態每小時出現1次呼吸暫停事件則可導致高血壓發生率增加1%，而夜間血氧飽和度每降低10%則可導致呼吸暫停事件增加13%，由此說明OSAHS與高血壓和缺氧狀態具有密切聯系[5]。OSAHS發生高血壓可能的機制考慮交感神經功能亢進所導致的血液中兒茶酚胺水平明顯升高，從而增加腎上腺髓質系統活性增加，導致發生高血壓的[6]。體液因子如縮血管因子和舒血管因子活性的失衡，導致血壓增高。夜間整夜多導睡眠監測是診斷OSAHS的“金標準”，但由于檢查需要專門設備和操作人員，檢查比較復雜，給患者帶來較大的生理和心理負擔，一定程度上限制了臨床的廣泛開展，難以進行首次篩查。故設法找到簡單易行的診斷手段成為目前OSAHS的研究熱點。

本組研究表明OSAHS合并高血壓的患者3-NT水平明顯高于OSAHS，并且隨著AHI增高而增高，得到有效治療后其水平出現明顯降低。說明3-NT參與了OSAHS疾病的發生發展，并且與高血壓具有明顯相關性。3-NT是常見蛋白硝基化終端產物，在機體炎癥、休克和缺氧等病理條件下生成多種活性氧和活性氮，導致機體氧化損傷，同時導致酪氨酸殘基發生硝基化，生成3-NT，故3-NT被認為機體氧化應激和硝基化應激的重要評估指標[7]。有研究表明高血壓患者頸內動脈斑塊中存在酪氨酸的硝基化，并且斑塊中3-NT含量越高，患者的血壓波動越大，可能與機體3-NT水平的升高，導致超氧化物歧化酶的活性降低，加劇機體氧化應激反應程度增加，進一步促進高血壓的進展[3]。3-NT是OSAHS合并高血壓發生發展預測的風險因子，3-NT作為一種新的致病介質，參與了OSAHS疾病及其并發癥的發生發展過程[8]。有研究表明3-NT是OSAHS合并其他疾病的獨立危險因子，有心血管疾病合并癥患者的3-NT水平明顯高于OSAHS。

HIF-1是一種DNA結合蛋白，由α亞基和β亞基組成，氧氣對HIF-1的活性調節主要通過α亞基，缺氧可使缺氧誘導因子HIF-1α活性增高，HIF-1α是一種全局性缺氧應答的調控因子，可以通過特異性靶基因的結合，達到調控基因的轉錄[9]。有研究資料表明OSAHS患者中腭咽軟組織HIF-1α高表達，HIF-1α表達的增強與缺氧密切相關，同時在一些動物實驗也得到證實[10]。HIF-1α是一種適應低氧的重要中介物質，可介導缺氧誘導的調控，導致缺氧的誘導基因轉錄明顯增強，表達產物增多，產生相應的生理作用。有研究資料顯示，OSAHS患者血清中HIF-1α水平明顯高于健康對照組，并發現缺氧時其血清HIF-1α出現明顯升高，缺氧改善后其水平快速下降[11]。本組研究表明OSAHS合并高血壓患者機體HIF-1α水平明顯高于OSAHS患者，并隨著AHI提高而提高，并且患者得到有效治療后機體的HIF-1α出現明顯下降。說明OSAHS合并高血壓患者的HIF-1α水平與是否合并高血壓具有明顯的相關性，可作為評價OSAHS嚴重程度的一項指標，高血壓可能導致OSAHS患者機體的間歇性缺氧更為嚴重，使機體處于持續缺氧狀態，導致OSAHS合并高血壓的HIF-1α水平明顯高于非合并OSAHS患者。

8-iso-PGF-2α是一種自由基催化生物膜上的花生四烯酸發生過氧化形成的特異性代謝產物，特異性強，靈敏度高，結構穩定，不受食物影響，可反應機體的應激水平和疾病的嚴重程度，是評價機體氧化應激和脂質過氧化的理想指標[12]。本組研究表明OSAHS合并高血壓患者的8-iso-PGF-2α水平明顯高于單純OSAHS，而單純OSAHS明顯高于健康對照組，并且隨著AHI升高而升高，患者得到有效治療后機體的8-iso-PGF-2α明顯下降。說明OSAHS患者機體的氧化應激水平增強，考慮OSAHS患者由于缺氧，交感神經和腎素-血管緊張素-醛固酮系統興奮性增強，出現類似缺血再灌注損傷的病理生理過程，機體產生較多活性氧，使機體處于氧化應激狀態[13]。本組研究提示OSAHS合并高血壓患者的8-iso-PGF-2α水平明顯高于單純OSAHS，說明OSAHS合并高血壓患者處于更高的氧化應激水平。氧化應激促進高血壓的發展可能與血管內皮細胞損傷相關，造成舒血管和縮血管因子的失衡，平滑肌細胞增殖，繼而泡沫細胞形成，出現動脈粥樣硬化，導致OSAHS合并高血壓的形成[14]。故8-iso-PGF-2α可以作為OSAHS病情嚴重程度的檢測指標之一，可以作為OSAHS發生高血壓的預測因子。

本組研究顯示OSAHS合并高血壓患者3-NT水平與HIF-1α和8-iso-PGF-2α水平呈正相關，說明3-NT、HIF-1α和8-iso-PGF-2α參與了OSAHS疾病的發生發展過程，其水平反映了OSAHS的嚴重程度，可以作為OSAHS合并高血壓的重要預測因子。

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Significance of 3-NT,HIF-1α and 8-iso-PGF-2α in OSAHS patients with hypertension

LIYing,WANGXiufang.

QingpuBranchofZhongshanHospitalAffiliatedtoFudanUniversity,Shanghai201799,China

Objective To investigate the significance of 3-nitro-tyrosine (3-NT),hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) and 8-isoprostane (8-iso-PGF-2α) in obstructive sleep apnea hypopnea syndrome (OSAHS) patients with hypertension.Methods One hundred and forty-nine patients with OSAHS who were treated in our hospital from January 2010 to December 2015 were divided into simple OSAHS group (n=43) and OSAHS with hypertension group (n=106) according to whether OSAHS combined with hypertension.At the same time,35 healthy subjects were served as control group.The serum levels of 3-NT ,HIF-1α and 8-iso-PGF-2α were detected,and the correlation between the levels of 3-NT ,HIF-1α , 8-iso-PGF-2α and apnea-hypopnea index (AHI) in OSAHS patients with hypertension was analyzed,moreover after treatment,the changes of the levels of these factors were observed,besides, the correlation among these factors was analyzed.Results The serum levels of 3-NT,HIF-1α and 8-iso-PGF-2α in simple OSAHS group and OSAHS with hypertension group were significantly higher than those in control group (P<0.01),moreover,which in OSAHS with hypertension group were significantly higher than those in simple OSAHS group (P<0.01).The levels of 3-NT,HIF-1α and 8-iso-PGF-2αin OSAHS with hypertension group were increased with the increase of AHI (P<0.01),after treatment,the levels of 3-NT,HIF-1α and 8-iso-PGF-2α were significantly decreased,as compared with those before treatment (P<0.01).The levels of 3-NT were positively correlated to those of HIF-1α (r=0.594,P<0.05) and 8-iso-PGF-2α(r=0.647,P<0.05),moreover, the levels of HIF-1αwere positively correlated to those of 8-iso-PGF-2α (r=0.781,P<0.05).Conclusion The 3-NT,HIF-1α and 8-iso-PGF-2α are involved in the pathogenesis and development of OSAHS,which can be regarded as important predictors in patients with OSAHS complicated by hypertension.

3-nitro-tyrosine; hypoxia-inducible factor-1α; 8-isoprostane; obstructive sleep apnea syndrome; hypertension

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.11.004

201799 上海市，復旦大學附屬中山醫院青浦分院

R 544.1

A

1002-7386(2017)11-1616-04

2016-03-20)