江門地區老年性白內障患者結膜囊帶菌狀況的調查

葉群如　黎小妮　高麗麗

【摘要】 目的：了解江門地區50歲以上老年性白內障患者結膜囊帶菌狀況，分析細菌構成和對藥物的敏感性。方法：選擇2016年6-10月在本院住院的50歲以上的老年性白內障患者707例1414眼，在結膜囊無菌化準備前，采集結膜囊標本做細菌培養及藥敏試驗。結果：送檢1414份標本中，有菌生長106眼（7.5%），其中91眼（6.4%）有細菌生長，15眼（1.1%）有真菌生長。不同性別、眼別、年齡，結膜囊細菌檢出率比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。不同月份、不同居住地的結膜囊細菌檢出率比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。陽性標本中各菌種的構成比為，G+球菌75.5%（80/106），G+桿菌7.5%（8/106），G-桿菌1.9%（2/106），G-球菌0.9%（1/106），真菌14.2%（15/106）。藥物敏感試驗結果顯示，大多數G+球菌對克林霉素、妥布霉素、萬古霉素敏感，對林可霉素和諾氟沙星耐藥。整體而言，萬古霉素、左氧氟沙星的耐藥率較低。結論：江門地區50歲以上老年性白內障患者結膜囊可能帶有病原菌，并以G+球菌為主。大多數細菌對萬古霉素和耐藥的左氧氟沙星敏感。

【關鍵詞】 結膜囊； 細菌培養； 藥物敏感試驗

Investigation Bacterial Species of Conjunctiva Sacs of Patients with Senile Cataract in Jiangmen District/YE Qun-ru，LI Xiao-ni，GAO Li-li. //Medical Innovation of China，2017，14（17）：071-074

【Abstract】 Objective：To analyze the situation of conjunctival sac carrier in patients over 50 years old with senile cataract in the area of Jiangmen Method：A total of 707 patients of 1414 eyes with senile cataract aged over 50 years who admitted to our hospital from June to October in 2016 were selected. Before the preparation of conjunctival sac， specimens of conjunctival sac were collected for bacterial culture and drug sensitivity test.Result：Among 1414 pieces of inspected specimens， 106 eyes（7.5%） were bacterial growth.Among them，

91 eyes（6.4%） were bacterial growth bacteria and 15 eyes（1.1%） were fungal growth.There had no significant differences in the comparison regarding different sex，eyes，ages，and the detection rate of conjunctival sac bacteria（P>0.05）.The bacterial detection rate of conjunctival sac in different months and different places were statistically significant（P<0.05）.The constituent ratios of different bacteria in the positive samples were G+ cocci 75.5%（80/106），G+ bacillus 7.5%（8/106），G- bacillus 1.9%（2/106），G- cocci 0.9%（1/106），and fungi 14.2%（15/106）.It can be seen from the drug sensitivity test that most G+ coccus was sensitive to Clindamycin，Tobramycin，and Vancomycin and most G+ coccus was drug resistive to Lincomycin and Norfloxacin.Overall，the rates of drug resistance to Vancomycin and Levofloxacin were low.Conclusion：Pathogenic bacteria may be found in conjunctiva sacs among patients with senile catarace aged over 50 years in Jiangmeng District.The dominant bacteria are G+ coccus.Most of bacterias are sensitive to Vancomycin and Levofloxacin.

【Key words】 Conjunctival sac； Bacterial culture； Drug susceptibility test

First-authors address：Jiangmen Xinhui New Hope Eye Hospital，Jiangmen 529100，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.17.018

江門地區地處南亞熱帶季風氣候，高溫多雨，夏季可長達七八個月。高溫高濕的氣候環境為病原菌的生長繁殖提供了有利的條件[1]。同時，因日照時間長，廣東地區老年性白內障發病率很高，每年都有數以萬計的患者接受手術治療。一般認為，正常人結膜囊均不同程度存在病原微生物，主要是條件致病菌[2]。已有研究表明這些細菌是引起手術后感染的主要病原體[3-4]。因此，了解本地區結膜囊細菌分布，對指導本地區白內障圍手術期用藥、術前結膜囊無菌化準備及預防術后眼內炎的發生，具有非常重要的現實意義。本院就2016年6-10月江門地區50歲以上老年性白內障患者707例1414眼取結膜囊拭子做細菌培養及藥敏試驗，現報告如下。

1 對象與方法

1.1 對象 2016年6-10月江門地區（蓬江區、新會區、鶴山、開平）50歲以上老年性白內障患者707例1414眼。年齡50～95歲，平均（72.5±7.3）歲，中位年齡73歲。其中男318例636眼，女389例778眼。納入標準：患者年齡均在50歲以上，經檢查符合臨床白內障診斷標準[5]，無言語障礙、手術禁忌證及用藥禁忌證、資料不全者，術前經患者簽署知情同意書。排除標準：患者經檢查發現內分泌疾病、身體重要器官功能性障礙，精神疾病史以及感染性眼病（包括結膜炎、淚腺炎、角膜炎等）。

1.2 方法

1.2.1 標本采樣 患者取坐位，頭向后仰，眼向上方注視，充分暴露下穹隆部，將蘸有生理鹽水的棉拭子放置于下穹隆中外1/3交界部，向內眥部旋轉擦拭，避免接觸睫毛和瞼緣造成污染。

1.2.2 細菌培養、鑒定 將采集有結膜囊標本的棉拭子涂布于培養基上，立即送微生物劃線接種培養。在37 ℃含5%CO2恒溫孵箱中進行孵育2 d，觀察并記錄細菌生長情況。如72 h無細菌生長者為陰性，如發現細菌生長，則將出現菌種的標本接種于另一塊血瓊脂培養基上進行分離[6]。本次培養操作均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》要求進行培養，后行菌種鑒定及藥敏試驗。使用全自動細菌分析儀（型號Vitek2-compact 30生物梅里埃公司有限股份公司法國），以及VITEK32鑒定卡進行鑒定。使用藥敏卡（AST-GN13）對病菌進行藥敏分析，本次檢測所有操作且質控結果需符合國際臨床實驗室標準委員會（CLSI）標準。

1.2.3 抗菌藥物 本次對菌種進行藥敏試驗使用的常規抗菌藥物，包括克林霉素、頭孢他啶、林可霉素、諾氟沙星、萬古霉素、左氧氟沙星、妥布霉素。

1.2.4 治療方法 在了解患者菌種類型以及藥敏試驗后，為確保淚道通暢，術前以生理鹽水沖洗淚道，清除分泌物，并在術前1 d使用左氧氟沙星眼液，1次/h滴于患眼，同時對眼周皮膚、瞼緣以5%聚維酮碘消毒，以0.5%聚維酮碘消毒結膜囊。

1.3 觀察指標 由專業人員制定統一問卷對調查對象一般資料進行統計，內容包括性別、居住地區、民族、職業、發病月份、發病眼睛、年齡、病史以及生活習慣、環境等。

1.4 統計學處理 全部數據錄入計算機，采用SPSS 20.0軟件對所得數據進行統計分析，計數資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 結膜囊細菌陽性率影響因素 送檢1414份標本中，共培養出陽性細菌91份，陽性率為6.4%（91/1414）；真菌15份，陽性率為1.1%（15/1414）。總陽性率為7.5%（106/1414）。細菌培養結果顯示，細菌陽性率與性別、眼別、年齡無關，差異均無統計學意義（P>0.05），結膜囊細菌陽性率與患者居住地、檢查月份有關，差異均有統計學意義（P<0.05）。

2.2 結膜囊細菌中菌種構成 106份陽性標本中，陽性率最高的是G+球菌（75.5%），其中表皮葡萄球菌檢出率最高為55.7%，其次為微球菌屬檢出率為9.4%；真菌陽性率為（14.2%）、G+桿菌（7.5%），其中棒狀桿菌檢出率較高為4.7%，G-菌檢出率較低，G-桿菌陽性率為1.8%、G-球菌陽性率為0.9%。

2.3 結膜囊細菌對常見抗菌藥敏感情況統計 藥物敏感性試驗表明，大多數G+球菌對克林霉素、妥布霉素、萬古霉素敏感，對林可霉素和諾氟沙星耐藥。整體而言，萬古霉素、左氧氟沙星的耐藥率較低，見表3、4。

3 討論

隨著白內障疾病發病率逐年上升，每年行白內障手術治療者不斷增加，導致術后感染情況發生幾率增加，有研究表明，患者主要致病菌為結膜囊存在的病原微生物，因此為減少術后感染發生，了解本地區結膜囊細菌分布，對術前結膜囊無菌化準備以及術后眼內炎預防有重要意義[7-9]。既往研究顯示，結膜囊帶菌量、細菌種類和耐藥性受到性別、年齡、局部或系統性疾病、抗生素的使用、居住地，甚至季節等多重因素的影響，但隨著抗生素的廣泛應用，結膜囊帶菌率在降低，菌種、耐藥性也在變化[10]。

本次研究通過抽取不同地區老年性白內障患者進行調查，發現不同地區結膜囊細菌陽性率不同，結膜囊細菌陽性率與患者性別無關，這與部分文獻報道不同，但有文獻報道結膜囊細菌檢出率隨年齡增加[11-12]。本次調查對象為50～95歲老年性白內障患者，但結果表明結膜囊細菌陽性率與患者年齡無明顯關系，但數據顯示患者隨年齡增加結膜囊細菌陽性率有增加的趨勢。人體眼部由于有結膜、角膜上皮保護，同時有溶菌酶的水解以及角結膜表層淚液沖洗等，正常情況不易受到病菌感染，但老年者感染率歲年齡增加有上升趨勢，我們推測可能與老年人隨著年齡增長抵抗力下降、普遍淚膜穩定性變差，結膜囊自潔能力的減弱以及淚液中各種抗體、補體、乳鐵蛋白等防御性功能降低有關[13-14]。且老年者隨著年齡增加會有行動不便情況，因此有可能在衛生清潔這方面較差，淚道阻塞等外眼疾病發病率較高，造成老年者易受到感染。同時白內障疾病主要行手術治療，而這些手術需通過結膜囊徑路，一旦細菌通過房水進入眼內，而機體無法抵抗，就會造成免疫失衡，引發炎癥疾病。因此對老年患者，內眼手術前結膜囊的無菌化準備應引起高度重視，尤其在開展大規模防盲治盲白內障手術時，要特別關注老年人結膜囊帶菌狀況，并給予適當的干預，不僅如此在白內障治療術中、術后各個環節也要做好預防措施，減少術后眼內炎發生。

石明華等[15]報道了不同季節結膜囊細菌培養陽性率的差異有統計學意義，以春夏季節細菌培養陽性率高。本次調查發現在6-10月江門地區中老年人結膜囊細菌陽性率不同，且差異有統計學意義（P<0.05），細菌檢出率以6月份最高，這可能與外部環境如氣溫、空氣濕度等影響有關。

一項關于中國人結膜囊細菌培養的Meta分析研究結果表明，G+球菌、G+桿菌、G-桿菌常見，其平均檢出率分別為27.90%、8.96%、2.70%，構成比分別為70.59%、20.09%、7.17%[16]。G-球菌少見，偶見真菌[17]。本文細菌培養結果顯示，G+球菌是結膜囊內的主要寄生菌，其檢出率為6.4%，構成比為75.5%。排在第二位的是真菌，其檢出率為1.1%，構成比達到14.2%。同時G+球菌中以表皮葡萄球菌檢出率最高為55.7%，其次為微球菌屬為9.4%，G+桿菌以棒狀桿菌檢出率較高為4.7%，宋林等[18]學者對新疆哈薩克族白內障患者術前結膜囊細菌培養，結果G+球菌檢出率為88.3%，其中以葡萄球菌最多為66.4%，其次為微球菌屬9.8%。此次研究得出的結果低于文獻報道，這可能與氣候、采樣季節、環境衛生、抽樣人群及檢查方法不同有關，但結果顯示白內障致病菌以革蘭陽性細菌為主，且表皮葡萄球菌為主要致病菌與本次研究結果相符。在本次菌種鑒定中存在致病菌如金黃色葡萄球菌，但多數細菌為正常菌種、條件致病菌（如表皮葡萄球菌、棒狀桿菌等），G+球菌一般情況下常見條件致病菌是無致病性，但近些年由于廣譜抗菌藥物濫用等情況，導致病菌致病力及種類發生變化，這些病菌可能隱藏域晶狀體囊袋中在手術中進入玻璃體后繁殖引發炎癥，或因手術患者抵抗力下降、眼表微環境破壞后造成條件菌引發感染，因此術前無菌化準備以及術后預防措施是有必要性的[19-20]。

本次對江門地區50歲以上老年性白內障患者結膜囊帶菌狀況分析，發現50歲以上帶有病原菌可能較大，且以G+球菌為主，大多數細菌對萬古霉素和耐藥的左氧氟沙星敏感，通過研究認識結膜囊細菌分布，對于預防和治療眼部感染性疾病具有極其重要的意義。目前，由于地域、年齡、抗生素應用情況的差異、納入標準及培養基的不同、取材部位和方法的多樣性、樣本數量的差異等因素的影響，使得培養結果之間存在較大差異。因此，有必要統一培養標準，進行多中心協作，全面持續地監測結膜囊正常菌群的變遷。

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（收稿日期：2017-04-14） （本文編輯：程旭然）